Руководство по иммунофармакологии

232

Глава 22

.мой гранулематозной ткани. Показано, что

продукты гранулематозной ткани потенциально

антигенны и, возможно, действуют, как

эндогенный антиген. Выявлено значительное

уменьшение реакции на кусочки хлопка при

неонатальной тимэктомии, что свидетельствует

о представлении в ней иммунного компонента

Т-клетками. В данной системе определяются

нестероидные противовоспалительные пре-

параты и стероиды, причем последние активны

в очень низких дозах. Метод прост в выполне-

нии, но требует введения исследуемых веществ

в течение 7 дней, что не всегда желательно при

поиске новых соединений, доступных только в

малых количествах. В этом тесте выявляется

влияние веществ на миграцию и пролиферацию

клеток; к его недостаткам следует отнести

необходимость детального гистологического

исследования.

Шестидневный воздушный пузырь

Рис. 101. Клеточное накопление и образование экссудата

в плевральной полости у морской свинки после введения

Выше уже был описан 6-дневный воздушный

туберкулина.

пузырь, используемый для изучения острого

воспаления. Эта модель наиболее пригодна и

для исследования хронического воспаления, а

очищенного белка туберкулезных бацилл. В

именно-синовита. Ввиду его размеров большое

плевральной полости реакция развивается мед-

количество каррагенана или другого ирри-танта

ленно, достигая максимума через 18-24 ч после

вводят в полость и измеряют развивающееся

инъекции. При типичной реакции через 6 ч

воспаление.

Первоначально

доминируют

после введения очищенного белка образуется

полиморфно-ядерные клетки, которые сме-

0,5 мл экссудата, а к 18-му часу-5 мл; затем

няются преимущественно мононуклеарными

реакция медленно затухает, и к 48-72-му часу

популяциями. Применяя в качестве ирританта

плевральная полость возвращается к исходно-

каррагенан, с помощью нестероидных проти-

му состоянию. Экссудат содержит много кле-

вовоспалительных препаратов можно подавить

ток, в основном мононуклеарного типа (рис.

клеточную и экссудативную реакцию. В

101).

последнее время распространение получила

В отличие от реакции Артюса туберкулино-

модификация, при которой в 6-дневный пузырь

вая реакция почти не вызывает выделения

вносится хрящ. Есть надежда, что подобная

гистамина в плевральную полость, зато в уме-

модификация поможет фармакологам в поиске

ренном количестве выделяется 5-окситрипта-

веществ, предупреждающих эрозию твердых

мин. Содержание простагландинов достигает

тканей при артритах.

максимума примерно к

12-му часу, что по

времени близко к пику воспалительной реак-

ции.

Иммунное хроническое воспаление

Почти тотальное удаление периферическо-

го комплемента не влияет на развитие кле-

Клеточно-опосредованный

точных и сосудистых реакций.

экспериментальный плеврит

Клеточно-опосредованные иммунные реак-

ции могут также индуцироваться в плевраль-

У крыс и морских свинок могут быть инду-

ной полости крыс при введении вакцины Вог-

цированы клеточно-опосредованные воспали-

detella pertussis. Крысам, сенсибилизированным

тельные реакции. Морских свинок сенсибили-

коклюшной вакциной в неполном адъю-ванте

зируют полным адъювантом Фрейнда. Спустя

Фрейнда, внутриплеврально вводят раз-

2,5-4 нед сенсибилизированным животным

решающую дозу той же вакцины. Это приводит

внутриплеврально вводят разрешающую дозу

к образованию экссудата (максимум при-

Экспериментальные модели для тестирования

233

ходится на 48-й час), причем в нем домини-

суставов. Затухание сильного воспаления про-

руют мононуклеарные клетки.

исходит через 30-40 дней.

Интересно, что данная модель является од-

Другие вещества, такие как небольшие

ной из тех немногих, где показано подавление

фрагменты стенки клеток микобактерий и

воспаления D-пеницилламином, индометаци-

мурамилдипептид, могут индуцировать забо-

ном и левамизолом. Введение до сенсибилиза-

левание при введении эмульсии, приготовлен-

ции и продолжение терапии этими тремя пре-

ной на неполном адъюванте Фрейнда, под кожу

паратами во время развития воспаления вызы-

стопы.

СР-20961[N,N-диоктадецил-N',N-бис(2-

вает подавление реакции. С другой стороны,

оксиэтил)-пропаредиамин]

неиммунный

введение D-пеницилламина и левамизола од-

синтетический адъювант, суспендированный в

новременно с разрешающей дозой антигена

парафиновом масле, может индуцировать хро-

усиливает реакцию, а введение индометацина

нический артрит, аналогичный наблюдаемому

ее подавляет. Таким образом, остается нере-

при введении других адъювантов.

шенной проблема выбора модели, способной

Животными выбора являются 13-30-дневные

давать позитивные результаты с разными

крысы. Адъювантные артриты различаются у

группами клинически используемых препара-

разных линий, и наиболее удобными являются

тов для лечения артрита.

инбредные крысы Льюис.

Этиология адъювантного артрита неизвест-

на, но косвенные данные свидетельствуют о

Реакция смешанной гиперсенситивности в

шестидневном воздушном пузыре

наличии неидентифицированных антигенов,

которые, активируясь, усиливают Т-клеточный

Смешанные реакции гиперсенситивности мо-

иммунитет и вызывают воспаление в тканях

гут быть индуцированы в 6-дневном воздуш-

сустава. Это также подтверждается фактом

ном пузыре с помощью вакцины Bordetella

переноса заболевания сенсибилизированными

pertussis. Крыс сенсибилизируют коклюшной

лимфоцитами.

вакциной в неполном адъюванте Фрейнда, а

Роль простагландинов установлена при вы-

спустя 6 дней на дорсальной поверхности жи-

явлении чувствительности модели к ингибито-

вотных формируют воздушный пузырь. На 6-й

рам циклооксигеназного пути метаболизма

день развития воздушного пузыря или на 12-й

арахидоновой кислоты. Воспаление, индуциро-

день сенсибилизации в его полость вводят

ванное адъювантами, также эффективно по-

коклюшную вакцину. Реакция начинается с

давляется стероидами. Действие других препа-

проникновения полиморфно-ядерных клеток, а

ратов в значительной степени зависит от дозо-

затем мононуклеарных клеток. Эйкозанои-ды,

вого режима. Белки острой фазы, например

простагландин Е2 и лейкотриен В4 опре-

аггликопротеин, используются в качестве био-

деляются в экссудате вплоть до 13-го дня после

логического маркера воспаления, индуциро-

введения разражителя. Блокаторы циклоокси-

ванного адъювантами. Данный показатель

геназы способны подавлять эту реакцию, a D-

снижается при применении нестероидных про-

пеницилламин обладает потенцирующим дей-

тивовоспалительных препаратов и стероидов.

ствием. Дексаметазон полностью подавляет

реакцию.

Артриты крыс, вызванные коллагеном

II типа

Адъювантный артрит

Данная модель основана на использовании

Основной моделью адъювантного артрита яв-

нативного коллагена II типа, полученного из

ляется введение убитых прогреванием Myco-

эмбрионов цыплят или человека и тщательно

bacterium tuberculosis, суспендированных в

эмульгированного в неполном адъюванте

жидком парафиновом или минеральном масле,

Фрейнда. