Том 1. Справочник по кожным болезням - часть 61

гуморального иммунитета. Препарат противопоказан при беременности и
резусконфликте.

Включение   миелопида   в   комплексную  терапию   больных   атопи-

ческим дерматитом способствует повышению эффективности лечения и
удлинению сроком клинической ремиссии. 

169

Взаимосвязь 

перекисного окисления липидов 

и активности лизосом 

полиморфноядерных лейкоцитов у больных атопическим

дерматитом

При   аллергическом   воспалении   несомненную   роль   в   деструкции   тканей

играют процессы перекисного окисления липидов [1—4]. Основным моментом,
инициирующим перекисное окисление липидов, являются механизмы генерации
активных   форм   кислорода.   В   организме   существует   два   разных   источника
активных кислородных метаболитов    радикальные окислительные реакции и
металлопротеиновые ферментные системы [7].

Активные   метаболиты   кислорода   в   металлопротеиновых   ферментных

системах   (NADPH-оксидазная   и   миелопероксидазная)   продуцируются
фагоцитирующими   клетками,   в   частности   нейтрофилами   [6, 7].

 

NADPH-оксидаза   является   ферментативным   комплексом,   связанным   с
мембраной, в то время как  миелопероксидаза относится к маркерным белкам
азурофильных   гранул   нейтрофилов   и   зависит   в   своем   функционировании   от
перекиси   водорода.   Оба   фермента   действуют   кооперативно,   формируя
кислородзависимую биоцидность нейтрофилов [6]. В свою очередь биоцидность
нейтрофилов   определяется   не   только   кислородзависимыми   факторами,   но   и
кислороднезависимыми, что связано с функциональной активностью лизосом.
Одной из отличительных особенностей лизосом является «структурно-связанная
латентность», т. е. ограничение доступа подлежащих деградации субстратов к
соответствующим   ферментам   при   сохранении   целостности   мембранного
барьера.   Другая   важная   особенность    высокая   чувствительность   и
реактивность   лизосом,   благодаря   чему   последние,   в   зависимости   от   условий,
могут   служить   либо   мощным   инструментом   адаптивной   перестройки
метаболизма   и   ультраструктур   клеток,   либо   ее   повреждения   [8].   О   влиянии
процессов   перекисного   окисления   липидов   при   атопическом   воспалении   на
реактивность лизосомального аппарата сведения немногочисленны [3].

Известно,   что   в   лизосомах   наблюдается   низкий   уровень   собственного

перекисного   окисления   липидов,   но   при   этом   чувствительность   лизосом   к
«чужим» перекисям чрезвычайно высока [8].

Учитывая   тот   факт,   что   лизосомы   проявляют   высокую   активность   при

атопическом воспалении  [5],  целью  нашей  работы явилось  изучение влияния

170

процессов   перекисного   окисления   липидов   на   лабилизацию   лизосомальных
гранул при атопическом дерматите у детей в динамике заболевания.

Материалы и методы

Под наблюдением находилось 72 больных, средний возраст —9,70,25 лет,

страдающих   атопическим   дерматитом.   Тяжесть   клинических   проявлений
атопического   дерматита   оценивали   на   основании   международной   системы
SCORAD: выделили детей с выраженными (51) (67,71,05 балла) и умеренными
(21) проявлениями (30,81,3 балла) заболевания. Наследственная отягощенность
была выявлена у 46 (63,8%) детей, в основном (36—78,3%) это были дети с
выраженными   проявлениями   атопического   дерматита.   Для   подтверждения
аллергического   заболевания   реагинового   типа   у   всех   больных   определяли
содержание в сыворотке общего Ig Е иммуноферментным методом; содержание
его в сыворотке крови составило 443,632,1 МЕ/мл. Наблюдение за детьми вели
в   динамике   заболевания   на   фоне   традиционного   лечения,   включающего
базисную   терапию,   элиминационные   и   симптоматические   мероприятия,
наружные   методы   лечения.   Группу   контроля   составили   20 здоровых   детей
близких по полу и возрасту.

Перекисное   окисление   липидов   оценивали   по   спектрофотометрическому

измерению малонового диальдегида в реакции с тиобарбитуровой кислотой.

