BOND 6.0 Пайдаланушы нүсқаулығы (2021) - 9

 

  Главная      Книги - Разные     BOND 6.0 Пайдаланушы нүсқаулығы (2021)

 

поиск по сайту            правообладателям  

 

   

 

   

 

содержание      ..     7      8      9      10     ..

 

 

 

BOND 6.0 Пайдаланушы нүсқаулығы (2021) - 9

 

 

12. Тазарту және қызмет көрсету (BOND-III және BOND-MAX)
5.
Аспирациялық зондты төменгі қалыпта ұстап тұруды жалғастыра отырып, оқшаулағыш
блогының артынан қосқұлақ-бұранданы бекітіңіз (Сурет 12-5 нөмірі 4). Бұранданы саусақпен
қатты тартыңыз
Бұранданы тартпаңыз, себебі ол аспирациялық зондты зақымдауы мүмкін.
Аспирациялық зондты жоғары немесе төмен бұруға немесе жылжытуға болатынын байқаңыз.
Ол қозғалмауы тиіс.
Зондқа әр тарапынан қарап, барлық жағынан тігінен тұрғанына көз жеткізіңіз. Егер зонд тік
болмаса, қосқұлақ-бұранданы әлсіретіп, оның дұрыс орналасқанына көз жеткізіңіз. Егер зонд
әлі тік болмаса, яғни иілген болса, оны жаңасына ауыстырыңыз.
6.
Аспирациялық зонд түтігінің ажыратып-қосқышын "тізбек" блогына сасаусақпен бұрап
жалғаңыз (Сурет 12-5 2 нөмір). Тартпаңыз.
7.
Аспирациялық зондтың тіреуі толығымен көтерілгеніне көз жеткізіңіз, содан кейін өңдеу
модулін қосыңыз. Өңдеу модулі жұмысты бастағанда жүйені толтырады - жүйені толтыру
барысында сұйықтықтың ағуына көз жеткізу үшін жалғауларды және зонд ұшын тексеріңіз.
8.
Аспирациялық зондты ауыстыра отырып, диалог терезесінде Иә растау батырмасын басыңыз.
Егер жаңа аспирациялық зондтың дұрыс орнатылғанына сенім болмаса, онда Жоқ батырмасын
басыңыз және қолдау қызметімен хабарласыңыз.
9.
Жаңа аспирациялық зондтың дұрыс орнатылғанына көз жеткізу үшін, бояу тиісті түрде
жүргізілетініне көз жеткізу үшін зерттелетін тіннің үлгілерін немесе гистологиялық бақылау
үлгілерін өңдеңіз.
BOND 6.0 пайдаланушы нұсқаулығы (АҚШ пен Қытайға арналмаған)
299
12. Тазарту және қызмет көрсету (BOND-III және BOND-MAX)
12.7
Шаю блогы және араластыру станциясы
Араластыру станциясында реагенттерді араластыру үшін алты бөлік бар. Ол шаю блогына салынады.
Сурет 12-7: Шайылатын аймағы (1) және араластыру станциясы (2) көрсетілген шаю блогының
жоғарыдан қарағандағы түрі
Иммуногистохимияда және in situ гибридтеуінде пайдаланылатын
реагенттердің кейбірі қауіпті. Жұмысты жалғастырмас бұрын, қауіпсіздік
бойынша тиісті дайындықтың барына көз жеткізіңіз.
Араластыру станциясын түсі мен жалпы күйін өзгерту мәніне тұрақты түрде тексеріп, қажет болған
жағдайда оны ауыстырыңыз. Ай сайын станцияны әдеттегі қызмет көрсету тәртібімен ауыстырыңыз.
Станцияны жою алдында барлық өңдеу циклдары аяқталғанына көз жеткізіңіз.
Араластыру станциясын шығару үшін араластыру станциясының артқы жағында тілшені ұстап және
оны көтеріңіз.
Араластыру станциясын тазарту
Араластыру станциясы, егер ол зақымданбаған және түсі айтарлықтай өзгермеген болса, сондай-ақ,
егер ол дұрыс тазартылса, жоспарлы ай сайынғы ауыстырылғанға дейін қайта пайдаланылуы мүмкін.
1. Егер тазарту қажет болса, кемінде 30минутқа деионсыздандырылған судағы жаңа 0,5% натрий
гипохлорит ерітіндісі (салмағы / өң). салыңыз .
2. Жаңа деионсыздандырылған суға 10 рет алып салыңыз.
3. Химиялық реактивтің тазалығы бар спиртте кем дегенде 10 минутқа сулаңыз.
4.
30 секунд бойына шайқаңыз, одан кейін шығарыңыз.
5. ауада құрғатыңыз.
Шаю блогын тазарту
Шаю блогын түктер қалдырмайтын шүберекті пайдаланумен апта сайын тазартыңыз.
Шаю блогының тесіктерін тазарту үшін мақта таяқшаларын немесе мақтасы
бар басқа да құралдарды пайдаланбаңыз - егер мақта ажыратылп кетсе, онда
ол тесіктердің бітелуіне әкеп соғуы мүмкін.
300
12. Тазарту және қызмет көрсету (BOND-III және BOND-MAX)
12.8
Қаптамалар, есіктері мен қақпағы
Апта сайын қаптамаларды, есіктерді (егер болған жағдайда) және өңдеу модулінің қақпағын матамен
тазартыңыз.
Қандай да бір тазалағыш құралдарды пайдаланбаңыз, қажет болған жағдайда, ластанудың
жиналуына жол бермеу үшін, қаптамадан, есіктерден және қақпақтан шаңды сүртуге арналған түктер
қалдырмайтын сулы шүберекті пайдалануға болады.
Егер қаптама, есік немесе қақпақ бүлінген немесе зақымданған болса, оны ауыстыру үшін Қолдау
қызметімен хабарласыңыз.
12.9
Сәйкестендіргіштерді санауыш
Негізгі роботтың қолындағы идентификатордың терезесі препараттардың тиісті түрде анықталуы
үшін таза болуы тиіс. Апта сайын, сондай-ақ, санаушы сәйкестендіргішті жиі дұрыс оқи алмаса,
терезені 70% спирт ерітіндісіне суланған түктер қалдырмайтын матамен тазартыңыз.
Сурет 12-8: Сәйкестендіргіштерді санауыш
BOND 6.0 пайдаланушы нұсқаулығы (АҚШ пен Қытайға арналмаған)
301
12. Тазарту және қызмет көрсету (BOND-III және BOND-MAX)
12.10
Тегендер
Егер реагенттің немесе қалдықтардың көзге көрінетін шашырауы болса, тегендерді ай сайын немесе
одан да жиі тазартыңыз. Егер науаншаларда артық төгілген сұйықтық немесе тұз шөгіндісі болса,
қолдау қызметімен хабарласыңыз.
l
12.10.1 - BOND-III үлкен контейнерлеріне арналған тегендер
l
12.10.2 - BOND-III аппаратының тегені
l
12.10.3 - BOND-MAX үлкен контейнерлеріне арналған теген
302
12. Тазарту және қызмет көрсету (BOND-III және BOND-MAX)
12.10.1
BOND-III үлкен контейнерлеріне арналған тегендер
BOND-III аппараттың жоғарғы және төменгі деңгейлерінде үлкен контейнерлер астында орналасқан
үлкен контейнерлерге арналған екі теген бар.
BOND-III үлкен контейнерлердің тегендерін тазарту үшін келесі процедураны орындаңыз:
1. Өңдеу модулінің іске қосылмағандығына көз жеткізіңіз.
2. Барлық үлкен контейнерлерді шығарып алыңыз.
3. Әрбір үлкен контейнерлердің салмақ датчигін қорғайтын қара қақпақтарды шешіп алыңыз (
қараңыз). Әрбір қақпақты 70% спиртке малынған матамен немесе дәкемен сүртіңіз.
BOND-III үлкен контейнерлерге арналған салмақ датчиктерінің
қақпақтары бар тегендер
4. Тегендерді 70% спирт ерітіндісімен сүртіңіз. Ашық тұрған металл салмақ датчиктеріне тимеңіз.
5. Тегендерді қағаз сүлгімен құрғатыңыз.
6. Барлық үлкен контейнерлерді сүртіңіз және оларды өз орындарына салыңыз.
BOND 6.0 пайдаланушы нұсқаулығы (АҚШ пен Қытайға арналмаған)
303
12. Тазарту және қызмет көрсету (BOND-III және BOND-MAX)
12.10.2
BOND-III аппаратының тегені
BOND-III төмендегі Сурет 12-9 көрсетілгендей, аппараттың астында орналасқан үшінші теген бар.
Сурет 12-9: BOND-III аппаратының тегені
Аппарат тегеніне қол жеткізу үшін келесі процедураны орындаңыз:
1. Аппарат астындағы тегенді табыңыз (Сурет 12-9 қараңыз) және оны сыртқа шығарыңыз.
Тегеннің салмағын ұстап, сұйықтықтың таралуын болдырмау үшін екі қолды пайдаланыңыз.
2. Науашаны босатыңыз және қалдықтарды сіздің мекемеіңізде бекітілген рәсімдерге сәйкес
кәдеге жаратыңыз.
Ескертпе: тегеннің артқы бұрышында ағызуды жеңілдету және шайқалуды болдырмау үшін
ағытпа бар.
3. Науаны спирттің 70% ерітіндісімен жуып, одан кейін орнына қайта салыңыз.
304
12. Тазарту және қызмет көрсету (BOND-III және BOND-MAX)
12.10.3
BOND-MAX үлкен контейнерлеріне арналған теген
BOND-MAX үлкен контейнерлерге арналған бөлімте үлкен контейнерлердің астында орналасқан бір
теген бар.
Үлкен контейнерлердің тегеніне қол жетім үшін келесі процедураны пайдаланыңыз:
1. Өңдеу модулі іске қосылмағандығына көз жеткізіңіз, содан кейін барлық үлкен контейнерлерді
шығарып алыңыз.
2. Тегенді шығарып алып, 70% спирт ерітіндісімен малынған матамен немесе дәкемен сүртіңіз.
3. Тегенді қағаз сүлгімен құрғатыңыз және өз орнына қайта салыңыз (бүгілген шетін аппараттың
алдыңғы жағына қаратып).
4. Барлық үлкен контейнерлерді сүртіңіз және оларды өз орындарына салыңыз.
12.11
Препараттарға арналған науашалар
Ай сайын препараттарға арналған науашаларды жылы сабынды сумен және ағынды сумен шаюмен
