содержание .. 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 ..

Часть III

Основные принципы работы фельдшера-лаборанта ‌

Глава 1 Основные принципы организации клинико-диагностической лаборатории ‌

Лабораторная служба, структура, задачи

Клинико-диагностическая лаборатория

Среди диагностических служб важное место занимает клиническая лабораторная диагностика, которая

дает практическому здравоохранению около 80 % объема объективной диагностической информации, необходимой для своевременной постановки диагноза и контроля за эффективностью проводимого лечения. Лабораторная служба обеспечивает повседневные запросы лечащих врачей в наиболее распространенных исследованиях (КДЛ общего типа), экстренном их выполнении в ургентной практике (экспресс-лаборатории), а также серийное производство наиболее сложных исследований (специализированные лаборатории).

Клинико-диагностическая лаборатория является

диагностическим подразделением лечебно-профилактического учреждения и создается на правах отделения. КДЛ должна иметь сертификат на избранный вид деятельности. КДЛ размещается в специально оборудованных

помещениях, полностью соответствующих требованиям правил по устройству, эксплуатации и технике безопасности.

Основными задачами КДЛ являются:

проведение клинических лабораторных исследований в соответствии с профилем ЛПУ (общеклинических, гематологических,

иммунологических, цитологических, биохимических,

микробиологических и других, имеющих высокую аналитическую и диагностическую надежность) в объеме согласно заявленной номенклатуре исследований при аккредитации КДЛ в соответствии с лицензией ЛПУ;
объем выполняемых исследований не должен быть ниже минимального объема, рекомендуемого для ЛПУ данной мощности;
внедрение прогрессивных форм работы, новых методов исследований, имеющих высокую аналитическую точность и

диагностическую надежность;
повышение качества лабораторных исследований путем систематического проведения внутрилабораторного контроля качества лабораторных исследований и участия в программе Федеральной системы внешней оценки качества;
оказание консультативной помощи врачам лечебных отделений в выборе наиболее диагностически информативных лабораторных тестов и трактовке данных лабораторного обследования больных;
обеспечение клинического персонала, занимающегося сбором биологического материала, детальными инструкциями о

правилах взятия, хранения и транспортировки биоматериала, обеспечивающими стабильность образцов и надежность результатов. Ответственность за точное соблюдение этих правил клиническим персоналом несут руководители клинических подразделений;
повышение квалификации персонала лаборатории;
проведение мероприятий по охране труда персонала, соблюдение техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима в КДЛ;
ведение учетно-отчетной

документации в соответствии с утвержденными формами.

В соответствии с указанными задачами КДЛ осуществляет:

освоение и внедрение в практику методов клинической лабораторной диагностики, соответствующих профилю и уровню лечебно-профилактического учреждения;
проведение клинических лабораторных исследований и выдачу по их результатам заключений.

В каждой лаборатории необходимо разработать и внедрить программу контроля качества используемого оборудования, которая включает проверку и

регистрацию состояния холодильников, водяных бань, термостатов, пипеток, таймеров, а также контроль качества дистиллированной воды (чистота, величина рН).

Глава 2 Взятие, условия хранения и доставка материала для проведения лабораторных исследований ‌ фельдшером

Доставка клинического и биохимического материала в клинико-диагностическую лабораторию

Выполняя лабораторные

исследования, работники лаборатории стремятся к наиболее

точному воспроизведению аналитических процедур для получения достоверного результата анализа, однако из практики работы любой лаборатории известно: результаты лабораторных анализов не всегда правильны. Среди многочисленных факторов, определяющих достоверность

лабораторных результатов, необходимо учитывать факторы преаналитического этапа.

Факторы преаналитического этапа

Канцелярские ошибки

Первый из возможных источников погрешностей связан с присущей человеку способностью

ошибаться. Канцелярские ошибки классифицируют на 3 типа: ошибочно назван больной, ошибочно идентифицирован образец и ошибочно заполнен бланк назначений. Канцелярские ошибки могут иметь серьезные последствия. Как только ошибка обнаружена, причина ее должна быть немедленно выявлена. Необходимы определенные мероприятия для предупреждения таких ошибок:

если имеются два больных с одинаковыми фамилиями, лаборант перед собиранием образца может спросить возраст у больного;
если возраст одинаковый, то к фамилии добавляется номер палаты;
каждый бланк с результатами должен проверять заведующий лабораторией (или его заместитель), так как очень трудно самому найти свою собственную ошибку.

Биологические факторы

Эта группа факторов имеет объективный, биологический характер и должна приниматься во внимание прежде всего врачом, назначающим лабораторное исследование пациенту.

Биологические факторы можно разделить на учитываемые и устранимые. Чтобы избежать нежелательных отклонений результатов от истинного содержания аналитов в организме пациента из-за

влияния устранимых биологических факторов (прием пищи, голодание, положение тела, физическая активность, курение, употребление алкоголя), перед исследованием пациенту и персоналу, собирающему биоматериал, должны быть даны четкие инструкции.

Учитываемые биологические факторы (пол, возраст, этнос, физическая тренированность, беременность, биоритмы, влияние среды обитания) необходимо помнить при интерпретации полученных результатов.

Ятрогенные факторы

диагностические процедуры (пальпация, пункция, биопсия,

функциональные тесты, физический стресс при нагрузках, эргометрии, эндоскопия, введение контрастных средств);
оперативные вмешательства;
различные лечебные процедуры (вливания и переливания, диализ, ионизирующее облучение);
лекарственные средства. Клиницисты порой забывают,

что диагностические и лечебные мероприятия, проводимые ими, небезразличны для деятельности ряда физиологических систем пациента, что отражается и на многих лабораторных показателях. Так, например, массаж предстательной железы, введение

катетера исказят активность кислой фосфатазы; физиотерапевтические процедуры, рентгеновские исследования изменят гематологические и биохимические показатели.

Разнообразие современного рынка лекарств и их применение в достаточно большом ассортименте создают все возрастающие трудности для обеспечения правильности лабораторных результатов на фоне применения этих медикаментов.

Очень важно собирать материал для исследования до начала приема лечебных препаратов.

При исследовании 17-КС необходимо исключить не менее чем

за 2 недели прием тестостерона и ряда лекарственных веществ, мешающих исследованию (либриум, элениум, метиприлон, хлорпромазин, дигитоксин).

Перед определением сахара необходимо приостановить лечение тетрациклином, хлортетрациклином, так как они, выделяясь с мочой, искажают результаты.

После приема больших доз аспирина меняются показатели билирубина, АлАТ, щелочной фосфатазы, калия и другие.

Условия взятия, временного хранения и транспортировка биоматериала

Большое значение для

результатов имеет техника взятия образца, используемые при этом инструменты, посуда, в которой хранится образец, условия его хранения и транспортировки.

Условия взятия биоматериала клиническим персоналом должны быть предметом постоянного внимания не только лечащих врачей, заинтересованных в получении достоверной лабораторной информации, но и руководителей медицинских учреждений. Как главный врач, так и главная медицинская сестра должны понимать, что нарушение правил взятия биоматериала чревато нежелательными последствиями

экономического (повторные трудозатраты по всей производственной цепочке: медсестра – санитарка – лаборант; излишняя трата расходных материалов и т. д.) и медицинского характера (повторное взятие биоматериала у пациента; задержка принятия необходимых для ведения пациента диагностических и лечебных решений; возможность медицинских ошибок, наносящих ущерб пациенту).