О   функциональной   активности   лизосомального   аппарата   нейтрофильных

гранулоцитов   судили   по   относительному   содержанию   дифенсинов
цитохимическим   методом   —   лизосомально-катионный   тест   (ЛКТ).   Средний
цитохимический

 

коэффициент

 

вычисляли

 

по

 

формуле:

СЦК=(3а+2б+1,5в+1,0г+0,5д+0е)/100, где а–е — количество однотипных клеток
с определенной степенью окрашивания цитоплазмы прочным зеленым, а цифры
0-3 — степень интенсивности окрашивания, 100 — количество нейтрофилов в
одном   мазке.   Кроме   среднего   цитохимического   коэффициента   выделяли
количество нейтрофилов с низким (0-0,5 — степень интенсивности окрашивания
цитоплазмы),   средним   (1-1,5   —   степень   интенсивности   окрашивания
цитоплазмы)   и   высоким   (2-3   —   степень   интенсивности   окрашивания
цитоплазмы) содержанием катионных белков (Пигаревский, 1979). Активность
маркерных лизосомальных ферментов (кислой фосфатазы по  De  Duve C., 1955,
кислой ДНК-зы, катепсина D по A. J. Barrett, 1972) оценивали в плазме крови.

Результаты исследований и их обсуждение

Период обострения атопического дерматита характеризовался выраженными

нарушениями   перекисного   гомеостаза.   Содержание   малонового   диальдегида
превышало   контрольные   значения   в   2 раза.   По   мере   стихания   клинических
проявлений   уровень   перекисного   окисления   липидов   уменьшался   и   достигал
контрольных значений к периоду ремиссии (табл. 1).

171

Таблица 1

Динамика перекисного окисления липидов при атопическом дерматите

Период

обострения

n=72

Cтихание

обострения

n=41

Ремиссия

n=29

Контроль

n=20

Малоновый 
диальдегид, 
мкМоль/л

10,60,4*

8,50,46*

6,010,4

5,30,58

Примечание. * — р0,001.

Не   у   всех   больных   в   динамике   заболевания   мы   наблюдали

однонаправленные изменения в содержании малонового диальдегида в плазме
крови.   Так,   у   5 больных   в   период   стихания   клинических   проявлений
атопического   дерматита   уровень   перекисного   окисления   липидов   оставался
таким   же,   как   в   период   обострения.   Не   происходило   нормализации   этого
показателя и к периоду ремиссии (8,81,02 мкМоль/л, р0,01). Ремиссия у этих
больных   была   непродолжительной,   заболевание   характеризовалось   частыми
обострениями (3-4 раза в год).

Почти у трети больных (21) в период выраженных клинических проявлений

показатели   перекисного   окисления   липидов   превышали   среднегрупповые
значения   —   13,40,5 мкМоль/л   (р0,001),   что   соответствовало   тяжелому
течению   атопического дерматита  (SCORAD  69,96,4 балла)  и  имело  прямую
корреляционную связь (r=0,63).

Обращая   внимание   на   высокие   показатели   малонового   диальдегида   на

остроте аллергического воспаления, представляло интерес изучение взаимосвязи
между   уровнем   метаболитов   перекисного   окисления   липидов   и
кислороднезависимой биоцидностью полиморфноядерных лейкоцитов.

Период   обострения   атопического   дерматита   характеризовался   высокой

активностью   лизосомальных   ферментов,   так   активность   кислой   фосфатазы
превышала   контрольные   значения   в   2,5 раза,   кислой   ДНК-зы   в   1,6 раза,
катепсина

 D 

в   1,8 раза   (р0,001),   что   подтверждает   вовлечение

полиморфноядерных лейкоцитов в аллергическое воспаление (табл. 2).

Параллельно   наблюдалась   прямая   корреляционная   связь   между   уровнем

перекисного   окисления   липидов   и   активностью   лизосомальных   ферментов.
Наиболее   сильная   корреляционная   связь   (r=0,73)   существовала   у   кислой
фосфатазы,   средняя   (r=0,42)   у   катепсина  D  и   слабая   (r=0,22)   у   ДНК-зы,   что
помогает  понять  один из механизмов включения лизосомальных ферментов в
аллергическое воспаление и подтверждает лабилизирующий лизосомы эффект
со   стороны   метаболитов   перекисного   окисления   липидов.   При   стихании

172

клинических   проявлений   корреляционная   зависимость   ослабевала   (кислая
фосфатаза — r=0,19) и исчезала (кислая ДНК-за и катепсин D).

Таблица 2

Активность лизосомальных ферментов плазмы крови 

в период обострения атопического дерматита (мМоль/л-час)

Кислая 

фосфатаза

Кислая 

ДНК-за

Катепсин D

Атопический дерматит 
(n=72)

45,352,0***

34,431,82***

11,680,65***

Контроль (n=20)

18,631,45

20,961,17

6,40,6

Примечание. *** — р0,001

Взаимосвязь между лизосомальной активностью и перекисным окислением

липидов   наблюдалась   и   в   период   ремиссии   (r=0,65),   несмотря   на   то,   что
активность   лизосомальных   ферментов   снижалась   —   кислая   фосфатаза   —
р0,001,   катепсин  D  —   р0,01,   а   уровень   перекисного   окисления   достигал
значений   контроля,   что   отражает   некую   динамическую   систему   равновесия
между сравниваемыми показателями.

