Том 3. Справочник по кожным болезням - часть 366

сифилид и др.).

100. Приготовление препарата для бактериологического 
исследования

Наиболее распространенный способ обработки предметных стекол - кипячение их в 1 %

растворе натрия гидрокарбоната  и промывание поочередно водой, хлористоводородной

кислотой и снова водой.

Хранят стекла сухими в тщательно закрытых емкостях либо в банках с 95 % этиловым

спиртом.

На стекло наносят каплю стерильной воды, а затем бактериальной петлей - исследуемый

материал,   который   равномерно   распределяют   по   предметному   стеклу.   Плотный,   густой

материал   (гной)   наносят   на   два   предметных   стекла   вначале   соприкосновением,   а   затем

раздвижением стекол в разные стороны.

Препарат   высушивают,   фиксируют   над   пламенем   горелки   и   окрашивают   различными

красителями в зависимости от цели исследования (см. № 65-67, 70, 71, 76-79).

Бактериоскопия   является   важным   методом   диагностики   ряда   кожных   и   венерических

заболеваний (пиодермия, дерматомикозы, туберкулез, лепра, болезнь Боровского, сифилис,

мягкий шанкр и др.).

101. Проба Бальзера

Применяется для диагностики отрубевидного (разноцветного) лишая. Пятна смазывают

раствором йода спиртовым 5 %. Вследствие разрыхления рогового слоя в области высыпаний

раствор йода впитывается в эти участки сильнее и пятно окрашивается  интенсивнее, чем

окружающая   здоровая   кожа.   При   отсутствии   раствора   йода   можно   пользоваться

анилиновыми   красителями.   Следует   отметить,   что   при   остаточной   лейкодерме   после

отрубевидного лишая, особенно у лиц, подвергшихся ультрафиолетовому облучению, проба

Бальзера бывает отрицательной.

102. Проба с актинолизатом

Ставится с целью дифференциальной  диагностики актиномикоза и других заболеваний

кожи   (туберкулез,   глубокая   пиодермия,   другие   виды   глубокого   микоза).   Предварительно

этиловым спиртом или эфиром очищают участок кожи передней поверхности предплечья или

задней,   поверхности   плеча.   Туберкулиновым   шприцем   набирают   0,3   мл   антигена

(актинолизата),   приготовленного   из   лизирующей   культуры   лучистого   гриба,   и   вводят

внутрикожно   до   образования   «лимонной   корочки»   Не   позже   чем   через   24   ч   смотрят

результаты   пробы.   Реакцию   считают   положительной   в   случае   появления   эритемы   и

отечности в месте введения антигена. Нередко отмечается и очаговая реакция (повышение

температуры, усиление воспалительных явлений в очаге, отделение гноя, мокроты), которая

имеет наибольшую диагностическую ценность.

103. Проба с гистамином при лепре

Подозрительный   на   лепру   участок   кожи   (чаще   пятно)   протирают   этиловым   спиртом,

высушивают, а затем на него наносят одну каплю 0,1 % раствора гистамина. Одновременно

такую же каплю наносят на симметричный, видимо непораженный, участок кожи. Через обе

капли скарификатором на коже делают царапину в пределах эпидермиса. Свидетельством

правильной скарификации будет отсутствие крови на поверхности царапины. На здоровом

участке   кожи   через   1-2   мин  появляется   округлой   формы   эритема   диаметром   до   5   см   с

волдырем   в   центре.   На   лепрозном   пятне   обычно   никакой   реакции   не   бывает,   либо   она

выражена   значительно   слабее,   чем   на   контрольном   участке   кожи.   В   случае   отсутствия

гистамина можно пользоваться 2 % раствором  морфина гидрохлорида (дионина), либо 1 %

раствором морфина. Данная проба особенно показательна при гипохромных, значительно

менее при эритематозных пятнах.

