Инфекционные болезни у детей - часть 116

 

  Главная      Учебники - Медицина     

 

поиск по сайту            правообладателям  

 

 

 

 

 

 

 

 

 

содержание   ..  114  115  116  117   ..

 

 

Инфекционные болезни у детей - часть 116

 

 

тивных и гемолизирующих эшерихий, увеличение
количества гнилостных, спороносных и других видов
микробов.

В 50-е годы нашего столетия в связи с развитием

микробиологических методов культивирования анаэро-
бов было показано, что основную массу кишечной
микрофлоры представляют факультативные (лакто-
бактерии) и облигатные анаэробы (бифидобактерии,

бактероиды), и, что качественные и количественные
изменения именно этих групп определяют развитие
дисбактериоза кишечника.

Состав и функции кишечной микрофлоры.

Состояние кишечной микрофлоры (МКФ) являет-

ся одним из факторов, определяющих рост и раз-
витие ребенка. В организме человека все микробы
находятся в ассоциациях. Сапрофитные микроб-
ные ассоциации в процессе эволюции приобрели
большое значение в выполнении жизненно важ-
ных функций организма.

В течение внутриутробного развития здорово-

го плода его кишечник остается стерильным и
первые микроорганизмы появляются у ребенка
спустя несколько часов после рождения. Как пра-

вило, это бактерии из родовых путей и кишечника
матери — различные виды лактобактерий, эше-
рихий, кокковая флора: стрептококки, энтерокок-
ки, стафилококки и др.

На первой неделе жизни ребенка вначале на-

чинает увеличиваться общее число анаэробных
бактерий, преимущественно бифидобактерии.
Длительность периода становления бифидофлоры
зависит от вида вскармливания. Две трети ново-

рожденных, находящихся на грудном вскармли-
вании, в конце первой — начале второй недели
жизни еще не имеют оптимального содержания
бифидобактерии в кишечнике. В течение первого
полугодия жизни бифидобактерии обнаруживают-
ся почти в равном количестве с лактобактериями,
энтерококками и кишечной палочкой.

Симбиоз бифидобактерии и молочно-кислых

палочек имеет в это время принципиально важное
значение для формирования нормального биоце-
ноза кишечника у ребенка.

У детей, находящихся в течение первого года

жизни на естественном вскармливании, становле-
ние бифидофлоры происходит существенно быст-
рее, чем у детей, вскармливаемых искусственно.

Это объясняется наличием в материнском молоке

бифидогенных факторов и других компонентов,
способствующих становлению нормальной ки-
шечной микрофлоры: иммуноглобулинов, особен-
но секреторного IgA, макрофагов, Т- и В-
лимфоцитов, комплемента и его компонентов,

лизоцима, интерферона и др.

В целом кишечная микрофлора ребенка пер-

вого года жизни, находящегося на естественном
вскармливании, характеризуется высоким содер-

жанием бифидобактерии и лактобактерий (10

7

-

10

й

 микробных клеток в 1 г. кишечного содер-

жимого), колебаниями общего количества кишеч-
ной палочки (10

6

-10

8

 микробных клеток), широ-

кими колебаниями процентного содержания по
отношению к аэробам полноценных кишечных
палочек (50%-85%), лактозонегативных, гемоли-

тических кишечных палочек (4-25%), энтерокок-
ков (10

5

-10

7

). У незначительной части практиче-

ски здоровых детей старше 3-х месяцев (5-15%) в
содержимом кишечника обнаруживаются микро-
бы рода протея (<10

3

), другие условно-патогенные

энтеробактерии (<Ю

4

), сапрофитные и эпидер-

мальные стафилококки (10

4

-10

6

), дрожжеподоб-

ные грибы (10

4

).

При искусственном вскармливании, кроме

подавления лакто- и бифидофлоры, у детей перво-
го года жизни отмечается нарастание содержания
бактероидов, общего количества кишечной палоч-
ки и увеличение остаточной, преимущественно

условно-патогенной флоры. Частота выделения
условно-патогенных бактерий, грибов, клостри-
дий колеблется в широких пределах.