Процесс   дегрануляции,   которому   подвергаются   и   полиморфноядерные

лейкоциты,   является   отличительной   особенностью   острого   периода
аллергического воспаления. На это указывает снижение среднего цитохимического

коэффициента (СЦК=1,00,03 против 1,470,01 в группе контроля). Параллельно
уменьшается   в   2,4 раза   количество   нейтрофилов   с   высоким   содержанием

173

24,5

68,5

7,14

3,1

79,8

17,1

0

20

40

60

80

100

1

2

3

%

Атопический дерматит n=72

Контроль n=20

Рис.1. Распределение нейтрофилов по относительному содержанию

лизосомальных катионных белков в период обострения

атопического дерматита

1 – низкое содержание КБ; 2 – среднее содержание КБ; 

3 – высокое содержание КБ

катионных белков и увеличивается процент полинуклеаров с низким содержанием
дифенсинов (рис. 1).

Среди   механизмов,   индуцирующих   дегрануляцию,   можно   считать

активацию процессов перекисного окисления липидов, т.к. в период обострения
атопического дерматита регистрировалась  обратная корреляционная  связь  (r=-
0,58)   между   уровнем   малонового   диальдегида   и   количеством   нейтрофилов   с
высоким содержанием катионных белков.

По   мере   стихания   клинических   проявлений   атопического   дерматита

наблюдалась не только достоверное (р0,05) снижение процессов перекисного
окисления   липидов,   но   и   уменьшение   дегрануляции   нейтрофилов.   Это
выразилось   в   снижении   количества   нейтрофилов   с   низким   содержанием
катионных  белков (р0,001), повышении  количества  нейтрофилов со средним
содержанием дифенсинов (р0,05) и уменьшении корреляционной связи между
активностью   перекисного   окисления   липидов   и   количеством   нейтрофилов   с
высоким   уровнем   дифенсинов   (r=-0,31),   что   не   противоречит   стиханию
аллергического   воспаления,   когда   процесс   дегрануляции   нейтрофилов
уменьшается, но сохраняется на уровне более высоком, чем в группе контроля.
При   этом   прямая   корреляционная   зависимость   (г=0,38)   между   уровнем
перекисного   окисления   липидов   и   количеством   нейтрофилов   с   низким
содержанием катионных белков, а также обратная связь (r=-0,29) с количеством
нейтрофилов   со   средним   содержанием   дифенсинов   говорит   об   истощении
биоцидных   свойств   и   снижении   резерва   реактивности   полиморфноядерных
лейкоцитов.

К   периоду   ремиссии   атопического   дерматита   уровень   малонового

диальдегида не отличался от контроля, регистрировалось повышение среднего
цитохимического   коэффициента   (р0,001),   при   этом   корреляционная   связь
между   этими   показателями   утрачивалась.   На   стабилизацию   в   течении
хронического аллергического воспаления указывает и тот факт, что взаимосвязь
процессов перекисного окисления липидов и уровня дегрануляции становилась
менее прочной (r=-0,21 — с количеством нейтрофилов с высоким содержанием
дифенсинов,  r=-0,48   —   с   количеством   нейтрофилов   с   низким   содержанием
катионных   белков),   но   при   этом   сохранялась   высокая   чувствительность   к
метаболитам   перекисного   окисления   липидов   (r=0,42 с   количеством
нейтрофилов со средним уровнем дифенсинов) и имел место дефицит резерва
биоцидности   лейкоцитов,   на   что   указывает   повышение   среднего
цитохимического   коэффициента   только   за   счет   нейтрофилов   со   средним
содержанием катионных белков.

Таким образом полученные результаты свидетельствуют о лабилизирующей

роли метаболитов перекисного окисления липидов по отношению к лизосомам, о
чем   свидетельствует   прямая   корреляционная   связь   между   активностью
лизосомальных   ферментов,   уровнем   дегрануляции   на   высоте   аллергического

174

воспаления и показателями  малонового диальдегида. Перекисный  метаболизм
липидов   и   степень   активации   кислороднезависимых   факторов   нейтрофилов
являются соразмерными на протяжении всех периодов заболевания и отражают
некую саморегулирующуюся динамическую систему равновесия.

Уровень   метаболической   активности   процессов   пероксидации   липидов

коррелирует   с   тяжестью   течения   атопического   дерматита,   что   может   иметь
прогностическое значение для оценки полноты ремиссии атопического процесса.