104. Проба с горчичником при лепре

Пятно, подозрительное на лепру, покрывают смоченным в теплой воде горчичником так,

чтобы  края  последнего   захватывали  и   здоровую  кожу.   Через   10-15  мин  на  окружающей

пятно здоровой коже в месте контакта с горчичником появляется эритема, отсутствующая

или значительно менее выраженная в области пятна.

Данная проба, как и проба с гистамином, особенно ценна при гипохромных пятнах.

105. Проба с калия йодидом при лепре

Больному в течение 3-4 дней дают внутрь калия йодид от  0,5  до 3 г/сут. Через несколько

часов   после   начала   приема   состояние   его   ухудшается,   появляются   головная   боль,

недомогание,   значительное   повышение   температуры   тела,   запор,   тахикардия.   Лепромы

краснеют,   становятся   болезненными,   повышается   местная   температура.   Данная   проба

широкого распространения не нашла из-за вредного воздействия на больных. Имеется более

безопасная   модификация   пробы:   на   участки,   подозрительные   на   лепру,   накладывают

компрессы с 20 % водным раствором калия йодида.

При лепроматозной  лепре в области высыпаний  появляются покраснение  и жжение. В

этом варианте проба практически безвредна и нередко помогает диагностике.

106. Проба с конгорот при амилоидозе (проба Бенхольда)

Основана на свойстве амилоида адсорбировать введенный в кровь краситель.

Больному впутривенно вводят 10 мл 1 % водного раствора конгорот. Через 4 мин из вены
второй руки берут кровь в парафинированную пробирку с целью получения плазмы. Через 1
ч берут вторую порцию крови, центрифугируют и определяют в плазме (колориметрическим
способом) процент потери красителя во второй порции крови. Содержание конгорот в первой
порции крови принимают за 100 %. 
Исследование проводят с помощью колориметра Дюбаска. В дерматологии при подозрении
на   изолированный   или   вторичный   амилоидоз   кожи   пользуются   пробой   с   конгорот
Мархионини   и   Джон   в   пораженные   участки   внутрикожно   вводят   1   %   водный   раствор
конгорот.   Длительное   (до   15-20   дней)   окрашивание   участка   пораженной   кожи   (папул)
подтверждает   диагноз   заболевания.   На   здоровых   (контрольных)   участках   кожи   окраска
исчезает через 3-5 дней.

107. Проба с кислотой никотиновой («воспламенение»)

Основана на свойстве кислоты никотиновой при внутривенном введении (почти сейчас

же) и приеме внутрь (через 3-4 мин) вызывал расширение капилляров кожи. Проба имеет
большую диагностическую ценность в случаях слабо выраженной сифилитической розеолы.
Внутривенно вводят 1-2 мл 1 % раствора кислоты никотиновой, либо больной принимает
0,05-0,1 г препарата внутрь. Пятна, вызванные расширением сосудов, окрашиваются более
интенсивно и четче контурируются по сравнению с окружающей кожей.

108. Проба с кислотой никотиновой при лепре

Техника   постановки   пробы   та   же,   что   и   пробы   с   воспламенением   (см.   №   107).

Внутривенно вводят 5 мл 1 % раствора кислоты ннкотиновой. Через 2-3 мин наблюдается

покраснение   кожи.   В   области   лепрозных   высыпаний   оно   появляется   раньше   и   выражено

более   интенсивно.   Через   15-20   мин   эритема   на   здоровых   участках   кожи   исчезает,   а   на

подозрительных   участках,   если   это   действительно   лепра,   держится   значительно   дольше.

Иногда на фоне эритемы возникают волдыри. Внутривенное введение кислоты никотиновой

можно   заменить   приемом   внутрь   в   дозе   0,05-0,1   г.   Реакция   особенно   выражена   при

лепроматозной лепре.

109. Проба с папиросной бумагой при жирной себорее

При  подозрении  на  жирную себорею  лица или  волосистой  части    головы  пораженные

участки как бы промокают папиросной бумагой, проводят ею, вытирая поверхность кожи,
волос. На бумаге остаются ясно видимые жирные пятна. Для дифференциации с возможными
пятнами от пота бумагу оставляют на 1-2 ч. Пот испаряется, бумага делается сухой и видимо
чистой,  чего не бывает при себорее.