Пожалуй, наиболее простой и в то же время эффективной мерой служит соблюдение единого правила взятия крови натощак, утром, без физического напряжения в

предшествующий период; в положении пациента лежа или сидя; острой иглой достаточно большого диаметра, чтобы не возникало никаких повреждений эритроцитов, способных вызвать гемолиз; при наложении жгута на минимально необходимое время. Существенную помощь при этом может оказать применение различных устройств типа

«вакутейнеров», т. е. вакуумных пробирок, накрытых резиновой мембраной и содержащих необходимые консерванты. Стандартизованная цветная маркировка снижает возможность перепутывания пробирок,

предназначенных для определенных видов исследования. Тем самым решается сразу несколько задач: сокращается время взятия крови за счет ее ускоренного всасывания в вакуумную пробирку; кровь немедленно вступает в контакт с необходимым для сохранения аналита консервантом; пробирки поступают в лабораторию уже маркированными в соответствии с их предназначением для аналитической процедуры.

Упомянутые выше источники погрешностей не поддаются контролю качества (как на аналитическом этапе). Их в большинстве случаев не очень легко

распознавать. Поэтому следует добиться стандартизированных условий, обязательных при взятии биопроб.

Кроме того, необходимо помнить о важности регулярного инструктирования персонала клиник и амбулаторий о правилах и условиях собирания и хранения биологического материала для различных клинико-диагностических исследований. Для этого в каждой лаборатории должна быть разработана инструкция по взятию, доставке и хранению биоматериала. Сотрудники лаборатории проводят первоначальную подготовку всего персонала по пользованию

указанной инструкцией.

В случае несоблюдения условий образцы не подлежат обработке, и об этом сообщается лечащему врачу для повторного проведения исследования.

Правила подготовки обследуемых, взятия и условия хранения и доставки материала для проведения исследований в КДЛ

Исследование мочи

Общие принципы сбора мочи

Для общего анализа мочу собирают утром натощак сразу после сна в сухую, чистую посуду. Перед сбором мочи проводят тщательный туалет наружных половых органов. Лежачих больных подмывают

слабым раствором

марганцовокислого калия, затем вытирают сухим стерильным ватным тампоном от половых органов к заднему проходу. По возможности надо собирать мочу сразу в посуду, в которой она доставляется в лабораторию.

Собранную мочу как можно быстрее доставляют в лабораторию!

Собирание суточной мочи

Пациенты собирают мочу в течение 24 ч на обычном питьевом режиме (1,5–2 л в сутки). Утром в 6–

8 ч больной освобождает мочевой пузырь (эту порцию мочи выливают), а затем в течение суток всю мочу собирают в чистый сосуд с крышкой.

Последняя порция берется точно в то же время, когда накануне был начат сбор. Если не вся моча направляется в лабораторию, то количество мочи измеряют мерным цилиндром, отливают часть в чистый сосуд и обязательно указывают объем суточной мочи.

Мочу во время сбора хранят в холодильнике. В первую порцию собираемой за сутки мочи добавляют консерванты:

тимол: несколько кристаллов тимола на 100 мл мочи;
формалин: приблизительно 3–4 капли на 100 мл мочи;

3) хлороформ:	2–3	мл
хлороформной воды	(5	мл

хлороформа на 1 л воды) на 100 мл мочи;

борная кислота: 3–4 гранулы на 100 мл мочи;
ледяная уксусная кислота:

5 мл на все количество суточной мочи.

Нельзя использовать мочу во время менструации.

Исследования мочи по методу Нечипоренко

Для исследования мочи по методу Нечипоренко собирают среднюю порцию утренней мочи и немедленно доставляют в лабораторию во избежание разрушения клеточных элементов.

Проба по Зимницкому

Собирают за сутки 8 порций мочи: в 6 ч утра больной опорожняет мочевой пузырь (эта порция выливается). Затем, начиная с 9 ч утра, точно каждые 3 ч собирают 8 порций мочи в отдельные банки (до 6 ч утра следующего дня). На каждой банке отмечается время сбора мочи. Все порции мочи доставляют в КДЛ. Желательно, чтобы количество жидкости, выпитой пациентом в эти сутки, превышало 1–1,5 л.

Исследование кала

Кал для исследования должен быть собран в чистую, сухую, широкогорлую посуду, желательно стеклянную. Следует избегать примеси к калу мочи, выделений из

половых органов, лекарств.

Кал доставляется в лабораторию утром; желательно, чтобы с момента дефекации до исследования прошло не более 12 ч (при условии хранения на холоде). Нельзя направлять кал на исследование после клизм, а также рентгенологического исследования желудка и кишечника.

При исследовании кала, основной целью которого является определение функциональной способности пищеварительного тракта, т. е. степени усвоения пищевых веществ, необходимо в течение 4–5 дней соблюдать

специальную	диету,	содержащую
установленное		количество

различных пищевых продуктов. Можно использовать 2 диеты – Шмидта и Певзнера; диета Шмидта является щадящей, диета Певзнера представляет максимальную пищевую нагрузку для здорового человека.

Диета Шмидта: дневной рацион (распределяется на 5 приемов пищи)

– 1–1,5 л молока, 2–3 яйца всмятку, белый хлеб с маслом, 125 г мяса,

200 г картофельного пюре, овсяная каша. Общая калорийность – 2250 калорий.

Диета Певзнера: дневной рацион: 200 г белого и 200 г черного хлеба, 250 г жареного мяса, 100 г масла, 40 г сахара, жареный

картофель, морковь, салаты, квашеная капуста, гречневая и рисовая каши, компот, свежие фрукты. Общая калорийность – 3250 калорий.

При выборе диеты необходимо учитывать состояние органов пищеварения, а также привычный характер питания. Пробную диету дают в течение 4–5 дней, копрологическое исследование проводят троекратно: на 3, 4, 5-й день (при условии ежедневного самостоятельного опорожнения кишечника).

При невозможности использовать указанные диеты достаточно обычной смешанной

пищи, содержащей необходимые пищевые вещества в умеренном, но достаточном количестве.

При исследовании кала с целью обнаружения скрытого кровотечения за 3 дня до анализа следует исключить из диеты мясо, рыбу, зеленые овощи, помидоры, а также лекарства, содержащие металлы (железо, медь).

Сбор материала для исследования на простейшие

Кал на лямблии исследуют трехкратно с интервалом в 5 дней.

Если кал оформленный, то перед сбором на исследование нужно принимать солевое слабительное в течение 3–5 дней: 5 %-ный

сернокислый			магний
(приготовленный	из	20	%-ного

раствора в разведении 1: 4) по 1 ч. л. 3 раза в день после еды детям до 5 лет, 1 дес. л. 3 раза в день – до 8 лет, по 1 ст. л. 3 раза в день – старше 8 лет.

Кал собирают в чистую, обязательно сухую посуду, так как дезинфицирующие средства, примесь простой воды или мочи губительно действуют на простейших.

Нельзя проводить исследование после масляных клизм, приема бария или висмута.

Доставлять кал необходимо в теплом виде в течение 30 мин после

дефекации либо в замороженном виде в течение суток.

Сбор материала для исследования на яйца гельминтов

Кал для исследования на яйца гельминтов забирают из разных мест разовой порции (общее количество – 10–15 г) в сухую стеклянную посуду менее суточной давности. Соскоб с перианальных складок делают с помощью деревянного шпателя, смоченного в 50 %-ном растворе глицерина или 1 %-ном растворе соды.

Осторожно производят легкое соскабливание по всей окружности анального отверстия с поверхности перианальных складок, соскоб

проводят утром до дефекации, у женщин – и до мочеиспускания. Полученный материал снимают со шпателя краем покровного стекла и помещают в каплю 50 %-ного глицерина на предметном стекле.

Если соскоб производят в лаборатории и полученный материал должен быть доставлен в КДЛ через некоторый интервал времени, для удобства транспортировки можно использовать пузырьки от пенициллина: шпатель после соскабливания опускают в пенициллиновый пузырек с 2–3 каплями 50 %-ного глицерина и ставят пузырек в ячейку коробки.

