Антифосфолипидный синдром - часть 18

ки дополнительной С

гибированию взаимодействия 

β

2

тидов, а также исследование "мутантных" вариантов 

β

2

ют о том, что именно катионный (богатый лизином) участок пятого домена

(Cys

281

288

) принимает участие в связывании 

β

2

19

. 

Наряду с ЛП, 

β

2

ными белками плазмы или поверхностными мембранными молекулами

и может влиять на их функциональную активность (таблица 5.2.).

Таблица 5.2. Свойства 

ββ

2

BГПBI

20

Связывание с:

Функциональная активность

— анионными ФЛ 

— ингибирует протромбиназу

(особенно фосфатидилсерином 
и фосфатидилинозитолом)

— С4связывающим белком 

— ингибирует контактную активацию

(физиологический "переносчик" 

свертывания крови

белка S). 

— кальмодулином

— ингибирует АДФиндуцированную 

агрегацию тромбоцитов

— аннексином II

— ингибирует образование фактора 

Xа тромбоцитами

— модулирует антикоагулянтный эффект 

белков C и S

— участвует в клиренсе оЛНП

— участвует в клиренсе апоптозных клеток.

— сульфатидами

— взаимодействуют с молекулами адгезии, 

участвующими в гемостазе 
(фактор фон Виллебранда, тромбоспондин, 
селектины, ламинин)

— активирует фактор свертывания XII
— адгезия и агрегация тромбоцитов 

(рецептор для Рселектина)

Тем не менее физиологическое значение 

β

2

Гетерозиготный и гомозиготный дефицит 

β

2

нию риска тромбозов

31, 32

. Описан только один пациент с гомозиготным

77

ГЛАВА 5. Патогенетические механизмы антифосфолипидного синдрома

дефицитом 

β

2

же гомозиготного брата и у нескольких гетерозиготных кровных родст

венников не было отмечено склонности к развитию тромбозов

33

. Данные

о связи между развитием тромбозов и мутациями гена 

β

2

ваны в главе 2. У мышей без гена 

β

2

к нарушению образования тромбина, а также снижение фертильности.

Это дало основание предположить, что 

β

2

в ранних стадиях процесса репродукции

34

. 

Очевидно, что развитие тромбозов при АФС нельзя объяснить только

врожденным или приобретенным дефицитом 

β

2

гие биологические эффекты 

β

2

пользовании 

β

2

присутствии буферов с высокими (нефизиологическими) значениями рН.

Существует предположение, что связывание 

β

2

биомембраной in vivo значительно слабее, чем связывание с ней "класси

ческих" факторов свертывания и других ФЛ

вующих в регуляции гемостаза. Поэтому 

β

2

с этими белками за мембранное связывание с ФЛ. 

В то же время имеются многочисленные доказательства важной роли

β

2

Насонов Е.Л. Антифосфолипидный синдром

78

— с комплексом ФЛ

β

2

ГПI;

— со "скрытым" (конформационным) эпи
топом, формирующимся в процессе взаи
модействия 

β

2

ГПI и отрицательно заря

женных молекул (анионные ФЛ) или поверх
ностей (

γоблученный полистирол);

— бивалентное связывание с нативным 
β

2

ГПI, иммобилизованным с высокой

плотностью на поверхности анионных ФЛ
или 

γоблученном полистироле.

аФЛ

А

Б

В

аФЛ

аФЛ

фосфолипид

фосфолипид

“Нативный”

β

2

ГПI

“Нативный”

β

2

ГПI

“Скрытый”
эпитоп

β

2

ГПI

Рис 5.3. Типы взаимодействия аФЛ с 

β

2

ГПI

данные экспериментальных исследований о синтезе аКЛ у лабораторных

животных при их иммунизации "чистым" 

β

2

35, 36

. Полагают, что in

vivo

β

2

собный индуцировать синтез аФЛ.

Всего рассматривают три принципиально возможных типа 

β

2

зависимого взаимодействия "антиген—антитело" (рисунок 5.3)

15

.

В настоящее время преобладает точка зрения, что основные антиген

ные детерминанты 

β

2

37, 38

.

Действительно, исходя из кристаллографической структуры 

β

2

именно первый и второй домены наиболее доступны для взаимодейст

вия с антителами, в то время как пятый домен, благодаря высокому по

ложительному заряду, обеспечивает связывание 

β

2

ФЛ. Однако, по данным спектроскопии, установлено, что в процессе

взаимодействия 

β

2

ния структуры обеих молекул. Моноклональные антитела, полученные

путем гибридизации лимфоцитов больных АФС, взаимодействуют с

участками четвертого домена 

β

2

жить, что антигенными детерминантами 

β

2

мационные" или линейные эпитопы, локализующиеся в четвертом до

мене молекулы 

β

2

15

.

Такие предположения согласуются с нашими результатами изучения

ингибирующей активности пептидных фрагментов 

β

2

39

. Мы обна

ружили, что пептид (FCKNKEKKCS), соответствующий последователь

ности 274—288 в четвертом домене молекулы 

β

2

ностью ингибировать связывание IgG фракции, выделенной из сыворот

ки больных АФС с КЛ. 

Следует подчеркнуть, что циркулирующие антитела к 

β

2

β

2

ГП

(Kd — 10

)

40, 41

. Поэтому в кровяном русле они не образуют комплексов с

β

2

β

2

ренса комплексов 

β

2

β

2

β

2

на твердой фазе а

β

2

мультивалентному связыванию с 

β

2

вия "антиген

79

ГЛАВА 5. Патогенетические механизмы антифосфолипидного синдрома

виям, что и определяет важное патогенетическое значение 

β

2

симых аФЛ для развития АФС.

Протромбин

Другим фосфолипидсвязывающим кофакторным белком является

протромбин (ПТ) 

42

. Напомним, что ПТ (фактор II) — это витамин K

зависимый гликопротеин, который образуется в печени и в норме цир

кулирует в крови в концентрации около 100 мкг/мл. У человека ПТ

представляет собой одноцепочечный гликопротеин с молекулярной

массой 79 кДа, состоящий из 579 аминокислотных остатков и включа

ющий 3

γ

лоты. ПТ подвергается 

γ

печени. 

γ

GLA домен, который и принимает участие в связывании ПТ с ФЛ.

В процессе этого взаимодействия происходит конверсия ПТ в биологи

чески активный 

α

жащий 2 "kringle" структуры (последовательность, для которой харак

терны 3 внутренние дисульфидные связи) и С

протеазу. Эта структура, характерная для многих белков плазмы, обыч

но определяет взаимодействие белков с различными кофакторными ре

цепторами, а в молекуле ПТ принимает участие в связывании тромби

на с фибриногеном. Механизмы, определяющие участие ПТ в регуля

ции свертывания крови, подробно рассмотрены выше. Отметим лишь,

что комплекс ПТ

прямого антикоагулянта. 

Описано два типа аПТ: функциональные аПТ (обладающие актив

ностью ВА) и нефункциональные. Вероятно, эти различия зависят от

эпитопной специфичности аПТ. Скорее всего, механизмы ВА

ности аПТ сходны с таковыми у а

β

2

аПТ и ПТ, связывается с анионными ФЛ с высокой авидностью, вы

тесняя другие факторы свертывания. Кроме того, аПТ могут нару

шать сборку протромбиназного комплекса или напрямую замедлять

активацию ПТ фактором Xa. Иногда можно обнаружить синтез высо

коавидных аПТ, которые вызывают гипопротромбинемию за счет об

Насонов Е.Л. Антифосфолипидный синдром

80