Проба имеет значение при дифференциальной диагностике жирной себореи волосистой

части головы и псориаза той же локализации.

110. Проба с прижизненной окраской лепром

Больному внутривенно вводят 2 мл 1-2 % раствора метиленового синего. Через 1-2 сут

лепромы окрашиваются в синий цвет. Иногда могут окрашиваться и участки непораженной
кожи, хотя, по мнению некоторых исследователей, эта проба строго специфична для лепры.

Для постановки пробы необходим абсолютно химически чистый препарат, в противном

случае возможны осложнения.

111. Проба с суховоздушной ванной при лепре

У некоторых больных лепрой высыпания напоминают  мраморность кожи. С целью их

дифференциации   пользуются   суховоздушной   ванной.   При   нагревании   кожи   мраморность
исчезает, а при лепре, в связи с парезом вазомоторов капиллярной сети, - остается и даже
усиливается.

112. Проба с трипановым синим по Кавецкому

Применяется с целью определения качества и активности клетных элементов активной

мезенхимы,   которые   играют   важную   роль   иммунологических   и   аллергических   реакциях
организма.  Проба достаточно  проста  по своему исполнению,  может  быть  применена  при
экземе нейродермите, почесухе, хронической крапивнице и других заболевани кожи с целью
определения активности патологического процесса.

Туберкулиновым шприцем с тонкой острой иглой строго внутрикожно вводят 0,2 мл 0,25

%   раствора   трипанового   синего,   приготовленного   на     0,5   %   растворе   новокаина.   После
введения красителя линейкой измеряют размер пятна. Такое же измерение производят через
сутки.  Сумму двух измерений  находят  в горизонтальных рядах таблицы  Туракова, на их
пересечении будет значение дермального коэффициента.

113. Проба с трихофитином

Ставят с диагностической и лечебной целью при инфильтративно-нагноительной форме

трихофитии.   При   этой   форме   дерматоза   микроскопическая   и   культуральная   диагностика

затруднена в связи с выраженным нагноительным процессом.

На обезжиренный этиловым спиртом или эфиром участок кожи предплечья наносят каплю

трихофитина, скарификатором производят поверхностную скарификацию. Используют также

внутрикожное   введение   0,2   мл   трихофитина.   Результаты   пробы   оценивают   по   величине

папулы и реакции обострения в очаге поражения через 24, 48, 72 ч.

Проба   представляет   особую   ценность   в   случаях,   при   которых   до   обычных   методов

исследования проводилось местное лечение, в связи, с чем обнаружение гриба затруднено.

114. Проба с ультрафиолетовым облучением при лепре

На гипохромные пятна, подозрительные на лепру, воздействуют гиперэритемными дозами

кварца.   При   лепре   окраска   пятен   не   изменяется   и   они   четко   контурируются   на   фоне

покрасневшей кожи.

115. Пробное лечение

Применяется   в   случаях,   когда   установление   диагноза   затруднительно,   а   для   лечения

подозреваемого заболевания имеются специфические средства

Так, например, имеется подозрение на бугорковую разновидность третичного сифилиса.

Серологические   и   другие   реакции   либо   отрицательны,   либо   сомнительны.   Клинически

высыпания   напоминают   также   и   высыпания   при   вульгарной   волчанке.   Для   их   отличия

проводят пробное лечение  сифилиса специфическими  средствами  (настойка йода, висмут,

бензилпенициллин) и по его результатам устанавливают окончательный диагноз. В данном

случае   можно   провести   пробное   лечение   и   противотуберкулезными   средствами   -

препаратами изоникотиновой кислоты и др.

С провокационной   целью  иногда  местно  применяют   серную  мазь  при  розовом лишае,

настойку йода - при хронической язвенной пиодермии, герпетиформном дерматозе Дюринга,

лепре и др.