Исследование спинномозговой

жидкости

Спинномозговую жидкость получают путем люмбальной пункции, которую проводит врач- клиницист. Люмбальную пункцию производят между остистыми отростками III и IV или IV и V поясничных позвонков. Для проведения пункции укладывают больного на бок, при этом ноги должны быть согнуты в коленях, притянуты к животу, чтобы обеспечить согнутое положение позвоночника. Чтобы найти место пункции, проводят линию (тампоном, смоченным йодом), соединяющую высшие точки гребней подвздошных костей (линия Якоби).

Эта линия обычно пересекает остистый отросток четвертого поясничного позвонка. Кожу тщательно дезинфицируют, вводят иглу с мандреном. Когда игла достигает подпаутинного пространства (расстояние от поверхности кожи до канала 6–7 см), мандрен вынимают и собирают вытекающую жидкость. Количество жидкости, извлекаемой без вреда для больного, – 8-10 мл. Место пункции закрывают стерильным материалом, больного оставляют в положении лежа на спине без подушки в течение суток. В лабораторию ликвор должен быть доставлен немедленно после пункции в стерильных пробирках,

закрытых стерильными ватными пробками. Для предотвращения образования сгустка фибрина в пробирки добавляют по 1 капле ЭДТА.

Повторную пункцию больному рекомендуется проводить не ранее чем через неделю.

Исследование дуоденального содержимого

Взятие дуоденального

содержимого проводит медицинская сестра путем дуоденального зондирования.

Время взятия – 8–9 ч утра. Подготовка пациента:

отменяются все лекарства, содержащие панкреатические

ферменты, как минимум за сутки до исследования (лучше – за 3 дня). Зондирование проводят натощак после 14-часового голодания; разрешается выпить немного воды (несколько глотков), но не позднее чем за 2 ч до исследования.

Зонд вводят в положении больного сидя. При этом больной должен спокойно дышать и делать активные глотательные движения. Обычно через 5-10 мин первая метка оказывается у зубов, т. е. олива достигает желудка; больного укладывают на правый бок и подкладывают под правый бок валик; больной продолжает медленно заглатывать зонд до второй метки.

Дальнейшее продвижение зонда через привратник осуществляется благодаря перистальтике желудка, этот период обычно продолжается 1,5 ч. Свободный конец зонда опускается в одну из пробирок, находящихся в штативе на скамеечке ниже изголовья больного. Пока олива находится в желудке, из зонда вытекает желудочное содержимое – мутная жидкость кислой реакции. При прохождении оливы в двенадцатиперстную кишку в пробирку начинает поступать прозрачная желтая желчь щелочной реакции. Желчь собирают отдельными небольшими порциями в ряд пробирок (в каждую пробирку

собирают желчь примерно в течение

мин). Проконтролировать правильное положение зонда можно пробой с воздухом: шприцем вводят в зонд немного воздуха: при нахождении зонда в желудке больной ощущает поступление воздуха и урчание, если зонд находится в двенадцатиперстной кишке, никаких ощущений нет. Желчь выделяется по каплям, неравномерно, первые порции обычно золотисто-желтого цвета, прозрачны, слегка вязкой консистенции. Эта желчь происходит из желчного протока и обозначается как порция «А». Через 10–20 мин после начала выделения желчи вводят раздражитель, вызывающий

сокращение желчного пузыря. Некоторые раздражители вводят через зонд, например 30–50 %-ный раствор сернокислого магния, или оливковое масло, или яичные желтки, раствор 10 %-ного сорбита. Другие раздражители вводятся парентерально: наилучшим раздражителем для желчного пузыря является холецистокинин, который вводят внутривенно в дозе 75 ЕД (1 ампула).

Через 15–20 мин отмечают выделение «пузырной» желчи темно- оливкового цвета (порция «В») обычно в количестве 30–60 мл. Если после введения раздражителя сокращения желчного пузыря не

наступило, то повторно вводят тот же раздражитель. Продолжительность выделения порции «В» – 10–15 мин. После опорожнения желчного пузыря выделяется более светлая и прозрачная печеночная желчь – порция «С». После получения 2–3 пробирок этой порции зонд извлекают, предварительно пропустив через него 20–30 мл воды или раствора глюкозы, чтобы удалить желчь.

Все полученные порции желчи как можно быстрее доставляют в КДЛ. Анализ желчи следует проводить сразу после получения, так как клетки могут разрушаться под действием ферментов.

При проведении дуоденального зондирования детям зонд вводят на меньшее расстояние, чем взрослым. Это расстояние зависит от возраста: новорожденным – до 25 см, детям до
месяцев – до 30 см, 1 года – до 35 см, 2–6 лет – 40–50 см, 6-14 лет – 45–55 см.

Исследование мокроты

Обычно собирают утреннюю порцию мокроты до приема пищи (в 8–9 ч утра), полученную путем откашливания. Следует избегать попадания в образец слюны и секрета носоглотки или синусов. Мокроту собирают в чистую сухую широкогорлую склянку.

Предварительно больной

должен прополоскать рот и глотку кипяченой водой и вычистить зубы. Если мокрота спонтанно не отделяется, можно применить ингаляцию смеси растворов хлорида натрия (15 %) и пропиленгликоля (20 %), предварительно подогретой до 37 °C. После ингаляции в течение 20 мин больной обычно откашливает мокроту.

Желательно доставить в лабораторию и исследовать свежевыделенную мокроту как можно скорее, хотя для некоторых исследований (например, исследование на микобактерии туберкулеза) отсрочка не приносит большого вреда.

При невозможности немедленного исследования мокроту необходимо хранить в прохладном месте, лучше – в холодильнике. Нецелесообразно собирать мокроту за большой промежуток времени (более суток), так как длительное стояние приводит к размножению бактерий и аутолизу элементов мокроты.

Исследование желудочного содержимого

Взятие желудочного

содержимого проводит медицинская сестра в 8–9 ч утра.

Накануне и в день зондирования пациент не должен курить. Отменяются все медикаменты за 24 ч

до зондирования. Зондирование проводится натощак после 14- часового голодания. Перед зондированием необходимо вынуть съемные зубные протезы.

Различают два способа зондирования: одномоментный и фракционный. Одномоментное зондирование проводится при помощи толстого зонда (резиновая трубка длиной 80 см, с внутренним просветом 8 мм, с двумя отверстиями на закругленном конце). В настоящее время этот метод почти не применяется. Зондирование толстым зондом может применяться как лечебная процедура при промывании желудка. С

диагностической целью зондирование желудка проводят фракционным способом с помощью тонкого зонда, представляющего собой тонкую резиновую трубку длиной 110–150 см, с диаметром просвета 2–3 мм, с закругленным желудочным концом (без оливы) с двумя отверстиями на нем. Зонд имеет 2 метки: на расстоянии 50 и

70 см от конца. Введение тонкого зонда производится при активном участии пациента. Зонд вводят обычно в положении больного сидя, конец зонда помещают в глубине глотки на корень языка, при этом больной должен глубоко дышать и неторопливо глотать. Больной не

должен запрокидывать голову, а стараться наклонять ее кпереди. У лиц с повышенным рвотным рефлексом зонд может быть введен через нос или после анестезии корня языка и зева раствором новокаина.

Введение зонда до первой метки свидетельствует о нахождении конца его в области дна желудка, а продвижение до второй метки – о нахождении в области привратника желудка. Проконтролировать положение зонда можно рентгенологически. Для ориентировочного расчета можно пользоваться рекомендацией: вводить зонд на глубину, равную росту больного в сантиметрах минус

100.

На наружный конец зонда

надевают шприц, через который отсасывают все содержимое желудка (порция натощак). Надо стремиться, чтобы время от начала введения зонда до извлечения порции

«натощак» не превышало 5 мин. Затем в течение 1 ч отсасывают содержимое желудка каждые 15 мин (базальный секрет). Аспирацию производят по 5 мин с 10- минутными интервалами. Затем применяют стимулятор желудочной секреции и собирают желудочный сок, выделяющийся на фоне активной стимуляции. В качестве стимуляторов применяют

энтеральные и парентеральные раздражители.