тазартыңыз. Қолданар алдында әрдайым препараттарға арналған науашалар құрғақ екендігіне көз
жеткізіңіз. Бүлінген немесе зақымдалған науашаларды ауыстырыңыз.
12.12
Сұйықтықтарды үлкен контейнерлерден құюға
арналған роботтардың зондтары (тек BOND-III)
Сұйықтықтарды үлкен контейнерлерден құюға арналған әрбір роботтың зонды ай сайын 70% спирт
ерітіндісімен ылғалданған жұмсақ матамен немесе спиртті майлықпен тазартуды талап етеді.
Тазарту барысында зондтарды тозу мәніне тексеріп, қажет болған жағдайда оларды ауыстырыңыз.
l
12.12.1 - Сұйықтықтарды үлкен контейнерлерден құюға арналған роботтардың зондтарын
тазарту
l
12.12.2 - Сұйықтықтарды үлкен контейнерлерден құюға арналған роботтардың зондтарын
ауыстыру
12.12.1
Сұйықтықтарды үлкен контейнерлерден құюға арналған
роботтардың зондтарын тазарту
Сұйықтықтарды үлкен контейнерлерден құюға арналған роботтардың зондтарын ай сайын
тазартыңыз, зондтарды бүгілуін болдырмаңыз.
BOND-III сұйықтықтарды үлкен контейнерлерден құюға арналған роботтар
препараттарды бояу блоктарының бойымен жылжиды, бұл пайдаланушыларға
тазарту үшін қол жеткізуге мүмкіндік береді. Бұл процедураны ықтималды
қауіптер туралы ескертілген және тиісті дайындықтан өткен операторлар ғана
орындауы тиіс.
BOND 6.0 пайдаланушы нұсқаулығы (АҚШ пен Қытайға арналмаған)
305
12. Тазарту және қызмет көрсету (BOND-III және BOND-MAX)
1. Өңдеу модулі әрекет етпейтінін және өңдеу циклдары жүктелмегенін, жоспарланбағанын және
орындалып жатпағанына көз жеткізіңіз.
2.
3.Клиникалық клиентте Жүйенің жай-күйі (System status) экранын көрсету үшін өңдеу
модулі қойындысын таңдаңыз.
3. Қызмет көрсету (Maintenance) қойындысын басыңыз, содан кейін сұйықтықтарды
үлкен контейнерлерден құю роботтарының зондтарын Тазарту (Clean bulk fluid
robot probes) батырмасын басыңыз.
4. Үлкен контейнерлердің сұйықтықтарын құю роботтарының зондтарын тазарту
(Clean bulk fluid robot probes) диалогындағы нұсқауларды мұқият оқыңыз, препараттарға
арналған барлық науашаларды бұғаттаңыз және жалғастыру үшін Иә (Yes) батырмасын
басыңыз.
Шартты белгі
1
Зонд түтігін ажыратып-
қосқыш
2
Зонд
Ірі көлемді сұйықтыққа арналған барлық үш робот зондтарын 70% спирт ерітіндісімен сүртіңіз
(зонд көрсетілген)
5. Үлкен контейнерлерден сұйықтықтарды құю үшін барлық үш роботты аппараттың алдыңғы
бөлігіне ауыстырғанда, оны өшіріңіз.
6. Зондты 70% спирт ерітіндісімен жұмсақ матамен немесе спиртті майлықпен абайлап
тазартыңыз.
Зондтардың теңестірілуін бұзып алмаау үшін өте сақ болыңыз.
7. Диалог терезесінде сәтті тазалаған сұйықтықтарды құю үшін роботты(тарды) таңдаңыз, содан
кейін Орындалды (Done) батырмасын басыңыз. Немесе, егер бірде-бір робот тазартылмаған
болса, Ешбірі тазартылмаған (None were cleaned) батырмасын басыңыз.
8. Өңдеу модулін қайта іске қосыңыз. Инициализациялау барысында үлкен контейнерлерден
сұйықтарды құюға арналған роботтар аппараттың артқы бөлігіндегі бастапқы оқиғаға
қайтарылады.
12.12.2
Сұйықтықтарды үлкен контейнерлерден құюға арналған
роботтардың зондтарын ауыстыру
Егер сіз үлкен контейнерлерден сұйықтықтарды құю үшін роботтардың зондтарын ауыстыруды Leica
Biosystems қызмет көрсету инженері орындағанын қаласаңыз, онда қолдау қызметімен
хабарласыңыз. Олай болмаса, төменде сипатталғандай, үлкен контейнерлерден сұйықтықтарды құю
306
12. Тазарту және қызмет көрсету (BOND-III және BOND-MAX)
үшін роботтардың зондтарын өз бетінше ауыстыра аласыз.
1. Өңдеу модулі әрекет етпейтінін және өңдеу циклдары жүктелмегенін, жоспарланбағанын және
орындалып жатпағанына көз жеткізіңіз.
2.
3.Клиникалық клиентте Жүйенің жай-күйі (System status) экранын көрсету үшін өңдеу
модулі қойындысын таңдаңыз.
3. Қызмет көрсету (Maintenance) қойындысын басыңыз, содан кейін сұйықтықтарды үлкен
контейнерлерден құю роботтарының зондтарын Ауыстыру (Replace bulk fluid robot
probes) батырмасын басыңыз.
4. Үлкен контейнерлердің сұйықтықтарын құю роботтарының зондтарын ауыстыру
(Replace bulk fluid robot probes) диалогындағы нұсқауларды мұқият оқыңыз,
препараттарға арналған барлық науашаларды бұғаттаңыз және жалғастыру үшін Иә (Yes)
батырмасын басыңыз.
Сұйықтықтарды құюға арналған үш роботтың барлығы 10 оқиғасына, аппараттың алдыңғы
бөлігіне ауыстырылады.
5. Өңдеу модулін өшіріңіз.
6. Ауыстырылған зондтың түтік ажыратып-қосқышын бұраңыз, зондты жоғары жылжытыңыз
және оны роботтан шығарып алыңыз ( қараңыз).
7. Жаңа зондты орнына салыңыз және зондтың түтік ажыратып-қосқышын саусақпен тығыз етіп
кері бұраңыз.
8. Қажет болған жағдайда басқа зондтар үшін қайталаңыз.
9. Өңдеу модулін қайта іске қосыңыз. Инициализациялау барысында үлкен контейнерлерден
сұйықтарды құюға арналған роботтар аппараттың артқы бөлігіндегі бастапқы оқиғаға
қайтарылады.
10. Инициализация аяқталғаннан кейін диалогтік терезе шығады. Диалог терезесінде сәтті
ауыстырылған сұйықтықтарды құю үшін роботты (тарды) таңдаңыз, содан кейін Орындалды
(Done) батырмасын басыңыз. Немесе, егер бірде-бір робот ауыстырылмаған болса, Ешбірі
ауыстырылмаған (None were replaced) батырмасын басыңыз.
11. Үлкен контейнерлерден сұйықтықтарды құю үшін роботтардың жаңа зондтары дұрыс
орнатылғанына көз жеткізу үшін, бояу тиісті түрде жүргізілетініне көз жеткізу үшін зерттелетін
тіннің үлгілерін немесе гистологиялық бақылау үлгілерін өңдеңіз.
12.13
Шприцтер
BOND сізге шприцті (BOND-MAX) немесе шприцтерді (BOND-III) әр алты ай сайын немесе
7800 препаратты өңдегеннен кейін ауыстыру қажеттілігі туралы хабарлайды, қайсысы ерте
болуына байланысты (5.1.2 - Аппараттық жасақтаманың жай-күйі тармағын қараңыз).
Шприцтерді, әсіресе жоғарғы бөлігінде және поршеньнің астында, бастапқы жұмыс
оқиғасына (инициализация) келтіру барысында немесе ағынды автоматиканы тазарту барысында
аптасына бір рет ағыстардың бар не жоқтығын көзбен шолып тексеріңіз (12.5 - Өңдеу модулін қайта
іске қосу тармағын қараңыз). Сонымен қатар, жалғанған түтіктер мен ажыратып-қосқыштарды
тексеріңіз. Ағыстар болған оқиғада ауыстырыңыз.
Егер шприцті (терді) ауыстыруды Leica Biosystems қызмет көрсету инженері орындағанын қаласаңыз,
онда қолдау қызметімен хабарласыңыз. Олай болмаса, төменде сипатталғандай, шприцті (терді) өз
бетінше ауыстыра аласыз.
BOND 6.0 пайдаланушы нұсқаулығы (АҚШ пен Қытайға арналмаған)
307
12. Тазарту және қызмет көрсету (BOND-III және BOND-MAX)
Әрқашан қорғаныш киім мен қолғап киіңіз.
l
12.13.1 - BOND-III шприцтерін ауыстыру
l
12.13.2 - BOND-MAX ажыратып-қосқышы бар шприцті ауыстыру
12.13.1
BOND-III шприцтерін ауыстыру
Бір ақаулы шприцті ауыстырудан басқа жағдайларда барлық шприцтерді бір мезгілде ауыстырыңыз.
1. Өңдеу модулі әрекетсіз екендігіне көз жеткізіңіз (өңдеу циклдары жүктелмеген және
жоспарланбаған).
2. Клиникалық клиентте Жүйенің жай-күйі (System status) экранын көрсету үшін өңдеу
модулі қойындысын таңдаңыз.
3. Қызмет көрсету (Maintenance) қойындысын басыңыз, одан кейін Шприцті ауыстыру
(Replace syringe) батырмасын басыңыз.
4. Нұсқауларды оқыңыз және Иә (Yes) батырмасын басыңыз.
Өңдеу модулі барлық шприцтерден сұйықтықты шешіп алады және оларды ауыстыру
оқиғасына аударады (бұған 10 минутқа дейін жұмсалуы мүмкін). Өңдеу модулі
ажыратылғанша күтіңіз, содан кейін оны өшіріңіз. Контроллерді (немесе BOND-ADVANCE
терминалын) ажыратпаңыз.
Жалғастыру алдында өңдеу модулінің өшірілгеніне көз жеткізіңіз.
5. Қоса берілетін 3 мм алты қырлы кілтпен шприц модулінің қаптамасы бекітілетін алты қырлы
бастары бар төрт бұранданы бұраңыз. Қаптаманы шешіп алыңыз.
6. Әрбір шприц үшін шприц қысқыш бұрандасын әлсіретіп, қысқышты түсіріңіз.
7. Түбінде поршеньді бекітетін бекіткіш бұранданы алу үшін жиынтықта қоса берілген алты қырлы