116. Провокации при гонорее

Дополнительный   метод   исследования.   Применяется   в   том   случае   когда   гонококков

обнаружить   не   удается,   а   клиническая   картина   подозрительна   на   гонорею,   а   также   как

критерий   качества   терапии   после   ее   окончания.   Используют   определенные   методы

воздействия на организм в целом и мочеполовой аппарат (главным образом на мочеиспуска

тельный   канал),   что   ведет   к   обострению   имеющегося   воспалительного   процесса.   После

проведения провокации у больного в течение 3 дней берут материал для исследования на

содержание гонококков. 

Применяют следующие виды провокации.

1. Алиментарная - назначение больному острой и соленой пищи, пива, в состав которого

входит хмель, содержащий лопулин, выводящийся из организма преимущественно почками.

Проходя через мочеиспускательный канал, он раздражает его слизистую оболочку.

2.  Иммунобиологическая  - внутримышечное введение  0,5 мл (500 мл микробных тел)

гонококковой   вакцины.   В   последнее   время   провокации   с   помощью   гоновакцины

комбинируют   с   внутримышечным   введением   50-200   МПД   пирогенала   или   продигиозана.

Женщинам в стационарпых условиях гоновакцину в дозе 50-100 млн. микробных тел вводя в

шейку матки.

3. Механическая - введение в мочеиспускательный канал прямого бужа, размер которого

соответствует   размеру   наружного   отверстия   мочеиспускательного   канала.   Вместо   бужа

можно   использовать   тубус   уретроскопа   Валентина,   особенно   в   тех   случаях,   когда   при

дальнейшем   исследовании   необходимо   сделать   уретроскопию.   Простерилизованный

охлажденный буж смазывают глицерином и вводят на 10 мин в мочеиспускательный канал,

мужчинам - в передний  его отдел. Затем производят легкий массаж мочеиспускательного

канала на буже с целью получения секрета желез мочеиспускательного канала (рис. 13).

4.  Химическая  -   введение   в   мочеиспускательный   канал   химическх   раздражающих

веществ, чаще серебра нитрата (3-4 мл 0,5-1 % pacтвоpa у мужчин, 3-4 мл 1-2 % раствора-у

женщин; 3-5 % раствор для

смазывания канала шейки матки). Для раздражения слизистой оболочки шейки матки можно

использовать раствор Люголя. Мазки после химической провокации лучше брать спустя 2-3

дня.   В   первые   дни   в   выделениях   из   мочеиспускательного   канала   и   канала   шейки   матки

обнаруживают   много   эпителиальных   клеток   отторженной   слизистой   оболочки,   что   часто

затрудняет микроскопическое исследование (рис. 14).

5.  Физиотерапевтическая,   или   термическая,   -   использование   диатермии,   реже   -

интравагинальных   грязевых   тампонов.   Абдоминально-вагинально-сакральную   диатермию

назначают женщинам ежедневно  30-40 мин в течение 3 дней. Мазки берут спустя 2 ч после

каждой процедуры.

6.  Физиологическая  -   взятие   мазка   у   женщин   из   канала   шейки   матки   во   время

менструации и в течение 3 дней после нее.

На практике чаще всего используют комбинированную провокацию.

Мы считаем наиболее удачными комбинации: иммунобиологической и механической 

провокации - у мужчин; иммунобиологической, терми

 

 ческой и физиологической - у женщин.

 

 

Первую провокацию обычно проводят спустя неделю после окончания лечения, 

следующую - через месяц.

Следует отметить, что отрицательные результаты провокации не всегда могут служить 

неоспоримым критерием излеченности.

117. Пункция лимфатического узла

Производится при подозрении на сифилис в серонегативный первичный период в случаях,

когда   при   исследовании   тканевой   жидкости   поверхности   шанкра   не   выявлены   бледные

трепонемы   или   когда   из-за   фимоза   исследование   ее   невозможно.   Данную   манипуляцию

производят также у тех больных, у которых к моменту обращения их к врачу наступила

эпителизация эрозивного шанкра.