Из энтеральных раздражителей наиболее физиологичным является капустный сок или 7 %-ный отвар сухой капусты.

После аспирации порции натощак и четырех 15-минутных порций базальной секреции в желудок через зонд при помощи воронки вводят 200 мл отвара капусты, подогретого до 37 °C, через

10 мин извлекают 10 мл содержимого (контрольная порция) и еще через 15 мин – все содержимое желудка (остаток пробного завтрака), затем в течение 1 ч каждые 15 мин аспирируют чистый желудочный сок.

В качестве парентеральных раздражителей используют гистамин. После аспирации порции

«натощак» и четырех базальных порций, собранных в течение 1 ч с 15-минутными интервалами, пациенту подкожно вводят гистамин в дозе: для фосфорнокислого гистамина 0,01 мг/кг веса тела, для дигидрохлорида гистамина – 0,008 мг/кг веса тела. Затем в течение 1 ч продолжают аспирировать содержимое желудка каждые 15 мин (4 порции).

Все порции желудочного содержимого (9 порций: 1 – натощак, 4 базальных и 4 – после стимуляции) доставляются в лабораторию сразу

после зондирования, их желательно исследовать без промедления.

В случае противопоказаний к зондированию желудка применяют беззондовые исследования – определение кислотности желудочного сока при помощи препарата «Ацидотест». Для этого исследования собирают мочу в 8–9 ч утра, натощак, не менее чем через 8 ч после последнего приема пищи. Накануне и в день исследования запрещается употребление спиртных напитков, любых лекарств и окрашивающих мочу пищевых продуктов.

Больной опорожняет мочевой пузырь, затем принимает 2 таблетки

кофеина, спустя 1 ч опорожняет мочевой пузырь. Эта порция мочи собирается и служит контролем. Сразу же после этого пациент проглатывает 3 желтых драже, не разжевывая и запивая их небольшим количеством воды. Через 1,5 ч вновь опорожняет мочевой пузырь в отдельную посуду. Обе порции доставляются в лабораторию.

Исследования выпотных жидкостей

Выпотную жидкость (экссудаты

и транссудаты) получают при помощи пункции серозных полостей (плевральной, брюшной, перикарда и др.).

Пункцию производит врач.

Полученную жидкость собирают в чистую сухую посуду, в лабораторию тотчас же после пункции направляют все количество полученной жидкости. Для предотвращения свертывания и потери клеточных элементов (со сгустком) к жидкости добавляют лимоннокислый натрий (1 г на 1 л жидкости), тщательно перемешивая стеклянной палочкой.

Исследование секрета предстательной железы Секрет предстательной железы получают после энергичного массажа предстательной железы, проводимого врачом в течение 3–4 мин. Секрет собирают в чистую сухую пробирку.

Если в результате проведения массажа выделений не получено, то после массажа собирают первую порцию мочи и в ней изучают структуры, характеризующие состояние предстательной железы.

Исследование семенной жидкости

Получение эякулята происходит

с помощью вибрационного устройства в специальном кабинете. Оптимальный результат дает исследование секрета, полученного после 3-4-дневного полового воздержания. Собирают материал в чистый стеклянный градуированный сосуд, исследуют либо сразу после получения, либо доставляют в

лабораторию в охлажденном состоянии как можно скорее (в пределах 1 ч) после семяизвержения. Недопустимо собирать и доставлять эякулят в лабораторию в презервативе, так как в этом случае происходит быстрое разрушение сперматозоидов.

Исследование биоматериала на урогенитальный хламидиоз и микоплазмоз

Перед взятием материала из

уретры рекомендуется задержка мочеиспускания до 1,5–2 ч и более; при наличии обильных гнойных выделений соскоб надо брать либо сразу, либо через 15–20 мин после мочеиспускания. При отсутствии

выделений следует провести массаж уретры с помощью одноразового зонда для взятия материала.

В уретру мужчин зонд вводят на глубину 3–4 см (область ладьевидной ямки), в уретру женщин – на 1–1,5 см (после предварительного ее массажа о лонное сочленение) – и делают несколько вращательных движений его кончиком. У детей зонд в уретру не вводят, материал берут с ее наружного отверстия.

При взятии материала у женщин из цервикального канала предварительно удаляют слизистую пробку стерильным ватным тампоном и обрабатывают шейку матки стерильным физраствором.

Зонд вводят в канал шейки матки на глубину 0,5–1,5 см. При наличии эрозий шейки матки их обрабатывают стерильным физраствором и материал берут зондом с границы здоровой и измененной ткани. При извлечении зонда необходимо полностью исключить его касание стенок влагалища. После этого материал помещают на предметное стекло в виде мазка-отпечатка, многократно касаясь его поверхности кончиком зонда с биоматериалом.

Исследование биоматериала на урогенитальный трихомониаз

Материалом для исследования

служит отделяемое из уретры,

цервикального канала, влагалища, секрет предстательной железы и выделения из других возможных очагов заболевания.

Материал для исследований у женщин следует брать перед менструацией или через 1–2 дня после ее окончания.

Перед исследованием пациент не должен мочиться в течение 3–4 ч. Женщины, кроме того, в день явки на обследование не должны спринцеваться и проводить туалет половых путей. Перед обследованием следует воздерживаться от половых сношений. За 5–7 дней до обследования необходимо прекратить прием медикаментов и лечебные

процедуры, проводимые при лечении урогенитальных заболеваний, так как они могут воздействовать на влагалищные трихомонады, деформируя и обездвиживая их. Нецелесообразно брать на исследование свободно стекающую каплю уретральных выделений, так как трихомонады в ней деформированы. При наличии обильных выделений проводят туалет уретры стерильным теплым физраствором.

У мужчин в уретру вводят стерильный зонд на 4–5 см и осторожно, легким поскабливанием со слизистой уретры берут ее отделяемое для исследования.

У женщин при отсутствии явлений острого уретрита и обильных выделений перед взятием материала из уретры проводят ее массаж в течение 0,5–1 мин о лонное сочленение. Соскоб берут со слизистой уретры и с заднего свода влагалища. Перед взятием материала из канала шейки матки влагалищная ее часть обтирается стерильным тампоном, смоченным физраствором, убирается слизистая пробка. Стерильный зонд вводят в цервикальный канал осторожно на глубину не более 1–1,5 см.

При хроническом и вялотекущем мочеполовом

трихомониазе лабораторные

исследования целесообразно проводить после провокации. Рекомендуется применять один из следующих методов провокации:

биологическая: однократно вводят внутримышечно гоновакцину в количестве 500 млн микробных тел взрослым и 100–200 млн микробных тел детям старше 3 лет. Детям до 3 лет гоновакцину не вводят;
термическая: женщинам проводят диатермию в течение 3 дней по 30, 40, 50 мин или индуктотермию в течение 3 дней по 10, 15, 20 мин. Через один час после каждого прогревания производят взятие отделяемого из уретры, цервикального канала и прямой

кишки;
механическая: мужчинам проводят массаж уретры на буже в течение 10 мин, а женщинам накладывают металлический колпачок на шейку матки на 4 ч, после чего проводят взятие материала и исследуют его;
алиментарная: за 24 ч до лабораторных исследований употребляют соленую, острую пищу, а также алкоголь.

Провокации не проводят женщинам во время менструации. Взятие материала производят как после провокации, так и через 24– 48–72 ч.

Материал для исследования

берут специальными одноразовыми зондами, либо стерильной ложкой Фолькмана, либо ушным зондом с затупленным концом.