Общая тенденция изменений микрофлоры с

увеличением возраста состоит в стабилизации

численности представителей главной флоры —

бифидобактерии на уровне 10

8

-10

п

 микробных

клеток в 1 г. испражнений. Одновременно
несколько изменяется видовой состав бифидофло-

ры: преобладающие у детей раннего возраста
виды Б.бифидум, Б.брове, Б.инфантис и другие
вытесняются более распространенными у детей
более старшего возраста и взрослыми видами:
Б.лонгум, Б.адолесцентис и др.

У детей старше года возрастает численность

грамположительных спорогенных микроорганиз-
мов-бактероидов до 10

8

 и несколько уменьшается

содержание лактобактерий до 10

6

 микробных

клеток в 1 г. кишечного содержимого.

Общее число эшерихий в 1 г. кишечного со-

держимого колеблется от 10

6

 до 10

8

 клеток. Из

этого числа 60-80% составляют полноценные
кишечные палочки, лактозонегативные энтеро-
бактерии — до 5%, кишечная палочка со слабо
выраженными ферментативными свойствами —

до 10%. Гемолизирующая кишечная палочка у
здоровых детей, как правило, не обнаруживается.
Энтерококки составляют обычно 10-25% от
аэробной флоры кишечника. В следовых количе-
ствах (0,01-0,001%) у 5-15% здоровых детей оп-

463

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

 

ределяются грибы, дрожжи, клостридии, стрепто-
кокки, стафилококки, условно-патогенные бакте-
рии родов цитробактер, клебсиелла, энтеробактер,
гафния, серрация, протей и др.

Микрофлора кишечника подразделяется на

главную (резидентную), сопутствующую и оста-

точную.

Главная микрофлора составляет около 90%

всей флоры желудочно-кишечного тракта и лока-
лизуется, в основном, в толстом кишечнике — в
просвете и на слизистой оболочке в концентраци-
ях до 10

й

 клеток в 1 г. кишечного содержимого.

Ее представляют анаэробные микроорганизмы:
грамотрицательные аспорогенные анаэробы-бак-
тероиды, фузобактерии, вейлонеллы, нейссерии и

др.; грамположительные аспорогенные формы:
бифидобактерии, пептококки, пептострептококки

и др; в меньших количествах спорогенные клост-

ридии и др.

Сопутствующая микрофлора составляет 8-

10% от всей флоры кишечника и представлена, в

основном, семействами энтеробактерий и лакто-
бацилл. Кишечные палочки находятся, преимуще-

ственно, в толстом кишечнике, достигая концен-
трации до 10

13

 микробных тел в 1 г. фекалий. В

дистальном отделе тонкого кишечника концен-
трация эшерихий снижается до 10

5

, а в прокси-

мальном отделе — до 10

3

 клеток в 1 г. кишечного

седержимого. Лактобациллы: ацидофилус, фер-
ментум, бревис, саливарис, лактис и др. также
находятся, преимущественно, в толстом кишечни-

ке в концентрациях 10

б

-10

8

 клеток. В дистальном

и проксимальном отделах тонкого кишечника их
число снижается до 10

3

-10

5

. К этой группе бакте-

рий относятся также энтерококки, составляющие
до 25% всей сопутствующей микрофлоры в тол-
стом кишечнике, тогда как в просвете тонкого
кишечника они встречаются лишь в следовых
количествах.

Остаточная микрофлора, представлена,

главным образом, условно патогенными бакте-
риями семейства энтеробактерий: клебсиелла,
цитробактер, энтеробактер, протей, гафния, сер-
рация и др. Она локализуется, преимущественно,
в толстом кишечнике и составляет у здоровых
детей десятые или сотые доли процента от общего
количества микроорганизмов. Бактерии остаточ-
ной микрофлоры выделяются у 3,5-25% обсле-

дуемых детей.

Всю микрофлору кишечника можно подраз-

делить на мукозную и полостную.

Микробы мукозной микрофлоры обитают на

слизистой оболочке кишечника и образуют плот-

ный бактериальный "дерн", обеспечивающий
колонизационную резистентность кишечной стен-
ки и нормальное течение метаболических процес-

сов в ее эпителиальных клетках.