Исследуют регионарный склераденит, кожу над которым обрабатывают раствором йода

спиртовым   5%.   Затем   шприцем   емкостью   2   или   5   мл   с   хорошо   притертым   поршнем   и

короткой толстой иглой делают прокол в центре бубона по его длинной оси на глубину 1-1,5

см.   Производят   энергичный   массаж   узла   с   постепенным   извлечением   из   него   иглы   и

поднятием поршня.

Некоторые авторы рекомендуют предварительно вводить в исследуемый лимфатический

узел 0,1-0,2 мл изотоничеокого раствора натрия хлорида. Если игла была введена правильно,
то в пупктате должны быть лимфоциты.

Взятую таким способом жидкость исследуют под микроскопом темпом поле зрения (см. №

68).

При наличии сифилиса и правильной технике выполнения пункции бледную трепонему

обнаруживают в 80-85 % случаев.

118. Пункция поясничная

Пункция поясничная, или взятие спинномозговой жидкости, является малым оперативным

вмешательством   и   поэтому   должна   проводиться   в   условиях   строгого   соблюдения   правил

асептики   и   антисептики.   Для   ее   проведения   необходимо   иметь   стерильный   материал:

салфетки,   шарики   из   ваты,   раствор   Люголя,   этиловый   спирт   96   %,   пинцет   или   палочки,

клеол,   специальные   простерилизованные   кипячением   пункционные   иглы   с   мандренами.

Диаметр иглы 1,5-0,4  мм,  длина-8-12 см. Лучше пользоваться иглой диаметром 0,5-0,6  мм,

что   уменьшает   травматичность   процедуры.   Поясничную   пункцию   делают   в   положении

больного сидя или лежа. Мы считаем более удобным первый вариант. Подле обнаженного

больного   усаживаются   на   край   стола   или   лучше   на   высокую  тумбочку.   Под   ноги   ставят

высокий табурет с таким расчетом, чтобы колени были максимально приближены к животу.

Больного просят сжать руки на животе, голову наклоняют  вперед так, чтобы подбородок

касался груди, при этом спина выгибается в виде дуги, туловище должно быть наклонено

вниз.   При   таком   положении   остистые   отростки   позвонков   максимально   раздвигаются,

оставляя место для введения иглы. Место прокола выбирают между IV и V или III и IV

поясничными позвонками. Палочкой с намотанной на ее конец ватой, смоченной растворе

Люголя,   проводят   горизонтальную   линию,   соединяющую   внешние   края   гребней

подвздошных   костей   (линия   Якоби).   Пересечение   этих   линий   с   вертикальной   линией,

проходящей через середину остистых ростков, и будет соответствовать месту прокола (рис.

15). При пальпации выявляют незначительное западение. В этом месте ставят знак в виде

креста   (место   прокола).   Врач   тщательно   моется   с   мылом,   высушивает   стерильными

тампонами,   смазывает   раствор   Люголя   и   тщательно   протирает   этиловым   спиртом.   Кожу

больных смазывают раствором Люголя или раствором йода спиртовым 5 %, потом энергично

протирают этиловым спиртом и высушивают стерильным марлевым тампоном. Внутрикожно

вводят до образования лимонной корки 0,5-1 мл 1 % раствора новокаина с целью анестезии,

особенно больным с лабильной нервной системой. Через 1-2 мин пункционную иглу вводят

непосредственно под остистый отросток IV поясничного звонка по средней линии, медленно

продвигая   ее   вперед   и   несколько   вверх.   Правой   руке   врача,   которая   является   как   бы

направляющей, помогает левая, проталкивая иглу вперед. Продвинув иглу на 4-5 см врач

ощущает небольшой хруст (прокол желтой связки), после этого извлекает мандрен, и из иглы

начинает вытекать спинномозговая жидкость. В норме она прозрачная, вытекает каплями,

которые   можно   сосчитать.   Если   жидкость   вытекает   струёй,   то   это  свидетельствует   о  по-

вышенном давлении в спинномозговом канале. 3-4 мл жидкости собирают в две стерильные

пробирки   и   направляют   в   лабораторию   на   исследование.   Ватой,   смоченной   этиловым

спиртом, придерживают кожу у основания иглы и медленными винтообразными движениями

извлекают ее.  Место  прокола   смазывают  раствором  йода  спиртовым  5 %  и накладывают

стерильную коллоидную повязку.