Исследование отделяемого из урогенитального тракта на гонорею

Материалом для исследования

служит у мужчин отделяемое уретры и прямой кишки, у женщин – отделяемое уретры, шейки матки, прямой кишки. У детей исследуют содержимое влагалища и прямой кишки. Взятие материала должен производить лечащий врач. Отделяемое уретры у мужчин захватывают краем предметного стекла и равномерно размазывают на

двух предметных стеклах либо берут стерильной петлей или специальным зондом из глубины уретры, предварительно очистив ее отверстие тампоном, смоченным стерильным физраствором.

У женщин материал для исследования из уретры, бартолиниевых желез и парауретральных ходов после обтирания их ватным тампоном, смоченным физраствором, берут влагалищным пинцетом или специальным зондом. Из прямой кишки материал берут тупой ложечкой.

При хронической и торпидной гонорее перед исследованием для

повышения вероятности выявления возбудителя проводят провокацию одним из способов, приведенных выше (как при диагностике трихомониаза).

Нельзя брать материал ватным тампоном. Нельзя брать материал во время менструации.

Гематологические исследования

Для исследования

гематологических показаний используется капиллярная и венозная кровь. Взятие капиллярной крови осуществляется лаборантом, венозной – медицинской сестрой.

Взятие крови осуществляется натощак в утренние часы, в случае

необходимости – в любое время суток.

Взятие крови необходимо проводить в одноразовых резиновых перчатках: в тех случаях, когда это невозможно, перед каждым взятием перчатки следует обрабатывать 70 %- ным спиртом.

При взятии венозной крови вены пережимаются манжетой на время не более 30 с (проверить, чтобы пережатие не коснулось артерий – пульс должен прощупываться). Место пережатия должно быть выше места прокола на 8-10 см.

У больных с цианозом следует использовать иглы большего диаметра (вязкость крови выше). При

внутривенных переливаниях крови или лекарственных веществ взятие крови осуществляется как можно дальше от места переливания.

Пробирки с ЭДТА должны быть чистыми, плотно закрываться. Объем крови, необходимый для исследования, маркируется на пробирке в соответствии с количеством антикоагулянта, помещенного в пробирку. Оптимальная концентрация солей ЭДТА в сухом виде – 1,5 мг на 1 мл крови; в растворе: 1 мкл 15 %-ного раствора К2 ЭДТА или К3 ЭДТА на 1 мл крови, или 10 мкл 7,5 %-ного раствора Na2 ЭДТА на 1 мл крови. При взятии крови пробирка

заполняется ею наполовину, затем содержимое хорошо и быстро перемешивают (не встряхивая), далее заполняют кровью до отметки. Набирая кровь, пробирку необходимо вращать. Не трясти! Непосредственно перед

исследованием кровь

перемешивается легким покачиванием в течение 2 мин.

Капиллярную кровь у взрослых получают из ладонной поверхности рук, мочки уха, у детей – из боковой поверхности пятки или подошвенной поверхности большого пальца ноги или мочки уха. Глубина прокола – 2–

3 мм. Кожа прокалывается скарификатором. Первая капля крови

удаляется сухой стерильной ватой, так как содержит кусочки поврежденной ткани. Вторая капля используется для исследования. Кровь не должна выдавливаться.

Кровь набирают в индивидуальные, стерильные,

предварительно обработанные трилоном Б капилляры непосредственно с кожи и выдувают в стерильные пробирки.

Правильно собранная кровь должна быть доставлена в лабораторию не позднее 60 мин после ее взятия (табл. 13).

Осмотическая резистентность эритроцитов определяется в венозной крови с гепарином. В

пробирку с 2 каплями гепарина берут кровь из вены в количестве 1,5 мл и тщательно перемешивают покачиванием. Свежая кровь с антикоагулянтом сохраняется при 15–20 °C в течение 2 ч.

Таблица 13. Условия хранения материала

Биохимические исследования

Взятие материала для биохимических исследований

должно проводиться натощак. Последний прием пищи должен быть за 12 ч до взятия, что особенно важно для липидов, глюкозы, мочевины, мочевой кислоты. Исключением из этого правила являются исследования, которые проводятся при неотложных состояниях в любое время, но с учетом этого фактора.

Время взятия – с 7 до 9 ч утра при плановых исследованиях, в любое время – для срочных случаев диагностики.

Взятие биожидкости осуществляется до проведения диагностических или лечебных процедур: операций, инфузий,

переливаний крови, растворов, пункций, инъекций, приема лекарств, пальпаций, массажа, эндоскопий, ЭКГ, рентгена.

Сдавливание вен при наложении жгута при взятии крови должно быть минимальным и не превышать 1 мин.

При динамическом наблюдении за пациентом взятие материала нужно проводить в идентичном положении тела примерно в одно и то же время дня.

Использование венозной крови более предпочтительно, чем капиллярной, так как она лучше отражает состояние организма.

Существуют 3 возможности получения венозной крови, когда

после венепункции:

кровь самостоятельно стекает в пробирку;
кровь аспирируется шприцем;
кровь забирается с помощью вакуумных пробирок.

Для биохимических исследований венозную кровь получают без аспирации шприцем из-за опасности возникновения гемолиза. Она применяется только в случае «трудных вен».

В зависимости от того, какой материал необходимо получить (сыворотку или плазму), кровь, если нет специальных устройств для взятия, собирают в чистые сухие центрифужные пробирки без добавок

(для получения сыворотки) либо с добавлением антикоагулянтов (для получения плазмы). При взятии венозной крови для определения глюкозы в пробирки добавляют ингибиторы гликозида (табл. 14).

Таблица 14. Ингибиторы гликозида

В случае проведения вливаний кровь следует взять до вливания. Если это невозможно, то взятие

проводится из вен другой руки; если и это невозможно, то из той вены, в которую проводится вливание, но ниже места вливания.

При взятии крови после вливания оно должно проводиться не ранее чем через 1 ч для растворов и через 8 ч – для жировых эмульсий.

При взятии крови через катетер канюлю промывают физраствором объемом, соразмерным с объемом катетера; первые 5 мл крови удаляют. Капиллярная кровь для биохимических исследований используется в тех случаях, когда для определения требуется малый объем крови, в педиатрии; у взрослых капиллярная кровь чаще всего

используется для определения глюкозы или лактата.

Кровь должна вытекать свободно. Массирование пальца для стимуляции тока крови, сильное сжатие и выдавливание крови должны быть исключены.

Кровь при свободном стекании собирается в коллекторную микропробирку для последующего получения сыворотки.

В направлении на анализ при взятии биожидкостей необходимо указать:

отделение;
фамилию врача, затребовавшего анализ;
данные пациента (Ф.И.О.,

возраст, пол, стационарный или амбулаторный больной, номер истории болезни, предполагаемый диагноз);
дату и время взятия крови или мочи;
цель исследования.

Направление на анализ подписывается врачом.

Полученная биожидкость должна быть доставлена в лабораторию как можно быстрее (табл. 15). Пробирки не следует заполнять до краев. Пробирки должны быть закрыты крышками. Цельную кровь, полученную без антикоагулянтов, не следует помещать в холодильник до доставки

в лабораторию во избежание гемолиза.

Центрифугирование производится не позднее чем через 1 ч после взятия биожидкости.

Приготовление сыворотки и плазмы выполняет лаборант.

Сыворотку получают из спонтанно свернувшейся цельной крови. Венозная кровь, полученная без антикоагулянтов в центрифужную стеклянную пробирку, отстаивается в ней при комнатной температуре (15–25 °C)

30 мин до полного образования сгустка или помещается в термостат при температуре 37 °C на 15 мин. Затем стеклянной палочкой

осторожно проводят по внутренним стенкам пробирки по окружности в верхнем слое крови для отделения сгустка от стенок. Сыворотку сливают в другую центрифужную пробирку и центрифугируют либо центрифугируют в тех же первичных пробирках при 1,2 оборота в минуту в течение 10 + 5 мин.

