Раны и раневая инфекция (М.И. Кузин) - часть 97

РАНЫ

И РАНЕВАЯ

ИНФЕКЦИЯ

Рис. 11.3. Продолжение.

лиморфно-ядерных лейкоцитов нахо-
дится в состоянии деструкции. Нами
установлено, что воспалительный

процесс носит пролонгированный ха-
рактер, фазы нагноения и очищения
значительно затянуты. Процесс очи-
щения раны замедлен вследствие
позднего (2—3-я неделя) появления

макрофагальнои реакции и слабой
ее выраженности. Формирование
грануляций также задерживается
как в связи с гетерогенностью про-
цессов, протекающих в мягких тка-
нях, так и вследствие особенностей
развития грануляций (острые микро-
циркуляторные нарушения в капил-

ОСОБЫЕ ВИДЫ
РАНЕВОЙ
ИНФЕКЦИИ

Рис. 11.3. Продолжение.

лярах грануляций, вторичное нагное-

ние их и ранний склероз).

Ввиду того что для выделения и

идентификации неклостридиальной

микрофлоры при бактериологическом

исследовании требуются специальное

оборудование и длительный срок (в

среднем 3—5 сут), в повседневной

хирургической практике для подтвер-

ждения диагноза целесообразно ориен-

тироваться на результаты микроско-

пии мазка, окрашенного по Граму, и

газожидкостной хроматографии. Эти

результаты можно получить в среднем

в течение 1 ч. При диагностике грам-

отрицательных анаэробов совпадение

результатов микроскопии нативного

мазка с результатами бактериологиче-

ских посевов отмечено в 71% наблю-

дений.

При этом практически исключена

возможность получения данных о на-

личии анаэробных кокков, поскольку

их морфология идентична морфоло-

гии аэробных кокков.

При бактериологическом исследо-

вании анаэробные микроорганизмы

обнаружены у 82% больных, что сви-

детельствует о высокой степени кор-

реляции клинической и бактериологи-

ческой диагностики. У остальных

больных с клинически выраженной

картиной неклостридиальной инфек-

ции нри бактериологическом исследо-

вании не удалось выделить анаэроб-

ные бактерии, что связано, вероятно,

с нарушением техники взятия и до-

ставки материала (пунктаты, биоп-

таты).

Острая хирургическая инфекция

мягких тканей с участием неклостри-

диальных анаэробов имеет в основном

полимикробную этиологию (см. гла-

ву 5). Обращают на себя внимание

высокий удельный вес аэробных и

факультативно-анаэробных микроор-

ганизмов (61,6%), а также многоком-

понентность микробных ассоциаций.

Что касается неспорогенных анаэро-

бов, то почти у половины больных

мы также обнаруживали два — три

различных вида этих бактерий. Если

при оценке этиологической роли не-

спорогенных анаэробов основываться

на качественной характеристике мик-

робного пейзажа гнойной раны, то в

42,9% наблюдений при наличии ха-

рактерных клинических симптомов

эта их роль достаточно достоверна.

В тех случаях, когда, помимо некло-

стридиальных анаэробов, в состав

микробной ассоциации входит 2—4 и

даже 5 видов аэробных бактерий, не-

обходимы дополнительные критерии,

позволяющие оценить ведущую роль

анаэробов.

Одним из таких косвенных крите-

риев может служить количественное

содержание аэробных бактерий в ране

(см. главу 5).

11.2.1. Газожидкостная

хроматография

В последние годы установлено, что

анаэробные микроорганизмы в про-

цессе метаболизма продуцируют в

среду роста или в патологически изме-

ненные ткани летучие жирные кисло-

ты — пропионовую, масляную, изо-

масляную, валериановую, изовалериа-

новую и др., в то время как аэробные

микроорганизмы подобных соединений

не образуют [Gottschalk G., 1979;

Chew D. el al., 1982].

Указанные летучие метаболиты мо-

гут быть обнаружены с помощью

газожидкостной хроматографии

(ГЖХ), что подтверждено нами у

больных с абсцессами легких [Ку-

зин М. И. и др., 1983; Шимкевич Л. Л.

и др., 1983]. ГЖХ-анализ в течение

1 ч позволяет получить ответ о нали-

чии анаэробов.

Материалом для исследования могут слу-

жить пунктаты флегмон и абсцессов, патоло-
гически измененные ткани из различных участ-
ков раны, операционный материал после хирур
гической обработки. Приготовление пробы не-
сложно и включает следующие этапы. Полу-

ченный материал тщательно гомогенизируют

(1 мл пробы), добавляют 1 мл изотонического

раствора хлорида натрия, центрифугируют в
течение 15 мин при 3000 об/мин, рН супер-
натанта до 2,0 доводят 50% серной кислотой.
Далее проводят экстракцию эфиром 2 раза по

1 мл. Полученный эфирный экстракт в коли-
честве 2—5 мкл вводят в хроматограф. В наших

исследованиях были использованы газовый

хроматограф «Цвет 106», колонки, заполненные
15% поли-диэтиленсукцинатом (DEGS, фирмы
«Chemapol», Чехословакия), нанесенным на
хромосорб WAW-DMGS (фирмы «Supelco»,
США), изотермический режим 190° С, плаз-
менно-ионизационный детектор, в качестве
газа-носителя азот.

Идентификацию летучих жирных кислот

(ЛЖК) мы осуществляли по относительному

времени удерживания. Для сравнения исполь-
зовали аналитические стандарты (Сз—Се) .жир-
ных кислот. Чувствительность метода 10 г/л.
При идентификации анаэробов пользовались
рабочей таблицей летучих метаболитов | Phil-
lips •!., 1982] и собственными данными

(табл. 11.4). Контроль данных идентификации

микробных метаболитов проводился на системе

для хромато масс-снектрометрического анализа

«Hewlett Packard-5985».

Установлено, что типичные метабо-

литы анаэробов выделены при раневой

инфекции в 63,3%, при флегмонах

ОСОБЫЕ ВИДЫ
РАНЕВОЙ
ИНФЕКЦИИ

Рис. 11.4. Сопоставление хроматограмм летучих жирных кислот (ЛЖК)
у больных с раневой инфекцией и абсцессами легких.

1 — хроматограмма ЛЖК культуры Bacteroides fragilis, высеянных от боль

ного П. Диагноз: анаэробная флегмона левого бедра и голени; 2 — хромато

грамма ЛЖК клинического образца (операционный материал того же боль-

ного) ; 3 — хроматограмма ЛЖК культуры анаэробных грамположительных

кокков, высеянных от того же больного; 4 — хроматограмма ЛЖК клини

адского образца (операционный материал больного К. с гангреной левой

стопы; обнаружены грамположительные анаэробные кокки); 5 — хромато-

грамма ЛЖК клинического образца того же больного (материал из полости

острого абсцесса средней доли правого легкого; обнаружены фузобактерии

и В. melaninogenicus).

Рис. 11.5. Хромато-масс спектрометрическое определение  Л Ж К в клини
ческом образце больного П. в трехмерном изображении.
По оси х представлено относительное время удерживания, по оси у — интен-
сивность хроматографического сигнала, но оси г — массовое число. Каждый
результирующий ник хроматограммы представлен в виде комплекса ионных
фрагментов, идентифицированных по массовому числу.

4

5