Лабораторные методы исследования в клинике (Меньшиков В.В.) - часть 82

Т а б л и ц а 50. Классификационная схема

семейства энтеробактерий '. По кн.: Определи-

тель бактерий Берги. Изд. 8-е, 1974

' Bergey's  m a n u a l of determinative bacterio-

logy — 8th ed — Baltimore: The Williams,

W i l k i n s Company, 1974— 1268 p.

Особенности ферментации субстратов много-

компонентных сред представлены в табл. 52,

позволяют ориентировочно определить трибу,

род энтеробактерий.

Вид выделенных культур устанавливают в

соответствии с минимальным набором тестов,

которые четко дифференцируют внутриродовые

различия энтеробактерий (табл. 53—56).

Для ускорения идентификации можно при-

менить системы индикаторных бумажек (СИБ),

выпускаемые Горьковским НИИЭМ МЗ

РСФСР (Методические рекомендации по приме-

нению СИБ для идентификации энтеробактерий,

1982). Для уточнения видовой (групповой)

принадлежности культур их изучают в реакции

агглютинации на стеклес поливалентными агглю-

тинирующими сыворотками. Сероварианты энте-

робактерий определяют в реакции агглютинации

с наборами О, Vi, H, К монорецепторных сыво-

роток.

7.4.2. Грамотрицательные аэробные

и факультативно-анаэробные мелкие

палочки и коккобациллы

Р о д  г е м о ф и л о в (Haemophilus) объеди-

няет мелкие грамотрицательные палочки, не рас-

тущие на простых питательных средах. Среди

7 видов рода гемофилус (H. parainfluenzae,

H. aphrophilus, H. ducreyi, H.  i n f l u e n z a e и др.),

которые выделяют при болезнях человека, наи-

больший удельный вес принадлежит палочке

инфлюэнцы (Haemophilus  i n f l u e n z a e ) .

Характерной особенностью представителей

данного рода является их требовательность для

своего культивирования в факторах роста крови

X (гемин) и V (NAD).

Для выделения и культивирования гемофи-

лов применяют питательные агары с высоким

(1,6 г/л) содержанием аминного азота и 8—

10 % нативной или гретой крови животных или

человека.

Оптимальной средой является шоколадный

агар. При использовании для него лошадиной

крови среду прогревают в водяной бане

при 75 °С до шоколадного цвета, человеческой

крови — не менее 30 мин. При исполь-

зовании дефибринированной кроличьей

крови прогревание среды ограничивается 5—

6 мин при 80 °С. Рост культуры значительно

улучшается, если создать повышенную (10 %)

концентрацию СО2 (культивирование «со све-

чой»).

На плотных средах с нативной кровью гемо-

филы растут в виде очень мелких (^ 0,5 мм

в диаметре) прозрачных колоний. На шоколад-

ном агаре образуются более крупные, полупро-

зрачные, нежные, сочные колонии диаметром

0.5—2 мм. Выросшие колонии гемофилов легко

снимаются со среды. При росте на шоколадном

агаре палочка инфлюэнцы обладает «мыши-

ным» запахом, что является характерным свой-

ством этого вида микробов. При росте H.  i n f l u -

enzae на плотных питательных средах можно

наблюдать: слизистые колонии — круглые, рых-

лые, сочные, сероватые, ирригирующие при про-

смотре в косопроходящем свете (М-формы);

в мазках, окрашенных по Граму, видны мелкие

короткие грамотрицательные палочки; при окра-

ске мазка тушью по Гинсу выявляется хороню

выраженная капсула; круглые, гладкие, полу-

прозрачные неирризирующие колонии (S-фор-

ма); в мазках— мелкие грамотрицательные

палочки, капсула выражена слабо или отсут-

ствует.

После микроскопирования подозрительные

колонии отсевают на шоколадный агар для про-

ведения дальнейшей идентификации культур по

биохимическим тестам.

Основные свойства видов и их дифференциа-

ция приведены в табл. 57.

Серологический анализ H.  i n f l u e n z a e прово-

дят по капсульному антигену, по которому их

подразделяют на 6 серологических вариантов:

а, Ь, с, d, e, f. Для такого исследования исполь-

зуют поли- и моновалентные диагностические

сыворотки в реакции агглютинации на стекле.