В случае использования микропробирок и центрифуги для них центрифугирование проводят при 6-15 тыс. оборотов в течение 1,5 мин. После центрифугирования сыворотку сливают во вторичные пробирки.

Таблица 15. Требование по времени выполнения некоторых

преаналитических этапов для биохимических исследований

Венозную кровь, полученную с

гепарином (0,75 мг/мл), немедленно после взятия перемешивают переворачиванием пробирок с

кровью, закрытых крышками, не менее 5 раз. Если плазму нужно получить из капиллярной крови, собранной в микропробирки с ЭДТА (1 мг/мл), то после взятия крови содержимое пробирки перемешивают осторожным переворачиванием не менее 10 раз. Смешивание можно проводить и качательными движениями. Перемешивание должно осуществляться без встряхивания и пенообразования.

Пробирки с кровью центрифугируют при 1000–1500 оборотах в течение 10–15 мин. Плазму немедленно сливают во вторичные центрифужные пробирки.

Доставка крови в клинико- диагностическую лабораторию для определения электролитов, газов крови и системы гемостаза

Правила подготовки обследуемых, взятие и условия хранения и доставки материала для проведения исследований в КДЛ

Исследование кислотно- основного равновесия и газов крови

В качестве биоматериала для

определения кислотно-основного равновесия и газов крови предпочтительны артериальная и артериализированная капиллярная кровь. Материал должен быть взят в анаэробных условиях для

исключения газообмена с окружающим воздухом. В шприце или капилляре с кровью не должно быть пузырьков воздуха.

Взятие производится из лучевой, локтевой, бедренной и других артерий шприцем или через катетер, находящийся в артерии; артериализированной капиллярной крови – из мочки уха или пятки в капилляры. Взятие артериальной крови из артерии осуществляет врач, артериализированной капиллярной крови – медсестра.

Антикоагулянт используется в жидкой или сухой форме. Жидкий гепарин легко смешивается с кровью, но его использование в шприцах

может приводить к ошибкам, связанным с разведением крови. Сухой гепарин несколько медленнее смешивается с кровью, чем жидкий. У лиофилизированного гепарина этого недостатка нет. В случаях одновременного определения газов крови и электролитов в цельной крови рекомендуется использовать забуференный раствор гепарината лития с конечной концентрацией, соответствующей 8—

МЕ/мл крови для стеклянных и 4–6 МЕ/мл для пластиковых сосудов. Взятие крови можно производить и в стеклянные, и в пластиковые шприцы (но в пластиковых исследование должно

быть проведено в течение 5 мин).

В стерильный стеклянный шприц на 5-10 мл с помощью отдельной иглы набирают 100 мкл стерильного раствора гепарината лития с активностью 12–30 МЕ/мл, при этом внутренние стенки шприца полностью смачиваются гепарином при оттягивании поршня, насаживают на шприц иглу, направляют шприц с иглой вверх и выпускают раствор гепарина.

В асептических условиях пунктируют лучевую артерию. После взятия крови одновременно вытягивают иглу и шприц. Шприц закрывают пробкой и содержимое его перемешивают между ладонями.

Если исследование не может быть выполнено в течение 5 мин, закупоренный шприц с кровью помещают в стакан с водой и с кусочками льда не более чем на 1 ч для стеклянного шприца и на 30 мин

– для пластмассового. До проведения измерения после ледяной бани шприцы с кровью выдерживают при комнатной температуре в течение

10 мин. Перед измерением кровь перемешивают переворачиванием шприца 10 раз и горизонтальным вращением в течение 10 с.

При взятии крови через артериальный катетер первую порцию крови, равную 3 объемам системы катетера до места взятия

крови, удаляют.

Артериализированную капиллярную кровь получают из мочки уха. Мочка уха смазывается со всех сторон финалгоновой мазью. Через 10 мин мазь стирают салфеткой, мочка уха промывается

70 %-ным спиртом, вытирается насухо стерильной салфеткой. Стерильным скарификатором, конец которого смочен стерильным гепарином, делают прокол глубиной 3–5 мм на нижней внешней поверхности края мочки уха. Каплю крови удаляют, на рану наносят 1 каплю раствора гепарината лития. Следующие 3 капли крови не используются и стираются. Затем в

образующуюся следующую каплю крови вводят первый капилляр, избегая попадания пузырьков воздуха. Мочку уха нельзя массировать и сдавливать.

Кровь должна течь свободно в капилляр, ее не собирают с кожи. После взятия крови один конец капилляра закрывается крышкой, в капилляр помещается металлический штифт («блошка»). Капилляр закрывают крышкой или замазывают замазкой с другого конца. По капилляру из конца в конец 5 раз проводят магнитом для перемешивания крови. Как правило, кровь берут в 2 капилляра, объем крови на исследование составляет

0,15 мл.

Если анализ не выполняется тотчас после взятия крови, загерметизированные стеклянные капилляры с кровью немедленно помещают в сосуд со льдом не более чем на 1 ч.

При хранении во льду за 10 мин до анализа капилляр с кровью нужно выдержать при комнатной температуре. Перед анализом кровь повторно перемешивают в течение 5- 10 с.

Перед введением крови в анализатор металлический штифт удаляют из капилляра.

Исследования системы гемостаза

Взятие венозной крови проводит медсестра, капиллярной крови – лаборант.

Кровь из вены у обследуемого берут утром, путем пункции локтевой вены сухой острой короткой иглой с широким просветом без шприца, желательно – без наложения жгута на руку. При плохих венах допустим кратковременный веностаз лишь во время ввода иглы в вену посредством наложения слабой перетяжки – не более 30 мм. Допустимо производить легкий массаж предплечья по направлению от кисти к локтевому сгибу. Первые 5–6 капель крови выпускают на ватный тампон, так

как они могут содержать тканевой тромбопластин.

Кровь в пробирки набирают свободным током, перемешивая ее с антикоагулянтом покачиванием или легким встряхиванием, не допуская образования воздушных пузырьков. До центрифугирования пробирки ставятся в ледяную баню (кружка со льдом и водой). Интервал времени между забором крови и началом исследования существенно сказывается на многих параметрах коагулограммы (табл. 17).

Поэтому в результатах анализа следует отмечать время взятия крови и время проведения исследования, чтобы при наблюдении в динамике

интервал времени был одинаков и результаты сопоставимы.

Пробирки должны быть стеклянными силиконированными, либо пластиковыми и мерными, либо иметь метку, до которой должна быть набрана кровь, чтобы было соблюдено правильное соотношение крови и антикоагулянта, равное 9:1, если гематокрит близок к нормальному. При значительных отклонениях гематокрита от нормы нужные объемы крови и антикоагулянта берут в соотношениях, указанных в таблице 16.

Таблица 16. Соотношение крови и антикоагулянта для определения

гематокрита

Таблица 17. Время хранения крови для проведения отдельных исследований систем гемостаза

В качестве антикоагулянта

рекомендуется использовать 3,8 %- ный раствор цитрата натрия, поскольку в цитратной крови (плазме) лучше сохраняются факторы свертывания крови и тромбоциты.

Раствор оксалата натрия (1,34 %) используется ограниченно,

так как оксалаты образуют с кальцием растворимое соединение (в плазме появляется мелкая зернистость), ускоряется агрегация тромбоцитов, ускоряется инактивация V и VIII факторов. Плазму готовят центрифугированием 15–20 мин при 3 тыс. оборотов в минуту.

Некоторые тесты могут быть выполнены из плазмы, полученной из капиллярной крови (ПТВ).

Прокол кожи на пальце проводят глубиной около 4 мм. Первые две капли крови удаляют, последующие используют для исследования. Кровь из ранки выдавливать не рекомендуется, так как при этом

увеличивается примесь тканевого тромбопластина. Соотношение крови и цитрата – 9:1.