После пункции больного осторожно укладывают в горизонтальном положении в постель

животом вниз и не разрешают двигаться в течение 3-4 ч. Затем можно поворачиваться в

постели, желательно не вставать в течение суток. Больным с лабильной нервной системой

дают   седативные   препараты   (хлозепид,   или   элениум,   триоксазин,   препараты   брома,

валерианы).   С   целью   профилактики   возможных   осложнений   -   раздражения   мозговых

оболочек   -   в   последующие   2-3   дня   внутривенно   вводят   5-10   мл   40   %   раствора

гексаметилентетрамина (уротропина). 

Исследование   спинномозговой   жидкости   является   необходимым   условием   для

правильной   диагностики,   выбора   тактики   лечения   и   оценки   его   эффективности   при

сифилисе. К сожалению, многие врачи недооценивают практическую важность этого метода.

В спинномозговой жидкости определяют содержание белка (норма-до 0,4%), подсчнтывают

количество   форменных   элементов   (норма   -   менее   8   клеток),   проводят   реакции:   Нонне-

Апельта и Панди (норма ++), одну из коллоидных (лучше с золота хлоридом), Вассермана в

разведениях   при   наличии   в   пробирке   2,5   мл   жидкости.   По   возможности   ставят   реакцию

иммунофлюоресценции   (РИФ)   и   реакцию   иммобилизации   бледных   трепонем   (РИБТ).

Реакцию   Вассермана   (с   кардиолипиновым   и   кардиолипидным   антигенами),   РИФ   и   РИТ

проводят общепринятыми метод (см. № 119, 121, 123, 124).

119. Реакции Панди и Нонне - Апельта

В качестве реактива для проведения реакции Панди нспользуют надосадочную прозрачную
жидкость, которую получают при сильном взбалтывании 100 г жидкой карболовой кислоты с
1000 мл дистиллированной воды. Для получения осадка и прозрачной жидкости (реактив)
данную смесь помещают сначала на 3-4 ч в термостат, а затем 2-3 часа выдерживают при
комнатной температуре.

Часовое или предметное стекло кладут на темную бумагу и носят на него 2-3 капли реактива,

затем  каплю спинномозговой жидкости. При помутнении капли или появлении нитевидной

мути по периферии реакцию считают положительной.

Для проведения реакции Нонне - Апельта необходимы чистые пробирки, насыщенный

раствор  аммония  сульфата,  дистиллированная   вода, темная  бумага.  Насыщенный   раствор

аммония сульфата готовят следующим образом: в колбу емкостью 1000 мл помещают 0,5 г

химически   чистого   нейтрального   аммония   сульфата,   затем   наливают   100   мл

дистиллированной воды, подогретой до 95 °С, взбалтывают до полного растворения соли и

оставляют   на   несколько   дней   при   комнатной   температуре.   Спустя   2-3   дня   раствор

фильтруют и определяют рН - реакция должна быть нейтральной.

В пробирку наливают 0,5-1 мл полученного раствора и осторожно по стенке пробирки

добавляют   такое   же   количество   спинномозговой   жидкости.   Через   3   мин   оценивают

результат. Появление беловатого кольца свидетельствует о положительной реакции. Затем

содержимое   пробирки   взбалтывают,   определяют   степень   помутнения,   сравнивая   с

пробиркой, содержащей дистиллированную воду. Результаты реакции оценивают на фоне

черной бумаги.