327

Триба

Escherichieae

K l e b s i e l l e a e

Proteae

Y e r  s i  n i e a e

Род

1. Escherichia

2. Edwardsiella

3. Citrobacter

4. Salmonella

5. Shigella

1. Klebsiella

2. Enterobacter

3. Hafnia

4. Serratia

1. Proteus

1. Yersinia

Вид (подрод)

E. coli

E. tarda

C. freundii

C. intermedius

Подрод I

Подрод II

(S. salamae)

Подрод III

(S. arizonae)

Подрод IV

(S. houtenae)

S. dysenteriae

S. flexneri

S. boydii

S. sonnei

K. pneumoniae

K. rhinosclero-

matis

K. ozaenae

E. cloacae

E. aerogenes

H. alvei

S. marcescens

P. vulgaris

P. mirabilis

P. morganii

P. rettgeri

P. inconstans

Y". pestis

Y. enterocoliiica

Y. pseudotu-

ilosis

Т а б л и ц а 53. Внутриродовая дифференциа-

ция рода Klebsiella

Т а б л и ц а 56. Внутриродовая дифферен-

циация рода Proteus

П р и м е ч а н и я . 1 — разные биовариан-

ты; 2 — замедленно.

Т а б л и ц а 54. Внутриродовая дифференциа-

ция рода Enterobacter

Т а б л и ц а 55. Внутриродовая дифферен-

циация рода Yersinia

Результаты более четкие по Христенсену.

Разные биоварианты.

В патологии человека наибольшее значение име-

ют штаммы инфлюэнцы с капсульным антиге-

ном типа b.

В связи с тем что микроорганизмы, относя-

щиеся к разным родам, вызывают заболевания,

имеющие сходную клиническую картину, и могут

быть обнаружены в том же патологическом

материале, что и гемофилы, возникает необходи-

Тест,

субстрат

Мочеви-

на

И н д о л

H

2

S

Ц и т р а т

по Сим-

м он с у

Желати-

на

Мальто-

за

М а н н и т

О р н и -

ти

 н де -

карбок-

сил а за

Виды

P. mira-

bilis

+

—
+

( + )'

+

—
—

+

P.

  v u l -

garis

+
+
+

±

2

+

+

—

P.

 mor-

ganii

+
+

—

—

—

—
—

+

P.

 ret-

tgeri

+
+

—

+

—

—
+

P.

 in-

con-

stans

—
+

—

+

—

—
— •

П р и м е ч а н и я ,

биоварианты.

— замедленно; 2 — разные

мость в их дифференциальной диагностике. На-

бор ориентировочных тестов представлен в

табл. 58.

Р о д  м о р а к с е л л а (Moraxella) состоит из

7 видов, встречающихся у человека. Иногда

моракселлы являются причиной воспалитель-

ных заболеваний человека — конъюнктивита,

вульвовагинита, менингита, плеврита. Предста-

вители рода моракселла не растут на простых

питательных средах, а требуют добавления

5—10 % крови животных или сыворотки. Коло-

нии крупные, полупрозрачные, гладкие, нежные,

слизистые.

Р о д  а ц и н е т о б а к т е р (Acinetobacter)

представлен 2 видами — A. calcoaceticus и

A. Iwoffii. Эти микроорганизмы могут выде-

ляться из цереброспинальной жидкости и мокро-

ты при заболеваниях нижних дыхательных

путей, бронхоэктатической болезни, конъюнкти-

витах, хронических отитах, со слизистой оболоч-

ки мочеполового тракта. Они обычно хорошо

культивируются на простых питательных средах,

однако при первичном выделении лучше испо-

льзовать среды с добавлением крови или сыво-

ротки. A. calcoaceticus образуют на кровяном

агаре относительно большие (2—3 мм), бело-

ватые, выпуклые, иногда слизистые колонии,

A. Iwoffii — серые, плоские, немного мельче

колонии. 10— 20 % культур дают b-гемолиз.

Микробы рода Moraxella и Acinetobacter при

окраске по Граму имеют форму коротких округ-

лых палочек, часто напоминают кокки, но могут

встречаться самые разнообразные формы кле-

ток, даже нитевидные, располагаются клетки

парами, короткими и длинными цепочками.

330