Эти микроорганизмы, кооперируясь с микро-

бами пристеночной зоны кишечника (поверх-
ностный слой слизи, гликокаликс, участки при-
стеночной зоны, ограниченные мембранами боко-
вых поверхностей микроворсинок), создают осо-
бые микроэкологические зоны, где находятся
продукты метаболизма эпителиальных клеток,
определенный рН среды, и, тем самым, создаются

условия, отличные от таковых в просвете кишки.

Полостная флора — это, по существу, мик-

рофлора испражнений. Известно, что в 1 г. ис-
пражнений находится до 10

10

-10

13

 микроорганиз-

мов, что составляет до 30% сухого веса фекаль-
ных масс.

Ежедневно из организма выводится около

3-Ю

13

 микробных клеток. При более частых дефе-

кациях число их понижается. При урежении числа
дефекаций количество микроорганизмов нараста-
ет и может превысить нормальные показатели в

1000 и более раз.

Микробная флора кишечника участвует во

многих жизненно важных процессах, происходя-
щих в макроорганизме.

Основные представители так называемой

нормальной кишечной микрофлоры (бифидобак-

терии, лактобактерии, кишечные палочки) имеют
выраженную антагонистическую активность по
отношению к патогенным и условно-патогенным
бактериям, что является важным фактором ло-
кальной антимикробной зашиты слизистой обо-
лочки кишечника.

В процессе жизнедеятельности бифидобакте-

рии образуется молочная, уксусная, муравьиная и
янтарная кислоты, что приводит к снижению рН
среды кишечника до 4,0-3,8 и, как следствие, к
торможению роста и размножения в нем гнилост-
ных и патогенных микроорганизмов.

Важная роль бифидофлоры, особенно у ре-

бенка первого года жизни, состоит в том, что эти
микроорганизмы участвуют в процессе абсорбции
в кишечнике солей железа, кальция и витамина Д
и, следовательно, обладают антианемическим и
антирахитическим свойствами. Бифидобактерии
также участвуют в энтеральном синтезе амино-
кислот, белков, витамина К, тиамина, рибофлави-
на и других витаминов группы В, фолиевой, нико-

тиновой и пантотеновой кислот.

Доказано морфокинетическое действие ки-

шечной флоры, в частности, возбуждающее дей-

464

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

 

ствие бифидобактерий на перистальтику кишеч-
ника грудных детей. Симбиоз бифидобактерий и
молочно-кислых палочек имеет определенное
функциональное значение: лактобактерии, заселяя
слизистую оболочку кишечника, создают на ее

поверхности среду, благоприятную для роста и
размножения бифидофлоры.

Антагонистическая активность лактобактерии

также связана с образованием ими молочной ки-
слоты в процессе брожения и продукцией анти-
биотических веществ лактолина, лактоцидина, ли-
зоцима, ацидофиллина. Молочно-кислые бакте-
рии способны подавлять размножение синегной-
ной палочки, эшерихий, клебсиеллы, протея, не-
которых видов сальмонелл, шигелл, серраций,
стафилококков, стрептококков, некоторых Л-форм
бактерий.

Антибактериальная активность кишечных

палочек определяется их способностью синтези-
ровать колицины и микроцины — специфические
белки, обладающие способностью тормозить рост
и размножение энтеротоксигенных штаммов эше-
рихий, практически всех видов энтеробактерий,
псевдомонад, стрептококков, стафилококков,
грибов и др.

Нормальная кишечная флора является необ-

ходимым звеном во многих метаболических ре-
акциях макроорганизма.
 Она участвует в осуще-
ствлении печеночно-кишечной циркуляции важ-
нейших компонентов желчи; ферменты флоры в
дистальной части кишечника инактивируют био-
логически активные соединения (биогенные ами-
ны), выделяющиеся организмом с пищеваритель-
ными соками; кишечная флора утилизирует непе-

реваренные пищевые вещества с образованием
аминов, органических кислот и других соедине-
ний, влияющих на обмен веществ в организме.