2,5 мм кілтті пайдаланыңыз.
Алты қырлы кілтпен поршеньді тежегіш бұранданы бұрау
Кейбір модельдерде алты қырлы бұрандалардың орнына қосқұлақ-бұрандалары бар.
8. Шприц цилиндрін клапаннан бұрап шығарыңыз. Шприц пен қысқышты аппараттан шығарыңыз
9. Қысқышқа жаңа шприцті салыңыз.
10. Шприцті және қысқышты аппаратқа салыңыз. Шприцті клапанға бұрап бекітіңіз.
11. Поршеннің тежегіш бұрандасын салыңыз және оны бекітіңіз.
308
12. Тазарту және қызмет көрсету (BOND-III және BOND-MAX)
12. Шприцтің жоғарғы бөлігіне қысқышты көтеріп, қосқұлақ-бұрандаларды бекітіңіз.
13. Шприц модулінің қаптамасын орнына орнатыңыз және алты қырлы басы бар төрт бұранданы
бұраңыз.
14. Диалог терезесінде сәтті ауыстырылған шприц(тер) таңдаңыз, содан кейін Орындалды
(Done) батырмасын басыңыз. Немесе, егер бірде-бір робот ауыстырылмаған болса, Ешбірі
ауыстырылмаған (None were replaced) батырмасын басыңыз.
15. Өңдеу модулін қайта қосыңыз.
16. Өңдеу модулінің инициализациясы (бастапқы жұмыс оқиғасына келтіру) барысында, әсіресе
шприцтердің жоғарғы бөліктері мен поршеньдердің астында ағатын заттарды тексеріңіз.
Барлық ағулар туралы қолдау қызметіне хабарлаңыз.
17. Жаңа шприцтер дұрыс орнатылғанына көз жеткізу үшін, бояу тиісті түрде жүргізілетініне көз
жеткізу үшін зерттелетін тіннің үлгілерін немесе гистологиялық бақылау үлгілерін өңдеңіз.
12.13.2
BOND-MAX ажыратып-қосқышы бар шприцті ауыстыру
1. Өңдеу модулі әрекетсіз екендігіне көз жеткізіңіз (өңдеу циклдары жүктелмеген және
жоспарланбаған).
2. Клиникалық клиентте Жүйенің жай-күйі (System status) экранын көрсету үшін өңдеу
модулі қойындысын таңдаңыз.
3. Қызмет көрсету (Maintenance) қойындысын басыңыз, одан кейін Шприцті ауыстыру
(Replace syringe) батырмасын басыңыз.
4. Нұсқауларды оқыңыз және Иә (Yes) батырмасын басыңыз.
Өңдеу модулі барлық шприцтерден сұйықтықты шешіп алады және оларды ауыстыру
оқиғасына аударады (бұған 10 минутқа дейін кетуі мүмкін). Өңдеу модулі
ажыратылғанша күтіңіз, содан кейін оны өшіріңіз. Контроллерді (немесе BOND-ADVANCE
терминалын) ажыратпаңыз.
Жалғастыру алдында өңдеу модулінің өшірілгеніне көз жеткізіңіз.
5. Қолмен шприц қысқыш бұрамасын әлсіретіп, қысқышты төмендетіңіз.
6. Алты қырлы кілтті пайдалана отырып, поршеньнің төменгі жағында поршеннің тежегіш
бұрандасын шешіп алыңыз.
Алты қырлы кілтпен поршеньді тежегіш бұранданы бұрау
Кейбір модельдерде алты қырлы бұрандалардың орнына қосқұлақ-бұрандалары бар.
7. Шприц цилиндрін клапаннан бұрап шығарыңыз. Шприц пен қысқышты аппараттан шығарыңыз
8. Қысқышқа жаңа шприцті салыңыз.
BOND 6.0 пайдаланушы нұсқаулығы (АҚШ пен Қытайға арналмаған)
309
12. Тазарту және қызмет көрсету (BOND-III және BOND-MAX)
9. Шприцті және қысқышты аппаратқа салыңыз. Шприцті клапанға бұрап бекітіңіз.
10. Поршеннің тежегіш бұрандасын салыңыз және оны бекітіңіз.
11. Шприцтің жоғарғы бөлігіне қысқышты көтеріп, қосқұлақ-бұрандаларды бекітіңіз.
12. Диалог терезесінде шприцті сәтті ауыстырғанын растау үшін Иә (Yes) батырмасын басыңыз.
13. Өңдеу модулін қайта қосыңыз.
14. Өңдеу модулінің инициализациясы (бастапқы жұмыс оқиғасына келтіру) барысында, әсіресе
шприцтердің жоғарғы бөліктері мен поршеньдердің астында ағатын заттарды тексеріңіз.
Барлық ағулар туралы қолдау қызметіне хабарлаңыз.
15. Жаңа шприцтер дұрыс орнатылғанына көз жеткізу үшін, бояу тиісті түрде жүргізілетініне көз
жеткізу үшін зерттелетін тіннің үлгілерін немесе гистологиялық бақылау үлгілерін өңдеңіз.
310
12. Тазарту және қызмет көрсету (BOND-III және BOND-MAX)
12.14
Электр қорегінің сақтандырғыштары
Барлық BOND-III және BOND-MAX аппараттарында қуаттандырушы желінің екі сақтандырғышы және
қыздырғыштардың Электр қорегінің екі сақтандырғышы бар. Сақтандырғыштардың параметрлері
Электр қорегінің желісіне байланысты ерекшеленеді. Сақтандырғыштар артқы қаптамада орналасқан
(2.2.13 - Артқы қаптамасы тармағын қараңыз).
BOND-III келесі сақтандырғыштар қолданылады:
Сақтандырғыш
Сипаттама
Электр қорегі
100-240 В,
айным. тоқ
F1
Қыздырғыштың
3AG T8A, жоғарғы
қорек көзі
шегі 250 В
F2
Жүйенің қорек көзі
3AG T8A, жоғарғы
шегі 250 В
F3
тоқ желісі
3AG T15A, жоғарғы
(бейтарап)
шегі 250 В
F4
Айнымалы тоқ желісі
3AG T15A, жоғарғы
(белсенді)
шегі 250 В
BOND-MAX өңдеу модульдері екі электр қуатының бірін қолданады. Оларды артқы қаптамадағы
желдеткіштердің саны бойынша анықтауға болады. Жаңа үлгілерде қорек көзі схемасының екі
желдеткіші бар, ал қорек көзі ескі схемасы бар аппараттарда желдеткіш саны біреу. Ауыстыру үшін
сақтандырғыштардың сипаттамалары артқы қаптамасында басылған.
Жаңа қорек схемасы бар (артқы қаптамада екі желдеткіш) BOND-MAX өңдеу модульдері үшін:
Сақтандырғыш
Сипаттама
Электр қорегі
100-240 В,
айным. тоқ
F1
Айнымалы тоқ желісі
3AG T15A, жоғарғы
(бейтарап)
шегі 250 В
F2
Айнымалы тоқ желісі
3AG T15A, жоғарғы
(белсенді)
шегі 250 В
F3
Қыздырғыштың
3AG T8A, жоғарғы
қуаты 24 В
шегі 250 В
F4
24 В тұрақты тоқ.
қорек 3AG T8A,
қорек
жоғарғы шегі 250 В
BOND 6.0 пайдаланушы нұсқаулығы (АҚШ пен Қытайға арналмаған)
311
12. Тазарту және қызмет көрсету (BOND-III және BOND-MAX)
Ескі қорек схемасы бар (артқы қаптамада бір желдеткіш) BOND-MAX өңдеу модульдері үшін:
Сақтандырғыш
Сипаттама
Электр қорегі 100-
Электр қорегі 200-
120 В, айным. тоқ
240 В, айным. тоқ
F1
Айнымалы тоқ желісі
3AG T15A, жоғарғы шегі
3AG T8A, жоғарғы шегі
(бейтарап)
250 В
250 В
F2
Айнымалы тоқ желісі
3AG T15A, жоғарғы шегі
3AG T8A, жоғарғы шегі
(белсенді)
250 В
250 В
F3
Қыздырғыштың
3AG T8A, жоғарғы шегі
3AG T5A, жоғарғы шегі
тұрақты токтағы
250 В
250 В
қуаты 24 В
F4
24 В тұрақты тоқ.
3AG T8A, жоғарғы шегі
3AG T5A, жоғарғы шегі
қорек
250 В
250 В
Сақтандырғыштарды айналып өтпеңіз және қысқартпаңыз.
Сақтандырғыштарды ауыстырар алдында аппаратты өшіріп, электр қорегінің
сымын ажыратыңыз.
Сақтандырғыштарды тек стандартты етіп ауыстырыңыз. Егер
сақтандырғыштар үнемі күйіп кететін болса, қолдау қызметімен
хабарласыңыз.
Сақтандырғыштарды ауыстыру үшін келесілерді құрыңыз:
1. Өңдеу модулін өшіріңіз.
2. Электр қорегін өшіріп, электр қорегі сымын розеткадан ажыратыңыз.
3. Сақтандырғыштың қақпағын бұраңыз.
4. Сақтандырғыштың қақпағын алып, сақтандырғышты ауыстырыңыз. Ауыстыру үшін дұрыс
сипаттамалары бар сақтандырғышты пайдаланғаныңызға көз жеткізіңіз.
5. Сақтандырғыштың қақпағын салыңыз және сақтандырғышты орнында бекіту үшін оны сағат
тілімен бұраңыз. Қақпақты қатты бұрамаңыз.
312
13. Тазарту және қызмет көрсету
(өзгесі)
13.1
Штрих-кодтардың қол сканерлері
13.1.1
Symbol штрих-код сканері
Бұл нұсқаулар Symbol штрих-код сканерінің алдыңғы моделіне ғана қолданылады. Егер сізде
Honeywell штрих-код сканерінің кеш үлгісі болса, 13.1.2 - Honeywell штрих-код сканері тармағын
қараңыз.
Қол сканерін апта сайын тазартыңыз, ол үшін келесі қадамдарды орындаңыз.
l Қайрағыш материалдардың тереземен түйісуіне жол бермеңіз.
l Суды немесе басқа да тазалағыш сұйықтықтарды тікелей терезеге шашыратпаңыз.
l Сканердің алдыңғы резеңке бөлігін шешіп алмаңыз.
Сканерді келесі тәсілмен тазартыңыз:
1. Ең алдымен, сканерді контроллерден немесе терминалдан ажыратыңыз.
2. Ластану іздерін дымқыл, түктер қалдырмайтын матамен тазартыңыз.
3. Терезені 70% спирт ерітіндісіне батырылған түктер қалдырмайтын шүберекпен сүртіңіз.
Лазерлік сәулелену қаупі.
Штрих-кодтардың қол сканері көздің ауыр зақымдануын тудыруы мүмкін
лазерлік құрылғыдан тұрады.
Сканер қосулы тұрғанда оның терезесіне қарамаңыз.
BOND 6.0 пайдаланушы нұсқаулығы (АҚШ пен Қытайға арналмаған)
313
13. Тазарту және қызмет көрсету (өзгесі)
13.1.1.1
Symbol штрих-кодтар сканерінің конфигурациясы