Доставка материала в клинико- диагностическую лабораторию для иммунологических и микробиологических исследований

Иммунологические исследования

Для исследования иммунной

системы организма используют венозную кровь (плазму, сыворотку, форменные элементы: эритроциты, лейкоциты, лимфоциты),

капиллярную кровь, а также биологические жидкости: мочу, слюну, желчь, молоко и т. д.

Венозную кровь забирает медсестра, капиллярную кровь – лаборант или врач (определение группы крови, резус-фактора).

Кровь у обследуемых берут утром, натощак, путем пункции локтевой вены сухой острой короткой иглой с широким просветом в чистую сухую пробирку в количестве 5–6 мл. У новорожденных можно брать пуповинную кровь. У грудных детей кровь обычно берут из лобной, височной или яремной вены.

Если для исследований

используют плазму или форменные элементы крови, кровь забирают в мерные пробирки или пробирки, имеющие метку, до которой должна быть набрана кровь. В пробирки предварительно вносят антикоагулянт.

Для забора крови желательно использовать пластиковую посуду. Стеклянные пробирки часто несут на поверхности следы детергентов, а также обладают способностью обмениваться ионами с кровью.

Удобно использовать коммерческие вакуумные пробирки, заполненные точным объемом и определенной, соответствующей концентрацией необходимого в

конкретном случае антикоагулянта.

Наиболее часто используют трикалиевую или динатриевую соли ЭДТА, тринатрий цитрат и гепарин.

Несоответствие концентрации антикоагулянта объему взятой крови, недостаточно тщательное смешивание могут привести к значительным ошибкам (табл. 18).

Таблица 18. Соотношение крови и антикоагулянта

Плазму для определения иммуноглобулинов можно получить из капиллярной крови, взятой с помощью туберкулинового шприца

из безымянного или указательного пальца. Предварительно шприц смачивают раствором гепарина (200 ЕД/мл) и высушивают в термостате при 37 °C в течение 24 ч. Шприцы, обработанные гепарином и высушенные, могут храниться в течение двух недель. Кровь из пальца берут в объеме 0,5 мл, переносят в центрифужную пробирку и несколько раз встряхивают. Затем кровь центрифугируют при 1 тыс. оборотов в минуту 5 мин. Плазму отсасывают в пластиковые пробирки. Полученная кровь должна быть своевременно доставлена в лабораторию. От забора до анализа кровь может стоять при комнатной

температуре 2 ч, сыворотка – 48 ч в холодильнике. Полученный материал не рекомендуется хранить более 12 ч при комнатной температуре и более 1 суток в холодильнике (температура 4–8 °C). Наступающий гемолиз может повлиять на результаты анализа. Лучше всего сразу после взятия крови отобрать из нее сыворотку или плазму. Плазму можно хранить при -20 °C более длительное время.

Осадок используют для приготовления клеточной суспензии. Для этого к осадку, полученному из 0,5 мл крови, добавляют 1 мл 1 %- ного раствора желатина, приготовленного на среде 199.

Ставят в термостат при 37 °C на 30 мин. Отбирают в центрифужную пробирку надосадочный слой, состоящий из клеток белой крови. К надосадочной жидкости добавляют 2–3 мл среды 199. Тщательно перемешивают. Центрифугируют при

1 тыс. оборотов в минуту 10 мин. Надосадочную жидкость сливают. К осадку добавляют 0,5 мл среды 199 и с помощью интенсивного 3-4- кратного пипетирования размешивают. Лейкоцитарная взвесь готова к употреблению.

Для определения групп крови по системе АВО используют капиллярную и венозную кровь. Взятие капиллярной крови проводит

лаборант непосредственно перед определением. 0,05 мл крови сухой стеклянной палочкой наносят рядом с каждой каплей стандартной сыворотки.

Кровь можно брать из вены, пальца или из мочки уха. Исследуемую кровь берут в сухую несиликонированную пробирку. Для отделения сыворотки кровь центрифугируют и оставляют стоять на 20–30 мин. Из пробирки, содержащей исследуемую кровь, пипеткой извлекают сыворотку. Пробирку со свернувшейся кровью энергично встряхивают для отделения эритроцитов.

Температура в помещении, где

проводится исследование, должна быть 15–25 °C (при температуре воздуха выше 25 °C агглютинация может быть не замечена, ниже 15 °C

– может появиться неспецифическая агглютинация).

Для определения резус-фактора исследуют эритроциты крови.

Кровь из вены берут в сухую пробирку в количестве 3 мл. После свертывания крови отделяют сыворотку от сгустка. Эритроциты отмывают от остатков сыворотки изотоническим раствором хлористого натрия. Для этого пробирку с кровью на 3/4 заполняют изотоническим раствором, содержимое перемешивают и

центрифугируют. Надосадочную жидкость сливают из отмытых эритроцитов, готовят 2 %-ную взвесь. В промаркированных пробирках смешивают 2,45 мл изотонического раствора и 0,05 мл осадка отмытых эритроцитов.

Кровь стабильна при 4–8 °C в течение 2–3 суток.

Микробиологические исследования

Общими требованиями к

процедуре отбора и транспортировки проб являются:

знание оптимальных сроков для взятия материала на исследование;
взятие материала с учетом

места максимальной локализации возбудителя, путей выделения в окружающую среду;
отбор материала для исследования в необходимом и достаточном объеме с обеспечением условий, исключающих контаминацию проб;
по возможности – взятие материала до применения антибиотиков и других химиотерапевтических препаратов или после отмены антибиотиков через 2–3 дня;
материалы, подлежащие бакобследованию, собирают в стерильную посуду, снабжают этикеткой с фамилией обследуемого

и наименованием материала. В сопроводительном документе- направлении необходимо указать, какое отделение направляет материал, Ф.И.О. и возраст больного, предполагаемый диагноз, антибактериальную терапию, дату и час взятия пробы;
материал доставляется проинструктированным медработником в контейнерах, не допуская опрокидывания. При транспортировке не допускается смачивание ватных пробок и замораживание материала;
материал доставляется немедленно или в течение 1–2 ч. При невозможности доставки в

указанные сроки биоматериал хранят в холодильнике, кроме крови и материала, исследуемого на наличие менингококка. При увеличении времени доставки проб до 48 ч необходимо использовать транспортные среды;
доставленные в лабораторию пробы должны быть размещены в специально отведенном месте для приема биоматериала. На работников лаборатории при приеме возлагается контроль за соблюдением правильной доставки образцов;
категорически запрещается доставка материала в лабораторию обследуемыми лицами;
в случае несоблюдения

условий образцы не подлежат обработке, и об этом сообщается лечащему врачу для повторного проведения исследования.

Инструкция по взятию исследуемого материала для микробиологических исследований

Кровь

Кровь у больного берут процедурная сестра и лаборант в процедурном кабинете или в палате в зависимости от состояния больного.

Кровь для посева рекомендуется брать по возможности до начала антибиотикотерапии или через 12–

24 ч после последнего введения препарата больному.

Посев проводится во время

подъема температуры.

Рекомендуется брать кровь 2–4 раза в сутки, при остром сепсисе – 2–3 взятия из различных мест в течение 10 мин.

При наличии у больного постоянного подключичного катетера или капельницы в вене можно воспользоваться ими для получения крови только в течение 3 дней, так как наступает контаминация катетера. Некоторому количеству крови дают свободно стечь в пробирку, затем набирают кровь в шприц для посева. Посев крови производят над спиртовкой.

Кровь берется у взрослых в количестве 5-20 мл, а у детей – 1-

15 мл и из шприца без иглы над спиртовкой засевается во флаконы с питательной средой в соотношении крови и среды 1:10. Флаконы с кровью доставляются в лабораторию немедленно.