Одной из важнейших функций нормальной

кишечной микрофлоры является ее участие в
формировании иммунологической реактивности
макроорганизма.

В результате быстрого нарастания с момента

рождения ребенка количественных и качествен-
ных изменений кишечной флоры идет все усили-

вающаяся антигенная стимуляция лимфоидного

аппарата макроорганизма, увеличение уровня
пропердина и комплемента, синтез иммуноглобу-
линов, вырабатывается определенный уровень
неспецифической защиты, в крови накапливаются
антитела против находящихся в организме бакте-
рий. Антигены кишечной микрофлоры, стимули-
руя развитие иммунного аппарата ребенка, уско-
ряют заселение периферических лимфоидных

органов лимфоцитами. В ответ на антигенную
стимуляцию предшественники В-клеток, находя-
щиеся в пейеровых бляшках, мигрируют сначала
в дренирующие лимфатические узлы, откуда по-
падают в общий кровоток, а затем — в слизистую
оболочку кишечника, слезные и слюнные железы,
а также в молочные железы, где трансформиру-

ются в плазматические клетки, синтезирующие
иммуноглобулины. В результате антигенной сти-
муляции аутофлорой, прежде всего — кишечными
бактериями, в организме создается общий пул
иммуноглобулинов.

Таким образом, общий объем флоры, сло-

жившиеся филогенетически и онтогенетически
количественные взаимоотношения, внутривидовое
качественное постоянство в соответствующих
биологически определенных участках желудочно-
кишечного тракта, а также осуществление защит-
ной, обменной и иммуноиндуцирующей функций

— все это составляет нормальный биоценоз, или
бактериоз кишечника.

Нарушения биоценоза кишечника и спосо-

бы их выявления. Отдельные отклонения в со-
ставе кишечной микрофлоры еще не являются
нарушениями биоценоза кишечника. Таковыми
могут быть: изолированное увеличение общего
количества кишечной палочки, появление гемоли-
тических или лактозонегативных форм эшерихий,
исчезновение энтерококков или обнаружение
отдельных штаммов условно-патогенных бакте-
рий и др. Обычно эти изменения бывают транзи-

торными и отражают различные этапы взаимо-
действия макроорганизма с микроорганизмами
или окружающей среды.

Отклонения кишечной микрофлоры следует

рассматривать как "нарушение биоценоза кишеч-
ника" (НБК) только в тех случаях, когда появля-
ются сочетанные изменения количественного и
качественного состава бактерий в нескольких
группах: в основной, сопутствующей или остаточ-
ной микрофлоре.

Первоначально, как правило, отмечается сни-

жение общего количества кишечных палочек (<
2-Ю

8

 в 1 г фекалий) в сочетании с падением (<

70%) содержания полноценных ее форм и появле-
нием неполноценных эшерихий (лактозонегатив-
ных, слабо ферментирующих или гемолитических

штаммов) при одновременном снижении содер-
жания энтерококков (менее 25%) и выделении
штаммов условно-патогенных бактерий (свыше

10

2

) при нормальном содержании молочно-

кислых бактерий и бифидобактерий. Указанные
сдвиги кишечной микрофлоры следует рассмат-

465

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

 

ривать как незначительные нарушения биоценоза

кишечника.

Умеренные нарушения биоценоза кишечника

характеризуются дальнейшими изменениями ко-
личества и качества аэробной флоры: снижается
процентное содержание полноценных кишечных
палочек (< 50%), появляются ассоциации условно-
патогенных бактерий (протей + клебсиелла, про-

тей + стафилококк, клебсиелла + протей + стафи-
лококк, клебсиелла + синегнойная палочка и др.),
уменьшается до 10

7

 содержание бифидобактерий;

т.е. в процесс вовлекается анаэробная флора,
составляющая до 95% всей бактериальной флоры
кишечника.