Symbol (USB) штрих-кодтарының сканерін қайта инициализациялау (бастапқы жұмыс күйіне келтіру)
үшін осы беттің көшірмесін жақсы сапада басып шығарыңыз және келесі штрих- кодтардың
әрқайсысын реті бойынша сканерлеңіз.
1-Сканерлеу: барлық әдепкі мәндерді орнату
2-сканерлеу: 128code іске қосу
3-сканерлеу: сканерлеу параметрлері
4-сканерлеу: <DATA><SUFFIX>
5-сканерлеу: енгізу
Сурет 13-1: Symbol сканерінің конфигурациясы үшін штрих-кодтарды сканерлеу реті
314
13. Тазарту және қызмет көрсету (өзгесі)
13.1.1.2
Дыбыстық сигналының деңгейін орнату
Symbol штрих-код сканерінің дыбыс сигналының дыбыс деңгейін орнату үшін осы беттің көшірмесін
жақсы сапалы түрде басып шығарып, қажетті дыбыс деңгейіне сәйкес келетін штрих-кодты
сканерлеңіз.
Жай
Орташа
Қатты
Сурет 13-2: Symbol сканерінің дыбыс сигналының қаттылығын орнатудың штрих-кодтары
BOND 6.0 пайдаланушы нұсқаулығы (АҚШ пен Қытайға арналмаған)
315
13. Тазарту және қызмет көрсету (өзгесі)
13.1.2
Honeywell штрих-код сканері
Бұл нұсқаулар Honeywell штрих-код сканерінің соңғы моделіне ғана қолданылады. Егер сізде Symbol
штрих-код сканерінің алдыңғы үлгісі болса - 13.1.1 - Symbol штрих-код сканері тармағын қараңыз.
Қол сканерін апта сайын тазартыңыз, ол үшін келесі қадамдарды орындаңыз.
l Қайрағыш материалдардың тереземен түйісуіне жол бермеңіз.
l Суды немесе басқа да тазалағыш сұйықтықтарды тікелей терезеге шашыратпаңыз.
Сканерді келесі тәсілмен тазартыңыз:
l Ең алдымен, сканерді контроллерден немесе терминалдан ажыратыңыз.
l Ластану іздерін дымқыл, түктер қалдырмайтын матамен тазартыңыз.
l Терезені 70% спирт ерітіндісіне батырылған түктер қалдырмайтын шүберекпен сүртіңіз.
Егер штрих-кодтардың қол сканері дұрыс жұмыс істемесе, қызмет көрсетуші ұйым сізді бастапқы
жұмыс оқиғасына қайта келтіруді сұрауы мүмкін. Сондай-ақ, сканердің дыбыс сигналының дыбыс
деңгейін реттеуге болады.
316
13. Тазарту және қызмет көрсету (өзгесі)
13.1.2.1
Honeywell штрих-кодтары сканерінің конфигурациясы
Honeywell (USB) штрих-кодтарын қайта инициализациялау (бастапқы жұмыс күйіне келтіру) үшін, осы
беттің көшірмесін жақсы сапалы түрде басып шығарыңыз және келесі штрих-кодтардың әрқайсысын
көрсетілген тәртіппен сканерлеңіз.
1-сканерлеу: барлық пайдаланушының әдепкі параметрлерін жойыңыз
2-сканерлеу: әдепкі параметрлерді қосыңыз
3-сканерлеу: Honeywell сканерінің конфигурациясы
Сурет 13-3: Сканер конфигурациясына арналған штрих-кодтар
BOND 6.0 пайдаланушы нұсқаулығы (АҚШ пен Қытайға арналмаған)
317
13. Тазарту және қызмет көрсету (өзгесі)
13.1.2.2
Дыбыстық сигналының деңгейін орнату
Honeywell штрих-кодтарының сканерінің дыбыс қаттылығын орнату үшін, осы беттің көшірмесін
жақсы сапалы түрде басып шығарып, қажетті дыбыс деңгейіне сәйкес келетін штрих-кодты
сканерлеңіз.
Жай
Орташа
Қатты
Дыбыстық сигнал өшірулі
Сурет 13-4: Honeywell сканерінің дыбыс сигналының дыбыс қаттылығын орнату штрих-коды
318
13. Тазарту және қызмет көрсету (өзгесі)
13.1.2.3
hands-free режимін баптау
Егер сканер өз тірегінде орнатылған болса, ол әдетте hands-free режимінде және штрих-кодты
есептеу үшін батырманы басудың қажеті жоқ.
Honeywell штрих-код сканерінің hands-free режимін қосу немесе өшіру үшін осы беттің көшірмесін
жақсы сапалы түрде басып шығарып, қажетті функцияға сәйкес келетін штрих-кодты сканерлеңіз.
hands-free режимін қосу
hands-free режимін өшіру
Сурет 13-5: Honeywell сканері үшін hands-free режимінің штрих-кодтары
BOND 6.0 пайдаланушы нұсқаулығы (АҚШ пен Қытайға арналмаған)
319
13. Тазарту және қызмет көрсету (өзгесі)
13.1.3
Zebra DS2208 штрихкод сканері
Бұл нұсқаулар Zebra штрихкод сканерінің соңғы моделіне ғана қолданылады. Егер сізде Symbol
штрихкод сканерінің алдыңғы үлгісі болса, 13.1.1 - Symbol штрих-код сканері тармағын қараңыз. Егер
сізде Honeywell штрихкод сканері болса, 13.1.2 - Honeywell штрих-код сканері тармағын қараңыз.
Қол сканерін апта сайын тазартыңыз, ол үшін келесі қадамдарды орындаңыз.
l Қайрағыш материалдардың тереземен түйісуіне жол бермеңіз.
l Суды немесе басқа да тазалағыш сұйықтықтарды тікелей терезеге шашыратпаңыз.
Сканерді келесі тәсілмен тазартыңыз:
l Ең алдымен, сканерді контроллерден немесе терминалдан ажыратыңыз.
l Ластану іздерін дымқыл, түктер қалдырмайтын шүберекпен тазартыңыз.
l Терезені 70% спирт ерітіндісіне батырылған түктер қалдырмайтын шүберекпен сүртіңіз.
Егер қолмен ұстауға арналған штрихкод сканері дұрыс жұмыс істемесе, қызмет көрсетуші ұйым сізді
бастапқы жұмыс оқиғасына қайта келтіруді сұрауы мүмкін. Сондай-ақ сканердің дыбыс сигналының
дыбыс деңгейін реттеуге болады.
320
13. Тазарту және қызмет көрсету (өзгесі)
13.1.3.1
Zebra штрихкод сканерін конфигурациялау
Zebra штрихкод сканерін (USB) қайта инициализациялау (бастапқы жұмыс күйіне келтіру) үшін осы
беттің көшірмесін жақсы сапада басып шығарыңыз және келесі штрихкодтардың әрқайсысын реті
бойынша сканерлеңіз.
Сурет 13-6: Zebra сканерінің конфигурациясы үшін штрихкодтарды сканерлеу реті
1-сканерлеу: барлық әдепкі мәндерді орнату
2-сканерлеу: 128 кодын іске қосу
3-сканерлеу: сканерлеу опциялары
4-сканерлеу: <DATA><SUFFIX>
5-сканерлеу: енгізу
6-сканерлеу: 128 кодын конфигурациялау
BOND 6.0 пайдаланушы нұсқаулығы (АҚШ пен Қытайға арналмаған)
321
13. Тазарту және қызмет көрсету (өзгесі)
13.1.3.2
Дыбыстық сигналының деңгейін орнату
Zebra штрихкод сканерінің дыбыстық сигналының деңгейін орнату үшін, осы беттің көшірмесін жақсы
сапалы түрде басып шығарып, қажетті дыбыс деңгейіне сәйкес келетін штрихкодты сканерлеңіз.
Сурет 13-7: Zebra сканерінің дыбыстық сигналының деңгейінің штрихкодтары
Төмен дыбыс деңгейі
Орташа дыбыс деңгейі
Жоғары дыбыс деңгейі
322
13. Тазарту және қызмет көрсету (өзгесі)
13.1.3.3
Хэндсфри режимін конфигурациялау
Егер сканер өз тірегінде орнатылған болса, ол әдетте хэндсфри режимінде және штрихкодты есептеу
үшін триггерді басудың қажеті жоқ.
Zebra штрихкод сканерінің хэндсфри режимін «ҚОСУЛЫ» немесе «ӨШІРУЛІ» күйіне орнату үшін осы
беттің көшірмесін жақсы сапалы түрде басып шығарып, қажетті функцияға сәйкес келетін
штрихкодты сканерлеңіз.
Сурет 13-8: Zebra сканері үшін hands-free режимін пайдалану штрихкодтары
Хэндсфри режимін пайдалану ҚОСУЛЫ
Хэндсфри режимін пайдалану ӨШІРУЛІ
13.2
Препараттар заттаңбаларының принтері
Препараттар заттаңбаларының принтеріне нұсқаулық қоса беріледі. Заттаңбалар мен баспа лентасын
тазарту, жүктеу үшін осы нұсқауларды орындаңыз. Ай сайын тазартыңыз.
BOND 6.0 пайдаланушы нұсқаулығы (АҚШ пен Қытайға арналмаған)
323
13. Тазарту және қызмет көрсету (өзгесі)
Бұл бет әдейі бос қалдырылды.
324
14. BOND реагенттерін пайдалану
Бұл тарауда BOND жүйесінде тіндерді бояудың ғылыми және клиникалық аспектілерін жалпы
талқылау келтірілген.
l
14.1 - Процедура қағидаты
l
14.2 - Сынаманы дайындау
l
14.3 - Сапаны бақылау
l
14.4 - Бояуды талдау
l
14.5 - Жалпы шектеулер
l
14.6 - Әдебиеттер тізімі
14.1
Процедура қағидаты
Бұл бөлімде ИГХ және ISH туралы жалпы түсінік берілген. Сондай-ақ, BOND анықтау және
тераностика жүйелері сипатталған.
l
14.1.1 - BOND анықтау жүйелері
l
14.1.2 - Тераностика жүйелері
Иммуногистохимия (ИГХ)
Иммуногистохимиялық әдістер кемінде 50 жыл жасушалар мен тіндерде белгілі бір антигендерді
анықтау үшін пайдаланылады. 19411 жылы жарияланған бірінші әдісте флуоресценттік1 белгілер
қолданылды. Кейіннен пероксидаза2 сияқты ферменттер қолданыла бастады. Қазіргі уақытта
иммуногистохимия қалыпты және патологиялық жасушаларды ажыратуға көмектеседі ГЭ парафин
кесінділерін дәстүрлі бояудан басқа жасушаларды тануды жеңілдету үшін пайдаланылады.
Иммуногистохимиялық әдістер хирургиялық патологияда «емдеу стандартына» айналды, онда тек