120. Реакция Борде - Жангу

Ценный   диагностический   тест   при   выявлении   хронической   гонореи   среди   лиц,

страдающих хроническими воспалительными заболевания мочеполовой системы. По данным

литературы, при правильном использовании этого метода выявляют до 80 % случаев гонореи,

не обнаруженной бактериоскопическим или бактериологическим методом.

Реакция   Борде   -   Жангу   может   быть   следовой   в   результате   перенесенного   ранее

заболевания или применения гоновакцины с диагностической (иммунобиологический метод

провокации),   а   также   лечебной   (лечение   хронических   воспалительных   процессов

мочеполовой   системы   у   женщин   по   Бакшееву)   целью.   Поэтому   перед   ее   проведением

необходимо тщательно собрать анамнез.

Реакция   может   быть   и   ложноположительной   при   введении   молока,   использовании   в

лечебных целях пирогенала.

Следовательно,   положительная   реакция   Борде   -   Жангу   не   служит   бесспорным

доказательством   наличия   гонококковой   инфекции,   как   и   отрицательная   не   может   быть

свидетельством   отсутствия   гонореи.   Однако   положительные   результаты   ее   в   течение

длительного   времени   должны   нацелить   врача   на   поиск   очага   гонококковой   инфекции   в

организме.

В качестве антигена используют убитую гонококковую культуру, содержащую 3-4 млрд.

микробных тел в 1 мл. Гонококковый антиген консервируют раствором формальдегида и

разливают в ампулы по 1- 5 мл. Не вскрытые ампулы пригодны в течение 6 мес, вскрытые

можно сохранять 2-3 дня в стерильной пробирке в холодильной камере при температуре 3-5

°С,

Реакцию   связывания   комплемента   Борде   -   Жангу  проводят   аналогично   реакции

Вассермана (см. № 121). Гонококковый антиген разводят изотоническим раствором натрия

хлорида   соответственно   указанному   на   этикетке   ампулы   титру.   Реакцию   проводят   чаще

всего в объеме 2,5 мл, поэтому к 0,5 мл разведенной 1 : 5 испытуемой сыворотки добавляют

в каждую пробирку по 0,5 мл разведенного антигена. Остальные 1,5 мл составляют 1 мл

гемолитической системы и 0,5 мл комплемента.

Реакцию считают положительной при наличии выраженной в разной степени задержки

гемолиза   в   испытуемой   сыворотке.   В   контроле   (сыворотка   крови   здоровых   людей)

наблюдается полный гемолиз.

121. Реакция Вассермана

В сыворотке крови больных сифилисом находятся реагины и антитела. Реагины обладают

свойством вступать в соединения с кардиолипиновым антигеном. Специфические антитела

против   бледной   трепонемы   вступают   в   соединение   со   специфическими   антигенами.

Образовавшиеся   комплексы   антиген   -   антитело   сорбируют   добавляемым   в   реакцию

комплементом.   Индикацию   производят   путем   введения   гемолитической   системы

(эритроциты барана + гемолитическая сыворотка).

Для проведения реакции требуются:

а) изотонический раствор натрия хлорида;

б)  ультраозвученный  трепонемный   (хранят   в  холодильнике   при  температуре  +4  °С)  и

кардиолипиновый (хранят при комнатной температуре) антигены;

в) комплемент, представляющий собой сыворотку крови, полученную при пункции сердца

5-10 здоровых гвинейских свинок. Может сохраняться в холодильнике в течение 2 мес при

условии консервирования 4 % раствором борной кислоты и 5 % раствором натрия сульфата;

г)   гемолизин   -   гемолитическая   сыворотка   крови   кролика,  иммунизированная

эритроцитами барана с разными титрами (хранят в xолодильнике при температуре 4 °С);

д)   эритроциты   барана,   получаемые   пункцией   яремной   вены.   Kровь   собирают   в

стерильную банку со стеклянными  шариками  (для перемешивания),  встряхивают  15 мин.

Сгустки фибрина отделяют фильтрованием через стерильную марлю. Дефибринированную

кровь можно хранить в холодильнике до 5 сут.