При резко выраженных нарушениях биоцено-

за кишечника отмечаются значительные колеба-
ния процентного содержания неполноценных ки-
шечных палочек (от 5 до 100%), резкое снижение
содержания энтерококков. Более чем у половины

детей обнаруживаются различные штаммы УПБ

(изолированно или в ассоциациях) на фоне низко-
го содержания бифидобактерий (вплоть до 0) при
одновременном расширении ареала обитания сап-

рофитных и условно-патогенных микроорганиз-
мов: нарастает содержание бифидобактерий до

10

6

-10

7

 в тонком кишечнике, кишечных палочек

до 10

4

 в дистальных отделах тонкого кишечника,

растет частота обнаружения эшерихий, клебсиелл,
других энтеробактерий на коже, в моче и др.

У детей 1 года жизни на фоне резких измене-

ний основных фракций кишечной флоры, свойст-
венной НБК III степени, нередко отмечается зна-
чительное снижение или полное исчезновение в
толстой кишке лактобактерий, что еще больше
усиливает нарушения биоценоза кишечника и
трактуется нами как особо тяжелое нарушение в
биоценозе кишечника.

В практической работе о состоянии НБК в ос-

новном судят по методу Ф.Л.Вильшанской (1970),
позволяющему оценить изменения качественного
и количественного состава микрофлоры фекалий,
определить количественно наличие бифидобакте-
рий, лактобактерий, энтерококков, различных
видов кишечных палочек, условно-патогенных
бактерий и грибов.

Исследуемым материалом является кал после

естественной дефекации; посуда для проб фекалий

должна быть стерильной. Флаконы емкостью 10-
20 мл. прозрачные, с плотно завинчивающейся

крышкой стерилизуются автоклавированием, су-
хим жаром, газовой стерилизацией. Не следует
обрабатывать посуду дезинфицирующими раство-
рами и другими химическими веществами.

Забор материала производится стеклянной

или деревянной палочкой из средней порции кала
в количестве не менее 2 г. Материал следует дос-

тавлять в лабораторию в кратчайшие сроки, не

позднее чем через 2 часа после забора пробы
(интервал между забором пробы и началом посева
не должен превышать 4 часа). С момента взятия
пробы и до посева оптимальные условия хранения

— в холодильнике.

Для полного количественного учета после

тщательного эмульгирования пробы готовят се-
рийные десятикратные разведения. Из получен-
ных разведений делают посевы.

Посев осуществляется на среды для семейства

кишечных бактерий: Эндо (2 чашки, 2-я исполь-
зуется для подсчета лактозонегативных колоний),

Плоскирева, Левина, селенитовый бульон, вис-
мут-сульфит агар; для анаэробных бактерий: сре-
да Блаурокка (для проведения количественного
учета бифидобактерий); томатная — для молочно-
кислых бактерий; селективная среда с азидом
натрия — для энтерококков; среда Чистовича —
для стафилококков, Сабуро — для грибов. Уни-
версальной средой является кровяной агар, где
производится подсчет гемолитических бактерий и
кокков с целью определения их количественного
соотношения.

Кроме того, существуют специальные микро-

биологические методы определения грамотрица-
тельных аспорогенных анаэробов (бактероиды,
фузобактерии, нейссерии и др.) и спорогенных
анаэробов (клостридии и др.), существенно рас-
ширяющие спектр исследований кишечной мик-
рофлоры.

Лабораторные методы оценки состояния мик-

робиоценоза кишечника до настоящего времени
остаются дорогостоящими, трудоемкими и непри-
емлемыми для проведения массовых исследова-
ний из-за необходимости большого набора пита-
тельных сред и создания особых условий культи-
вирования. В связи с этим предложены различные
косвенные тесты. Определяют уровень метаболи-
тов кишечной микрофлоры и ферментов в раз-
личных субстратах, антагонистическую и Q-
аспартилпептидазную активность, способность
образовывать экзонуклеазы факультативно-ана-
эробными бактериями, способность инактивиро-
вать антибактериальную составляющую препара-

та интерферона.

Эти методы позволяют решать практическую

задачу — ориентировочно диагностировать нару-
шения биоценоза кишечника без проведения бак-
териологического анализа по развернутой схеме.

466

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

 

 

 

 

 

 

 

 

содержание   ..  114  115  116  117   ..