классикалық әдістерді қолдану дәл диагнозды белгілей алмайды3,4. Дегенмен, жалпы мойындауға
қарамастан, ұдайы өндірулікке қатысты кейбір шектеулер болды5.
BOND автоматтандырылған жүйесіндегі реагенттер тіндердің кесінділерінде антигендерді
иммуногистохимиялық әдістермен анықтайды. Жалпы, арнайы антиденелер қимамен байланысады,
содан кейін BOND анықтау жүйесінің реагенттері кешенді көрінеді.
Диагностикалық «маркер» - бұл белгілі бір антиген немесе ДНҚ/РНҚ байланыстыру учаскесін тіннің
үлгісінде анықтау үшін қолданылатын реагент. Бастапқы антиденелер деп аталады ИГХ немесе ISH
зонды (төменде қараңыз).
BOND 6.0 пайдаланушы нұсқаулығы (АҚШ пен Қытайға арналмаған)
325
14. BOND реагенттерін пайдалану
in situ (ISH) гибридтеу
Молекулалық биология әдістері аурулар туралы түсінніті алға жылжытты. In situ гибридтеуі
молекулалық биологияны және гистологияны біріктіреді, ДНҚ мен РНҚ олардың жасушалық
ортасында көруге мүмкіндік береді. 19696 жылы нуклеин қышқылдарының детекциясының әдісін
бірінші ұсыну сәтінен бері, in situ гибридизациясының протоколдарында жетілдіру оны клиникалық
патология мен зерттеулер үшін аса құнды құрал ретінде жасады.
In situ гибридтеуі ДНҚ немесе РНҚ нуклеотидтердің негіздерінің комплементарлық байланыстыруын
пайдаланады. Қылқан нуклеин қышқылы-зонд тіннің немесе жасушалардың бекітілген үлгісінде оның
комплементарлық тізбектігімен ерекше байланысады. Зонд белгіге антиденелерді жағу арқылы
көрінетін, одан кейін BOND детекциясына арналған полимерлік реагенттер жасалады.
Автоматтандырылған жүйе және BOND реагенттері еңбекті көп қажет ететін қол әдісіне сенімді және
тиімді балама болып табылады.
14.1.1
BOND анықтау жүйелері
Leica Biosystems BOND үшін арнайы әзірленген бірқатар анықтау жүйелерін жеткізеді. Олардың
негізгісі стептавидин мен биотинді пайдаланбай, айқын анықтаумен үйлесімде жоғары қарқынды
бояуды қамтамасыз ететін BOND Polymer Refine Detection ™ жүйесі болып табылады.
Төмендегі бөлімдерде келтірілген қол жетімді BOND анықтау жүйелері.
l
14.1.1.1 - BOND Polymer Refine Detection
l
14.1.1.2 - BOND Polymer Refine Red Detection
l
14.1.1.3 - BOND детекциясының стрептавидин-биотинді тәсілі (ДАБ)
14.1.1.1
BOND Polymer Refine Detection
DAB, BOND Polymer Refine Detection негізіндегі BOND полимерлік жүйесі антигенмен немесе зондтың
нуклеин қышқылымен байланыстыруын айқын анықтаумен қатар жоғары қарқынды бояуды
қамтамасыз етеді. Жүйеде стрептавидин мен биотин қолданылмайды, сондықтан эндогенді биотиннің
салдарынан ерекше емес бояу болмайды. Эндогенді биотин асқазан-ішек жолағы, бүйрек, бауыр
және сүт безінің карциномасы сияқты кейбір тіндерде бар. BOND детекциясының полимерлік
жүйелері таңбаланған стрептавидин-биотині бар жүйелерге қарағанда жоғары сезімталдыққа ие, бұл
антиденелердің аз концентрациясын пайдалануға және зерттеудің жалпы уақытын қысқартуға
мүмкіндік береді.
Бұл анықтау жүйелерінде келесі кезеңдер қолданылады.
1. Сутегі тотығымен инкубациялау.
2. Ерекше бастапқы антиденелерді (ИГХ барысында) немесе зондты және бастапқы
антиденелерді (ISH) жағу.
3. Байланыстырушы екінші антиденемен инкубациялау (бастапқы антиденеден кейін).
4. Құрамында хрен пероксидазасының полимерлі конъюгаттары (HRP) және үшінші антиденелер
бар полимерлі реагентпен инкубациялау.
5. ДАБ көмегімен кешенді визуализациялау.
6. Гематоксилинмен контр-бояу жасушалар ядросын анықтауға мүмкіндік береді.
Инкубация, шаю және нәтижелерді интерпретациялау BOND Labeled Streptavidin-Biotin Detection
Systems жүйелері үшін сипатталғандай орындалады.
326
14. BOND реагенттерін пайдалану
Үлкен қарқындылық қажет болған жағдайда, BOND детекциясының барлық полимерлік жүйелері үшін
келесі мүмкіндіктер бар.
i. Бастапқы антиденелер немесе зонд және (немесе) анықтау жүйесінің компоненттері үшін
инкубация уақытын ұлғайтыңыз.
ii. BOND DAB Enhancer кезеңін пайдаланыңыз. Жеке пайдаланылатын күшейткіш Intense R
анықтау жүйесімен бірдей дәрежеде бояу қарқындылығын ұлғайтпайтынын ескеріңіз.
iii. Тек ИГХ-ға қатысты бастапқы антидененің концентрациясын ұлғайтыңыз.
14.1.1.2
BOND Polymer Refine Red Detection
Қызыл хромогенді бір детекциялау жүйесі қол жетімді: BOND Polymer Refine Red Detection™. Ол
жоғарыда сипатталған ДАБ негізіндегі полимерлік анықтау жүйелері сияқты артықшылықтары бар,
бірақ ДАБ орнына «жылдам қызыл» (Fast Red) хромогені визуализация үшін пайдаланылады. Жүйе
тін пигменттері ДАБ-мен шатасуы мүмкін тері сияқты тіндермен қолдануға жарамды.
BOND Polymer Refine Red Detection жүйесі жоғары дәрежелі сезімтал Compact Polymer ™ жүйесі болып
табылады, ол фуксияның түсті ашық қызыл иммундық бояуға, сондай-ақ, гематоксилинмен контр-
бояуға мүмкіндік беретін (көкшілдендіруді қоса алғанда) сілтілі фосфатазамен конъюгирленген жүйе
болып табылады.
«Жылдам қызыл» (Fast Red) хромогені қалыпты зертханалық оқиғаларда химиялық тұрғыдан
тұрақсыз. Хромоген тиімділігін сақтау үшін BOND Polymer Refine Red Detection нұсқауларын қатаң
орындаңыз. Әрқашан гистологиялық бақылау тінін пациенттің тіні сияқты төсеніш шынысына
салыңыз, бұл жүйе сапасының нашарлауын тез анықтауға мүмкіндік береді.
Leica CV Ultra Mounting Media, BOND Polymer Refine Red Detection жүйесімен пайдалану үшін
ұсынылады. Басқа орталар бастапқы алынған бояу қарқындылығын сақтамауы мүмкін.
BOND Polymer Red Detection жүйесінде келесі кезеңдер қарастырылған.
1. Ерекше бастапқы антиденелерді жағу.
2. Бастапқы реагенттен кейін байланыстырушы реагентпен инкубациялау.
3. Сілтілі фосфатазаның (СФ) және үшінші антиденелердің полимерлі конъюгаттары бар
полимерлі реагентпен инкубацилау.
4. Қызыл тұнба түріндегі «жылдам қызыл» (Fast Red) субстратты хромогенмен кешенді
визуализациялау.
5. Гематоксилинмен контр-бояу жасушалар ядросын анықтауға мүмкіндік береді.
Инкубация, шаю және нәтижелерді интерпретациялау BOND Labeled Streptavidin- Biotin System жүйесі
үшін сипатталғандай орындалады.
BOND 6.0 пайдаланушы нұсқаулығы (АҚШ пен Қытайға арналмаған)
327
14. BOND реагенттерін пайдалану
14.1.1.3
BOND детекциясының стрептавидин-биотинді тәсілі (ДАБ)
Бұл санатта бір анықтау жүйесі бар: BOND Intense R Detection.
DAB негізіндегі бұл жүйе келесідей әрекет етеді.
1. Эндогенді пероксидаза белсенділігін басу үшін сутегі асқынтотығымен инкубациялау.
2. Ерекше бастапқы антиденелерді жағу.
3. Антидене, пайдаланушымен жеткізілетін биотинмен конъюгирленген, бастапқы антиденені
танитын екінші антиденеменанықталады.
4. Екінші антиденедегі биотинмен байланысатын стрептавидин конъюгатын және ферментті қосу.
5. Ферментті өнімі қоңыр тұнба болып табылатын субстратты хромоген (3,3"- диаминобензидин
немесе ДАБ) кешенін визуализациялау.
6. Гематоксилинмен контр-бояу жасушалар ядросын анықтауға мүмкіндік береді.
Әрбір кезеңде BOND жүйесі белгілі бір уақыт кесінділерін инкубациялайды, содан кейін байланысты
емес материалды жою үшін қималарды жуады. Нәтижелер жарық микроскоп оптикасын пайдалана
отырып, интерпретацияланады және нақты антигенмен байланысты немесе байланысты емес
патологиялық процестердің дифференциалды диагностикасына көмектеседі.
14.1.2
Тераностика жүйелері
Қатерлі ісіктердің және геномның тұрақсыздығының ісік жасушаларына тән бір текті емес сипатының
себебі бойынша, кең спектрлі ісікке қарсы құралдарды қолдануға пациенттердің жауабы жиі оңтайлы
болып табылмайды. Бұл дәрілердің жиі пациенттің өмір сүру сапасын төмендететін елеулі жанама
әсерлері бар, сондай-ақ, пациент елеулі жағымсыз дәрілік реакциялар (ЖДР) тәуекеліне ұшырауы
мүмкін. Керісінше, ісіктерді емдеудің көптеген жаңа құралдары белгілі бір биомаркерлерге