Влияние 

персистирующей вирусной инфекции 

на течение атопического дерматита

Аллергические   заболевания   на   сегодняшний   день   являются   одной   из

основных проблем медицины. Частота патологии имеет тенденцию к росту, в том
числе отмечается повышение показателей смертности среди больных с такими
заболеваниями как бронхиальная астма, анафилактический шок.

В   последние   годы   в   развитии   аллергических   заболеваний   ведущую   роль

отводят   инфекционным   агентам.   Среди   них   наиболее   дискутабельна   роль
вирусов   в   возникновении   атопии.   Поскольку,   с   одной   стороны,   имеются
многочисленные   клинические   наблюдения,   касающиеся   обострений   на   фоне
вирусной инфекции, с другой — отмечается выраженный реагиновый ответ на
инфекцию, вызванную вирусом Эпштейна-Барр [1, 3]. Вирусная инфекция, как
полагают, не только триггерный фактор, приводящий к учащению обострений и
утяжелению течения атопических заболеваний, но и возможно, самостоятельная
причина атопии на фоне наследственной предрасположенности. Ермакова М. К.,
Федорова О. Е., Сильм, Эрик (1986) наблюдали обострение аллергодерматозов
на фоне ОРВИ.

Один   из   механизмов   указанного   может   быть   связан   со   снижением

супрессорной функции Т-клеток на фоне вирусной инфекции, что способствует
пролиферации В-лимфоцитов и плазмоцитов, ответственных за выработку  Ig  Е
[2, 4].

При   этом   считается,   что   риск   развития   атопических   заболеваний   связан

прежде всего с длительным сохранением вируса в организме, поэтому особого
внимания   требуют   персистирующие   вирусы.   Актуальность   изучения   вирус-
индуцированных   аллергических   заболеваний   обусловливается   массовостью
поражения,   быстрым   распространением   вирусных   инфекций.   Все   это   служит
мотивационной основой пристального внимания ВОЗ и систем здравоохранения
различных   стран   к   проблеме   роли   вирусов   в   развитии   атопии,   что   позволит
усовершенствовать   диагностику,   разработать   адекватные   методы   их
профилактики и лечения.

175

Цель  настоящего   исследования   —   установление   распространенности

атопического дерматита у жителей промышленного города и определение роли
персистирующей вирусной инфекции в его формировании.

Материалы и методы

У больных атопическим дерматитом определены: противовирусные антитела

Ig  M,  Ig  G  (к вирусу простого герпеса 1, 2, 6 типа, цитомегаловирусу, вирусу
Эпштейна-Барр);   общий   уровень  Ig  E  иммуноферментным   методом;
специфические фрагменты ДНК вирусов методом пролимеразно-цепной реакции
(ПЦР).

Результаты и их обсуждение

В   проведенном   обследовании   жителей   крупного   промышленного   города

(г. Уфа) установлено наличие аллергических заболеваний у 15013,1 человек на
1000 населения. В структуре аллергических заболеваний атопический дерматит
составляет 13,51,7%. Среди этиологических факторов атопического дерматита
установлена   сенсибилизация   к   пищевым   продуктам,   средствам   косметики   и
бытовой   химии,   производственным   аллергенам.   У   всех   лиц   с   обострением
атопического дерматита уровень общего IgЕ был повышен и в среднем составлял
917,919,3 МЕ/мл. Специфические  Ig  Е определялись к пищевым, пыльцевым
аллергенам.

В 100% случаев при атопическом дерматите выявлены противовирусные  Ig

G  антитела к цитомегаловирусу и в 75% случаев к вирусу простого герпеса. В
25%   случаев   были   определены   антитела   к   вирусу   герпеса   6 типа.   При   этом
отмечена  прямая  корреляционная  зависимость  между уровнем  общего  Ig  Е  и
титром противовирусных антител. Титры противовирусных антител превышали
контрольный   уровень   в   6—8 раз.   Для   уточнения   роли   вирусной   инфекции   в
развитии   атопического   дерматита   определялись   методом   ПЦР   специфические
фрагменты ДНК вирусов Эпштейна-Барр, простого герпеса и цитомегаловируса.
В случаях атопического дерматита обнаружены специфические фрагменты ДНК
цитомегаловируса и простого герпеса в 75%, при этом отмечалось их сочетание.
ДНК—фрагменты вируса Эпштейна-Барр у лиц с атопическим дерматитом не
обнаружены.

Таким   образом,   герпетическую   и   цитомегаловирусную   инфекцию   можно

рассматривать   как  триггерный   фактор,  приводящий  к  учащению  рецидивов  и
утяжелению течения атопического дерматита.

Л И Т Е РА Т У РА

176