Спинномозговая жидкость

Взятие ликвора проводится как можно раньше, желательно до начала антибиотикотерапии.

Берут ликвор в стерильную пробирку с крышкой в количестве 1– 3 мл.

Доставляют в лабораторию, где тотчас, пока ликвор теплый, его подвергают анализу; при отсутствии такой возможности материал сохраняют при температуре 37 °C в

термостате в течение 2–3 ч.

Во время транспортировки ликвор следует тщательно предохранять от охлаждения. Для этого используют грелки, термос.

Моча

Исследуют, как правило, утреннюю порцию мочи.

До взятия мочи проводится предварительный туалет наружных половых органов.

При мочеиспускании первая порция мочи не используется. Начиная с середины мочеиспускания, моча собирается в стерильную посуду в количестве 3-10 мл, плотно закрывается стерильной пробкой.

Желательно доставлять пробы

мочи в лабораторию немедленно. При отсутствии такой возможности моча может храниться от момента взятия до начала исследования при комнатной температуре 1–2 ч и не более 24 ч при температуре 4 °C.

Кал

При инфекционных заболеваниях (ОКИ, тифо- паратифозные заболевания, дизентерия) и внутрибольничных инфекциях желудочно-кишечного тракта материал берется с первых часов и дней поступления больного до начала антибиотикотерапии.

Взятие образцов производится минимально 2 раза. Испражнения для посева берут сразу после

дефекации. Сбор их осуществляется из судна, горшка, пеленки, тщательно дезинфицированных и многократно отмытых горячей водой. Из посуды кал забирают стерильным шпателем или палочкой в стерильные банки с крышкой, пробирки. В отбираемые пробы включают патологические примеси (гной, слизь, хлопья).

При невозможности получения испражнений материал забирают непосредственно из прямой кишки с помощью ректальных тампонов. Тампон смачивают в физрастворе, вводят на 8-10 см и затем помещают в стерильную пробирку.

Кал доставляют в лабораторию не позднее 1–2 ч после сбора.

Материал может сохраняться при температуре 2–6 °C 24 ч.

Исследование абсцесса

Исследуют гной, биоптат стенок абсцесса.

Исследуемый материал в максимально возможном количестве берется стерильным шприцем и в нем же с закрытой иглой доставляется в лабораторию немедленно либо может храниться в холодильнике 2 ч.

Мокрота

Больной перед откашливанием чистит зубы и полощет рот кипяченой водой. Мокроту собирают в стерильную банку или флакон с крышкой.

Если мокрота отделяется плохо, рекомендуется накануне назначить отхаркивающее или дать больному вдохнуть 25 мл 3-10 %-ного физраствора через распылитель.

Мокрота может храниться 2 ч при комнатной температуре и 24 ч в холодильнике. При сборе мокроты больной не должен собирать слизь, слюну.

Мокрота, состоящая из слюны и частиц пищи, не исследуется.

Носоглоточная слизь, гнойное отделяемое миндалин, отделяемое из носа

Взятие материала проводится

натощак или не ранее чем через 2–

4 ч после еды. Корень языка

придавливают шпателем, материал берут стерильным тампоном, не касаясь языка, слизистой щек и зубов.

При исследовании носоглоточной слизи на менингококк пользуются изогнутым стерильным ватным тампоном. Тампон вводят концом вверх за мягкое нёбо в носоглотку и проводят 3 раза по задней стенке.

У больных ангинами при подозрении на дифтерию материал берут с миндалин сухим тампоном. При наличии налетов материал следует брать с границы здоровых и пораженных тканей, слегка нажимая на них тампоном.

Материал на сухих тампонах доставляется в лабораторию в течение 2 ч. Материал доставляется в сумках с грелками.

Исследование на коклюш и паракоклюш

Исследуют носоглоточную

слизь, носоглоточный смыв, транстрахеальные аспираты.

Фиксируют голову пациента, вводят тампон глубоко в ноздрю, оставляют там на 15–30 с, вынимают и помещают в стерильную пробирку. При сборе материала изо рта тампон вводят за мягкое нёбо, стараясь не задеть язык и миндалины. Снимают слизь с задней стенки глотки, осторожно вынимают тампон,

который помещают в стерильную пробирку.

При сборе материала непосредственно на питательные среды материал получают, подставляя вертикально во время кашля больному чашку Петри со средой и держа ее на расстоянии 5- 10 см в течение нескольких секунд, чтобы уловить 5–6 кашлевых толчков. Чашку с посевом быстро закрывают крышкой, заворачивают в бумагу и в вату.

Материал доставляют в лабораторию немедленно, при температуре 22–37 °C. В зимнее время в контейнер помещают грелки (35–40 °C).

Хранить при температуре 37 °C 2–3 ч.

Исследование катетеров

Взятие материала на исследование проводят врач-хирург или медсестра. Область кожи вокруг катетера обрабатывают тампоном с

70 %-ным спиртом. В условиях асептики извлекают катетер и стерильными инструментами отрезают 5 см дистального конца катетера прямо в стерильную пробирку или в стерильную чашку. Кусочки катетера немедленно доставляют в лабораторию, чтобы предотвратить высыхание. Хранить при температуре +4 °C в течение 24 ч.

Исследование ран

Взятие проводят врач, медсестра. Кожу вокруг раны предварительно обрабатывают 70 %- ным спиртом или другим антисептиком. Некротические массы, детрит, гной удаляют стерильной салфеткой. Гной или другой экссудат собирают шприцем и переносят в максимально возможном количестве в стерильную пробирку. Взятие материала можно проводить стерильным тампоном. Материал берут двумя тампонами, один из которых используют для микроскопии, а другой для посева.

Патологический материал должен быть доставлен в

лабораторию немедленно. Если это невозможно, образцы должны быть помещены в холодильник и храниться при температуре +4 °C в течение 2 ч. При взятии материала в коммерческие транспортные системы срок хранения увеличивается до 48–72 ч при температуре +5 °C.

Исследование транссудатов и экссудатов Исследуемый материал собирается в асептических условиях в стерильную емкость и немедленно доставляется в лабораторию. Если немедленная доставка невозможна, образцы хранятся в течение 2 ч при температуре +4 °C.

Исследование отделяемого

глаз

Отделяемое (гной, секрет,

соскоб) рекомендуется собирать до местного применения антибиотиков и других медикаментов или не ранее чем через 5–6 ч после отмены всех медикаментов и процедур.

Материал, собранный в кабинете врача (посевы, мазки), доставляется в лабораторию не позже 2 ч с момента посева. Тампоны могут храниться в течение

24 ч при температуре +4 °C в холодильнике.

При подозрении на дифтерию тампоны доставляются в лабораторию не позднее 3 ч после взятия материала. При увеличении

срока доставки используют транспортные среды; срок доставки увеличивается на 24 ч. В осенне- зимнее время материал доставляется в сумках с грелками.

При подозрении на гонококковую инфекцию собранный материал доставляется в течение 1–

2 ч в баклабораторию. При невозможности доставки в указанный срок при использовании среды сохранения материал может храниться при температуре +4 °C в холодильнике и отправляться в лабораторию не позже 24 ч с момента взятия материала.

Исследование желчи

Желчь берут при зондировании

двенадцатиперстной кишки в процедурном кабинете. Сбор осуществляется в три отдельные стерильные пробирки по 5-10 мл каждой порции.

Желчь нужно доставить в лабораторию не позже 2 ч с момента взятия. Хранение в течение 24 ч при температуре +4 °C.

Следует обращать внимание на внешний вид получаемого материала, проверять его реакцию (рН), так как кислая реакция, наличие хлопьев свидетельствуют о примеси желудочного сока. Материал с содержанием желудочного сока непригоден для исследования на наличие энтеробактерий (табл. 19).