бағытталған. Осындай бағытталған емнің басы патологияларды диагностикалық зерттеуге елеулі
әсер етті. Диагностикалық зерттеулердің бұл ерекше класы тераностика деп аталады, онда талдаулар
емдеудің белгілі бір түрі көмектесетін пациенттерді анықтауға көмектеседі.
Тераностика = терапия + диагностика
Әрбір құрылғы мақсатты ақуыз немесе геннің болуын және тиісінше бағытталған терапияның
қолданылуын анықтау үшін толық жүйе болып табылады. Leica тераностикалық аналитикалық
кешендері пайдалануға дайын антиденелер немесе зондтар, детекцияға, бақылауға арналған
реагенттер және кейбір оқиғаларда диагностикалық нәтиже сапасын толық бақылауды қамтамасыз
ету үшін бақылау препараттары бар толыққанды оңтайландырылған жүйелер түрінде жеткізіледі.
Құрылғылар ИГХ немесе ISH әдістеріне негізделген және емдеу жүргізілуі мүмкін пациенттерді
іріктеуде қолдану үшін тиісті аймақтық реттеуші органдармен мақұлданған.
Пайдалану жөніндегі егжей-тегжейлі нұсқаулықтар тераностиканың әрбір жүйесіне қоса беріледі.
Осы нұсқауларды тераностикалық өңдеу циклдарын баптау үшін пайдаланыңыз. Тераностикалық
талдаудың мәніне байланысты, осы нұсқауларды мұқият сақтау талдауды жарамсыз етпеу үшін өте
маңызды.
328
14. BOND реагенттерін пайдалану
14.2
Сынаманы дайындау
Бұл бөлімде тінді бояуға дайындау сипатталған.
l
14.2.1 - Қажетті материалдар
l
14.2.2 - Тіндерді әзірлеу
l
14.2.3 - Парафинсіздеу және қыздыру
l
14.2.4 - Антигенді анықтау
14.2.1
Қажетті материалдар
Иммуногистохимиялық бояу және BOND жүйесін пайдалана отырып, in situ гибридидтеуі үшін келесі
материалдар қажет.
14.2.1.1
Жалпы материалдар
l Бекіткіш - 10% буферленген бейтарап формалин ұсынылады
l Парафин
l Тіндерді өңдеу және құю орталығы
l Оң және теріс гистологиялық бақылау тіндері (14.3 - Сапаны бақылау тармағын қараңыз)
l Микротом
l Зарядталған Төсеніш шынылар (мысалы, Leica BOND Plus)
l Кептіргіш шкаф
l Спирт (химиялық таза*)
l Парафинсіздеуге арналған BOND Dewax Solutionерітіндісі
l Деионсыздандыры лған су
l BOND ферментімен алдын ала өңдеуге арналған жиынтық
l BOND Slide Labels and Printer Ribbon (Заттаңбаны басып шығаруға арналған жиынтық)
l BOND Universal Covertiles (Әмбебап қақпақшалар)
l Шаюға арналған ерітінді (BOND Wash Solution 10X Concentrate дайындалады)
l BOND реагенттерінің тиісті жүйесі
l Шайыр немесе су негізіндегі Препаратты құруға арналған орта
l Жабынды шынылар
* Химиялық таза спирт этанолдан (көлемі бойынша кемінде 90%), изопропанолдан (көлемі бойынша
кемінде 5%) және метанолдан (көлемі бойынша кемінде 5%) тұрады.
14.2.1.2
ИГХ арналған материалдар
ИГХ Жоғарыда көрсетілген материалдардан басқа ИГХ талдау үшін келесі препараттар қажет:
l Бастапқы антиденелерге тән теріс бақылау реагенттері (14.3 - Сапаны бақылау тармағын
қараңыз)
l Антигенді анықтауға арналған BOND Epitope Retrieval Solution 1 ерітіндісі
l Антигенді анықтауға арналған BOND Epitope Retrieval Solution 2 ерітіндісі
l BOND бастапқы антиденелер немесе BOND Primary Antibody Diluent сұйылтқышында алынған 7
мл немесе 30 мл BOND ашық контейнерлерінде пайдалануға дайын бастапқы антиденелер
l Шайыр немесе су негізіндегі Препаратты құруға арналған орта
l Титрлеуге арналған жиынтық, қосымша (14.2.1.4 - Титрлеуге арналған жиынтық қараңыз)
BOND 6.0 пайдаланушы нұсқаулығы (АҚШ пен Қытайға арналмаған)
329
14. BOND реагенттерін пайдалану
14.2.1.3
ISH арналған материалдар
ISH Жоғарыда көрсетілген материалдардан басқа ISH талдау үшін келесі препараттар қажет:
l ISH зондтар
l Антифлуоресцеинді антиденелер
l ISH арналған оң және теріс бақылаудың ерекше зондтары (14.3 - Сапаны бақылау тармағын
қараңыз)
14.2.1.4
Титрлеуге арналған жиынтық
ИГХ BOND Titration Kit жиынтығы 10 бос контейнерлерден және 50 салғыдан (6 мл) тұрады және ол
BOND жүйесінде бастапқы антиденелердің концентрациясын таңдауда қолданылады. Бастапқы
антиденелердің әрбір концентрациясының шағын көлемі дайындалуы және салғыларға
орналастырылуы мүмкін. Әрбір контейнер 40 мл реагенттің жалпы саны үшін пайдаланылуы мүмкін.
Қойылтылған антиденелерді титрлеу дәйекті екі мәрте барлау жолағымен орындалуы мүмкін. Келесі
әдіс 150 мкл бір реттік үлестіру үшін тізбекті барлауды қалай дайындау керектігін сипаттайды.
Титрлеу үшін контейнердің әрбір салғысында алынған антиденелердің кейбір көлемі қалуы мүмкін.
BOND жүйесі бұл көлемді өлшейді, ол қажет болған жағдайда одан әрі оңтайландыру протоколдары
үшін пайдаланылуы мүмкін.
1. Әрбір антидене үшін сәйкесінше сұйылтулары бар үш салғыны белгілеңіз.
2. Бірінші салғыда 1 мл көлемімен алғашқы сұйылтуды орындаңыз.
3.
2 және 3 салғыларға 500 мкл BOND Primary Antibody Diluent сұйылтқышын салыңыз.
4. Бастапқы сұйылтудан 500 мкл 2-салғыға салыңыз және абайлап араластырыңыз.
5.
2-кірістірілген 500 мкл 3 кірістірілген жерге апарып, абайлап араластырыңыз.
14.2.2
Тіндерді әзірлеу
Біз BOND жүйесін пайдалана отырып, иммуногистохимиялық бояу және in situ гибридизациясы үшін
тіндерді бекіткенде, тіндердің көлемінен 15-20 есе асатын көлемде 10% буферленген бейтарап
формалинді қолдануға кеңес береміз. Бекіту бөлме температурасында (15-25 °C) жүргізілуі мүмкін.
HER2 зерттеу үшін американдық клиникалық онкология қоғамының/американдық патологтар
алқасының тіндерін дайындау жөніндегі ұсынымдарын немесе жергілікті ұсынымдарды10 және
ережелерді қараңыз.
Тіндерді микротомдауды жеңілдету және микротом жүзінің зақымдануын болдырмау үшін, оларды
өңдеу алдында сүйек тіндерінен кальцийді шешіп алыңыз11,12.
АҚШ 1988 жылғы клиникалық зертханаларда (US Clinical Laboratory Improvement Act (CLIA))
талдаулардың сапасын арттыруға бағытталған заңы талабына сәйкес, 42 CFR 493.1259(b) бөлімі:
«Зертхана боялған препараттарды тексеру күнінен бастап кемінде он жыл бойы, ал үлгілер блоктары
тексеру күнінен бастап кемінде екі жыл бойы сақталуы тиіс».13 Сіздің мекемеңізге қойылатын
талаптар бөлігінде жергілікті нормативтік актілермен танысыңыз.
Қалыңдығы 3-5 мкм қималар құрыңыз және оларды зарядталған Төсеніш шыныға орналастырыңыз
(тіндержің кейбір ерекше түрлері қималардың басқа қалыңдығын талап етуі мүмкін). Тінді кептіру
үшін, жақсылап кептірілген препараттарды 60 °C (±5 °C) температурасында 10-30 минутқа немесе 37
°C температурасында түні бойы шкафқа салыңыз. Препараттар BOND-III және BOND-MAX
жүйелерінде де қыздырылуы мүмкін. Препараттар қыздыру алдында ауада жақсы кептірілуі тиіс.
Препаратты дайындау туралы толық ақпаратты 13, 14 және 15 көздерінен қараңыз.
330
14. BOND реагенттерін пайдалану
Препараттардың заттаңбаларын үлгілерге және бақылау препараттарына 4 - Жүйені іске қосу
жөніндегі қысқаша нұсқаулық тармағында сипатталған етіп бекітіңіз. BOND жүйесінде антигеннің
Парафинсіздеу, регидратациясы және демаскирленуі толығымен автоматтандырылған.
14.2.3
Парафинсіздеу және қыздыру
Иммуногистохимияға арналған парафинге құйылған тіндердің кесінділері алдымен
депарафинизацияланып, содан кейін регидратациялануы тиіс. Парафин BOND Dewax Solution
ерітіндісімен жойылады, содан кейін кесінділер регидратацияланады. BOND жүйесі осы процесті
автоматтандыратын парафинсіздеу протоколдарын қамтиды.
Депарафинизацияның алдында BOND, сондай-ақ, төсеніш шынысымен оның адгезиясын жақсарту
үшін тін үлгісін қыздыруы мүмкін. BOND қыздыру және парафинсіздеу протоколдары осы екі процесті
де автоматтандырады.
Назар аударыңыз, тін үлгісінен оны қыздыру және депарафинизациялау үшін BOND-III немесе
BOND-MAX өңдеу модуліне орналастырғанға дейін бүкіл ылғалды шешіп алу үшін ауада кептірілуі тиіс.
14.2.4
Антигенді анықтау
Тінді формалинмен бекіту альдегид пен аминотоптардың арасындағы көлденең байланыстардың