Иногда возникает необходимость более длительного хранения крови барана, в связи с чем

ее консервируют специальным консервантом (6 г глюкозы, 4,5 г кислоты борной, 100 мл

изотонического раствора натрия хлорида), который кипятят на водяной бане по 20 мин в

день   в   течение   3   сут.   На   100   мл   дефибринированной   крови   барана   требуется   15   мл

консерванта.   Консервированную   таким   образом   дефибринированную   кровь   хранят   в

холодильнике.

Проведению основного опыта предшествует несколько этапов.

1. У больного из локтевой вены берут 5-10 мл крови и обрабатывают сыворотку. У детей

кровь можно взять из височной вены или разреза на пятке. Пункцию делают стерильными

или одразовыми инструментами,  многоразовые  шприц и иглу предварительно промывают

изотоническим раствором натрия хлорида.

Кровь для исследования берут натощак; за 3-4 дня до исслевания больному запрещают

употреблять наркотические средства, препараты наперстянки, принимать алкоголь.

Не следует проводить исследование у больных с повышенной температурой тела, после

травмы, операции, наркоза, перенесенных недавно инфекционных заболеваний, у женщин во

время менструации, у беременных (в последние 10 дней беременности), рожениц (в первые

10 дней после родов), а также новорожденных (в первые 10 дней жизни).

Полученную   кровь   в   стерильной   пробирке   помещают   на   15-30   мин   в   термостат   при

температуре   37   °С.   Образовавшийся   сгусток   отделяют  от   стенок   пробирки   стерильной

стеклянной   палочкой   и   ставят   в   холодильник   на   сутки.   Отделившуюся   прозрачную

сыворотку над сгустком отсасывают пастеровской пипеткой с помощью резиновой груши,

осторожно   сливают   в   другую   стерильную   пробирку   и   инактивируют   на   водяной   бане   в

течение 30 мин при температуре 56 °С. Приготовленную таким образом для опыта сыворотку

можно хранить в холодильник 5-6 дней.

2. Антигены разводят соответственно способу и титру, указанному па этикетке.
3. Приготавливают гемолитическую систему. Для этого дефибринизированную кровь или

эритроциты барана в количестве, необходимом для проведения реакции, центрифугируют,
плазму осторожно отделяют, а осадок промывают 5-6 объемами изотонического раствора
натрия хлорида до тех пор, пока надосадочная жидкость не станет совершенно бесцветной.
Из осадка  готовят 3 % взвесь эритроцитов в изотоническом  растворе натрия  хлорида по
утроенному титру.

Раствор гемолитической сыворотки и взвесь эритроцитов барана быстро смешивают и

помещают в термостат на 30 мин.

4. Сухой комплемент разводят изотоническим раствором натрия хлорида в пропорции

1:10, нормальную инактивированную сыворотку человека - 1:5.

Комплемент титруют в 30 пробирках, помещенных в штатив по 10 пробирок в 3 ряда. В

двух   рядах   его   титруют   в   присутствии   двух   антигенов,   в   третьем   -   с   изотоническим

раствором   натрия   хлорида.   Пять   пробирок   являются   контрольными:   две   для

соответствующих двух антигенов и по одной - для контроля комплемента, гемолитической

сыворотки и изотонического раствора натрия хлорида на гемотоксичность;

Пробирки   помещают   на   45   мин   в   термостат,   после   чего   их   проверяют.   Гемолиза   не

должно быть ни в одной пробирке.

Комплемент в разведении 1:10 разливают в 10 пробирок 1-го ряда штатива в дозах: 0,1,

0,16, 0,2, 0,24, 0,3, 0.36, 0,4, 0,44, 0,5 и 0,55 мл. К содержимому каждой пробирки добавляют

изотонический раствор натрия хлорида до 1 мл и тщательно перемешивают. По 0,25 мл смеси

из каждой пробирки переносят в соответствующие пробирки 2-го и 3-го рядов. Штатив с