пайда болуына әкеп соғуы мүмкін, бұл бүркемелеу әсерінен антигендіктің кейбір жоғалуына әкеп
соғуы мүмкін. Формалин антигеннің жалпы үш өлшемді құрылымын өзгерте алатын метилен
көпірлерін құрады. Кейбір антигендер формалинге сезімтал және олардың иммунореактивтілігі
формалинмен бекітілгеннен кейін азаяды, ал басқалары формалинге төзімді.
Нуклеин қышқылдары ақуыздармен қоршалған, сондықтан зонд үшін мақсатты бірізділікті
қамтамасыз ету үшін тіндердің өткізгіштігін қамтамасыз ету қажет.
Антигендердің эпитоптарын анықтау7,8 жылумен бүркемелеу (АЖА), ферментпен алдын ала өңдеу
немесе оларды біріктіріп өңдеу жолағымен жүргізілуі мүмкін. АЖА ИГХ барысында антигендерді
анықтау ең кең қолданылатын әдісі болып табылады. АЖА механизмі онша түсінікті емес.
Антигенді анықтауға арналған ерітіндіде қима жоғары температуралы қыздыру барысында
формалинмен бекіту барысында пайда болатын көлденең байланыстардың гидролизі болады деп
болжанады. Бұл антигеннің кері өзгеруіне әкеп соғуы мүмкін, содан кейін иммуногистохимиялық
бояуға ұшырауы мүмкін. АЖА кезіндегі маңызды факторлар температура, уақыт және PH анықтау
ерітіндісі болып табылады. BOND жүйесінде антигенді анықтауға арналған екі түрлі ерітінді
қолданылуы мүмкін: цитрат негізіндегі буфер және ЭДТА негізіндегі буфер.
Ферментті өңдеу барысында антиген эпитопын жалаңаштандыру немесе нуклеин қышқылдарының
мақсатты реттілігі үшін ақуыз байланысын бұзатын протеолитикалық ферменттер пайдаланылады.
Ферменттің концентрациясы және инкубация уақыты сынаманы тіркеу уақытына пропорционалды
және тиісінше оңтайландырылуы тиіс. Алдын ала ферментті өңдеу тек кейбір антиген эпитоптары
үшін жарамды, бірақ ISH протоколдарында жиі қолданылады.
BOND 6.0 пайдаланушы нұсқаулығы (АҚШ пен Қытайға арналмаған)
331
14. BOND реагенттерін пайдалану
14.3
Сапаны бақылау
Тіндерді өңдеудегі және пайдаланушының техникалық рәсімдеріндегі айырмашылықтар
нәтижелердің айтарлықтай өзгергіштігіне әкеп соқтыруы мүмкін, бұл төмендегі рәсімдерге қосымша
жеке бақылауды тұрақты жүргізуді талап етеді. Жергілікті ұсыныстар мен ережелермен танысыңыз,
сондай-ақ, сізге CLIA Compliance Handbook: The Essential Guide for the Clinical Laboratory Second
Edition22 анықтамасы және ИГХ бойынша NCLS нұсқаулары14 пайдалы болуы мүмкін.
Бақылау ретінде аутопсия, биопсия барысында немесе хирургиялық операция барысында алынған,
мүмкіндігінше тез тіркелген, өңделген және блоктарға құйылған, пациенттердің үлгілеріне ұқсас жаңа
үлгілер қолданылуы тиіс. Мұндай бақылау үлгілері Тіндерді әзірлеудан бояуға дейінгі талдаудың
барлық кезеңдерін қадағалайды.
Біз пациенттің тіні сияқты төсеніш шынысына тиісті гистологиялық бақылау тінін орналастыруға кеңес
береміз. Келесі ақпаратты 6.2 - Бақылаулармен жұмыс тармағынан қараңыз.
Қараңыз:
l
14.3.1 - Талдауды тексеру
l
14.3.2 - Бақылау тіндері
l
14.3.3 - ИГХ арналған теріс бақылау реагенті
l
14.3.4 - ISH арналған бақылау реагенттері
l
14.3.5 - Сапаны бақылаудың артықшылықтары
332
14. BOND реагенттерін пайдалану
14.3.1
Талдауды тексеру
Диагностикалық процедурада антиденені, зондты немесе бояу жүйесін пайдаланар алдында оң және
теріс үлгілер үшін қабылданған белгілі экспрессиясы бар зертхананың жеке коллекциясынан тіндер
сериясына тексеру арқылы антидененің немесе зондтың ерекшелігін растаңыз. Жоғарыда
сипатталған процедураларды, сондай-ақ, иммуногистохимияға арналған 14 АКП сертификаттау
бағдарламасының сапасын бақылау жөніндегі нұсқауларды және (немесе) ИГХ бойынша NCLS14
немесе жергілікті нормативтік құжаттар мен ұсынымдарды орындаңыз. Антиденелердің әрбір жаңа
сериясы үшін, сондай-ақ, талдау параметрлерін өзгерту барысында сапаны бақылау
процедураларының деректерін қайталаңыз. Сапаны бақылау тек жекелеген реагенттерді
пайдаланған кезде маңызды нәтижелер бере алмайды, өйткені тиісті реагенттер мен таңдалған
талдау протоколы анықтау жүйесін диагностикалық мақсаттарда қолданғанға дейін бірлесіп
тексерілуі тиіс. Талдауды растау үшін қолайлы тіндерді таңдау үшін әрбір бастапқы антиденеге
нұсқауларды орындаңыз.
Жоғарыда аталған талдауларды тексеру рәсімдеріне қосымша, біз ай сайын оң гистологиялық
бақылау үшін тіндерді бояуға және оларды бір ай бұрын боялған сол тіндермен салыстыруға кеңес
береміз. Ай сайын боялған бақылау үлгілерін салыстыру талдау тұрақтылығын, сезімталдығын,
ерекшелігін және қайталануын бақылауға мүмкіндік береді.
BOND тераностика жүйелері барлық тиісті бақылау реагенттерін қамтиды және тест жүргізу үшін
қажетті жүйенің бақылау препараттарын қамтуы мүмкін. Жеткізілетін бақылау құралдарын қолдану
жөніндегі нұсқаулықтарға дәл сәйкестікте пайдалану маңызды. Мекеменің өз бақылау тіндері
(ұсынылмайды) нұсқаулықтарда көзделген кезде пайдаланылуы тиіс. Мекеменің жеке рәсімдері
тексерілмеген, сондықтан пайдаланылмауы тиіс - олай болмаған оқиғада талдау жарамсыз болады.
Сапаны бақылауға қойылатын барлық талаптар жергілікті, өңірлік немесе федералдық заңнамаға
немесе сертификаттау талаптарына сәйкес болуы тиіс.
14.3.2
Бақылау тіндері
14.3.2.1
Оң гистологиялық бақылауға арналған тін
l Дұрыс дайындалған тінді және тиісті бояу техникасын білдіреді
l Әрбір өңдеу циклында талдау шарттарының әрбір жиынтығына оң гистологиялық бақылау үшін
бір тінді қосыңыз.
l Сапасын оңтайлы бақылау және реагент сапасының нашарлауының Ең аз деңгейін анықтау
үшін әлсіз оң бояулы індер күшті оң бояулы тіндермен салыстырғанда дұрысырақ болады14.
l Антигеннің жоғары, орташа және төмен тығыздығы немесе нуклеин қышқылының
экспрессиясы бар бірнеше тіндері бар бақылау препаратын пайдалану бақылаудың кең
ауқымын қамтамасыз етеді.
l Егер оң гистологиялық бақылауға арналған тіннің оң бояуы болмаса, зерттелетін үлгілердің
нәтижелері жарамсыз деп танылуы тиіс.
l BOND жүйесін пайдалану барысында сапаны оңтайлы бақылауды қамтамасыз ету үшін біз
әрқашан гистологиялық бақылау тінін зерттелетін тін сияқты төсеніш шынысына
орналастыруды ұсынамыз.
BOND 6.0 пайдаланушы нұсқаулығы (АҚШ пен Қытайға арналмаған)
333
14. BOND реагенттерін пайдалану
14.3.2.2
Терісгистологиялықбақылауғаарналған тіндер
l Теріс бақылауды тексеру ИГХ барысында мақсатты антиген таңбалануының ерекшелігін
бастапқы антиденемен немесе ISH барысында мақсатты нуклеин қышқылын зондпен тексеру
үшін оң гистологиялық бақылаудан кейін қажет, сондай-ақ, сипаттық фондық бояуды (жалған
оң бояу) анықтау үшін керек.
l Көптеген тіндердің қима жасушаларының әртүрлі түрлерінің болуы жиі теріс бақылау
аймақтарының болуына әкеп соғуы мүмкін, бірақ пайдаланушы оны тексеру керек.
l Егер теріс гистологиялық бақылау үшін тінде ерекше бояу байқалса, зерттелетін үлгілердің
нәтижелері жарамсыз деп танылуы тиіс.
14.3.3
ИГХ арналған теріс бақылау реагенті
Ерекше емес бояуды бағалау және ерекше бояуды ең жақсы интерпретациялауды қамтамасыз ету
үшін әрбір зерттелетін үлгінің қималарының бірі үшін бастапқы антидененің орнына ИГХ арналған
теріс бақылау реагентін пайдаланыңыз.
l
Ұсынылатын мінсіз бақылау реагенттері.
i. Моноклоналды антиденелер үшін, алғашқы антиденелер үшін де қолданылған, бірақ
адам тіндерімен ерекше реактивтілік танытпайтын әдіспен жасушалар өсіндісінің
отырғызылатын сұйықтығынан алынатын сол изотип антиденелерін пайдаланыңыз.
Оларды бастапқы антиденеге ұқсас сұйылтқышты (BOND Primary Antibody Diluent)
пайдалана отырып, иммуноглобулиннің немесе ақуыздың концентрациясына дейін
араластырыңыз.
Егер өңдеуден кейін сұйылтылмаған антиденеде эмбрионды бұзау сарысуы қалса, онда
сұйылтылған антиденеге, сол сұйылтқышта сәйкес келетін ақуыз концентрациясы бар
эмбрионды бұзау сарысуы пайдаланылуы мүмкін.
ii. Поликлональды антиденелер үшін сол сұйылтқышты (BOND Primary Antibody Diluent)
пайдалана отырып, сол жануар көзінен қалыпты немесе иммундық емес сарысудың
иммуноглобулинді фракциясын (немесе тұтас сарысуын) және бастапқы антиденедегі
сияқты ақуыз концентрациясын қолданыңыз.
l
BOND Primary Antibody Diluent сұйылтқышы теріс бақылаудың жоғарыда сипатталған
реагенттерінен төмендеу балама ретінде жеке пайдаланылуы мүмкін.
l
Теріс бақылау реагенті үшін инкубация кезеңі бастапқы антиденелер үшін пайдаланылғанға
сәйкес болуы тиіс.
l
Әрбір бастапқы антиденелер үшін анықтаудың пайдаланылатын әдістерінің әрқайсысы үшін
(анықтаудың болмауын қоса алғанда) теріс бақылау реагенті бар жеке препаратты
пайдаланыңыз.
l
Кесінділер сериясындағы бірнеше антиденелерден тұратын панельді пайдаланған кезде, бір
препараттың теріс бояу аймағы теріс бақылау құралы немесе басқа антиденелер үшін ерекше
емес фондық бояудың бақылау құралы бола алады.
l
Эндогенді ферменттердің белсенділігін немесе ферменттердің ерекше емес
байланыстырылуын спецификалық иммунореактивтіліктен ажырату үшін, тек субстрат-
хромоген кешендерін немесе ферменттік кешендерді және субстрат- хромоген субстратын
сәйкесінше пайдалана отырып, қосымша зерттелетін тіндерді бояңыз.
334
14. BOND реагенттерін пайдалану
l
BOND жүйесі «*Теріс» деп аталатын әдепкі бойынша ИГХ теріс бақылау реагентін қамтиды, ол
кез келген ИГХ протоколы үшін маркер ретінде таңдалуы мүмкін. Бұл ретте BOND Wash
ерітіндісі бөлінеді (10.5.2 - Оқиғалар мен препараттардың баптаулары тармағын қараңыз).
14.3.4
ISH арналған бақылау реагенттері
14.3.4.1
Оң бақылау реагенті
ISH In situ гибридтеуі үшін оң бақылау зондын пайдаланыңыз.
l Зондтың орнына тіндердегі нуклеин қышқылдарының сақталуы және зондқа арналған нуклеин
қышқылдарының қол жетімділігі туралы ақпарат алу үшін пациенттің әрбір үлгісінің кесіктерінің
бірі үшін пайдаланыңыз.
l Оң бақылау зондына арналған протокол талдау үшін пайдаланылатын зондқа сәйкес келуі тиіс.
l Егер оң бақылау зонды оң бояу бермесе, зерттелетін үлгілердің нәтижелері жарамсыз деп
танылуы тиіс.
14.3.4.2
Теріс бақылау реагенті
ISH In situ гибридтеуі үшін теріс бақылау зондын пайдаланыңыз.
l Теріс бақылау зондына арналған протокол талдау үшін пайдаланылатын зондқа сәйкес келуі
тиіс.
l Ерекше емес бояуды бағалау және ерекше бояуды ең жақсы интерпретациялауды қамтамасыз
ету үшін әрбір зерттелетін үлгінің қималарының бірі үшін зондтың орнына теріс бақылау
реагентін пайдаланыңыз.
l Теріс бақылау реагенті үшін инкубация кезеңі зонд үшін пайдаланылғанға сәйкес келуі тиіс.
l Әрбір зонд үшін пайдаланылатын анықтау әдістерінің әрқайсысына (анықтаудың болмауын
қоса алғанда) теріс бақылау реагенті бар жеке препаратты пайдаланыңыз.
l Эндогенді ферменттердің белсенділігін немесе ферменттердің ерекше емес
байланыстырылуын спецификалық иммунореактивтіліктен ажырату үшін, тек субстрат-
хромоген кешендерін немесе ферменттік кешендерді және субстрат- хромоген субстратын
сәйкесінше пайдалана отырып, қосымша зерттелетін тіндерді бояңыз.
BOND 6.0 пайдаланушы нұсқаулығы (АҚШ пен Қытайға арналмаған)
335
14. BOND реагенттерін пайдалану
14.3.5
Сапаны бақылаудың артықшылықтары
Сапаны бақылаудың артықшылықтары төмендегі кестеде жинақталған.
Тін:
Анықтау жүйесінің
Оң бақылау
Теріс бақылау
реагенттері бар
реагенті және
реагенті (ISH)
Тіркелген және
ерекше
ерекше
немесе ерекше
зерттелетін үлгі
антиденелер
антиденемен
емес
ретінде өңделген
немесе зонд
немесе зондпен
антиденелер, не
қолданылған
буфер (ИГХ) және
анықтау жүйесінің
ерекше
реагенттері
антиденемен немесе
зондпен
пайдаланылған
анықтау жүйесінің
реагенттері
Оң
Талдаудың барлық
Ерекше емес
гистологиялық
кезеңдерін
фондық бояуды
бақылау
бақылайды.
анықтау
арналған тін:
Бояу үшін
Анықтау қажет
қолданылған
(пациенттің тінінде
реагентті және
болуы мүмкін)
процедураларды
мақсатты антиген
тексереді
немесе нуклеин
қышқылының тізбегі
бар тін немесе
жасушалар.
Идеалды бақылау -
антиденелердің
нуклеин
қышқылдарының
деградациясына аса
сезімтал келетін
әлсіз оң бояулы тін.
336
14. BOND реагенттерін пайдалану
Тін:
Анықтау жүйесінің
Оң бақылау
Теріс бақылау
реагенттері бар
реагенті және
реагенті (ISH)
Тіркелген және
ерекше
ерекше
немесе ерекше
зерттелетін үлгі
антиденелер
антиденемен
емес
ретінде өңделген
немесе зонд
немесе зондпен
антиденелер, не
қолданылған
буфер (ИГХ) және
анықтау жүйесінің
ерекше
реагенттері
антиденемен немесе
зондпен
пайдаланылған
анықтау жүйесінің
реагенттері
Теріс
Антиденелер мен
Ерекше емес
гистологиялық
жасушалардың
фондық бояуды
бақылауға
немесе жасуша
анықтау
арналған тін.
компоненттерінің
(ИГХ) әдейі емес
Теріс нәтиже
айқас реактивтілігін
көрсетуі тиіс тіндер
анықтау
немесе жасушалар
(зерттелетін
Нуклеин
тіндерде немесе оң
қышқылдарының
гистологиялық
басқа тізбектерімен
бақылау тіндерінде
немесе
болуы мүмкін)
жасушалармен
немесе жасушалар
компоненттерімен
зондтың әдейі
айқаспалы
гибридтенуін
анықтау (ISH)
Пациент тіні
Спецификалық
Нуклеин
Ерекше емес
фондық бояуды
қышқылдарының
фондық бояуды
анықтау
сақталуын және
анықтау
тіннің бекітілуін
және (немесе)
анықтауды бағалау
(ISH)
BOND 6.0 пайдаланушы нұсқаулығы (АҚШ пен Қытайға арналмаған)
337
14. BOND реагенттерін пайдалану
14.4
Бояуды талдау
Иммуногистохимия және (немесе) in situ гибридтену рәсімдерінде тәжірибесі бар білікті патолог
бақылау құралдарын бағалауға және нәтижелерді интерпретациялау алдында бояу нәтижелерінің
сапасын анықтауға тиіс.
Антиген детекциясының ерекшелігі мен сезімталдығы қолданылатын ерекше бастапқы
антиденелерге байланысты. Қалаған бояуды қамтамасыз ету үшін, инкубация уақытын және (немесе)
арнайы антиденелердің концентрациясын өзгерте отырып, BOND жүйесіндегі әрбір ерекше
антиденені оңтайландырыңыз. Арнайы антиденелерді оңтайландыруды орындамау антигеннің
оңтайлы емес детекциясына әкеп соғуы мүмкін.
Қараңыз:
l
14.4.1 - Оң гистологиялық бақылауға арналған тіндер
l
14.4.2 - Терісгистологиялықбақылауғаарналған тіндер
l
14.4.3 - Пациент тіні
14.4.1
Оң гистологиялық бақылауға арналған тіндер
Алдымен барлық реагенттердің дұрыс әрекетіне көз жеткізу үшін оң гистологиялық бақылаудан кейін
тінді қарап шығыңыз.
ДАБ негізіндегі жүйелерді пайдалану барысында мақсатты жасушаларда қоңыр (3,3
"диаминобензидин тетрахлорид, ДАБ) өнімнің болуы оң реакцияны білдіреді. BOND Polymer Red
Detection Systems жүйелерін пайдалану барысында мақсатты жасушаларда қызыл өнімнің болуы оң
реакцияны білдіреді. Егер оң гистологиялық бақылау тіндерінің оң боялуы болмаса, зерттелетін
үлгілердің нәтижелері жарамсыз деп танылуы тиіс.
14.4.2
Терісгистологиялықбақылауғаарналған тіндер
Бастапқы антиденемен немесе зондпен мақсатты антиген - нуклеин қышқылын таңбалаудың
ерекшеліктерін тексеру үшін оң гистологиялық бақылау тінінен кейін теріс гистологиялық бақылау
тіндерін қарап шығыңыз.
Тіндерде теріс гистологиялық бақылаудың ерекше бояуының болмауы антидененің немесе зондтың
жасушалармен немесе жасушалардың компоненттерімен әдейі айқаспалы реактивтілігі жоқ екендігін
растайды.
Теріс гистологиялық бақылаудың сыртқы бақылау тіндерінде спецификалық бояу (жалған оң бояу)
туындаған кезде теріс гистологиялық бақылау нәтижелері жарамсыз деп танылуы тиіс. Ерекше емес
бояу, егер ол болса, әдетте диффузиялық көріністе болады. Дәнекер тіннің спорадикалық боялуы,
сондай-ақ, формалинмен артық тіркелген тіндерінің кесіндісінде дебайқалуы мүмкін. Бояу
нәтижелерін интерпретациялау үшін тек интактілі жасушаларды пайдаланыңыз. Некроздалған
немесе жандандырылмаған жасушалар көп оқиғадаі ерекше емес боялады.
338

 

 

 

 

 

 

 

содержание      ..     7      8      9      10     ..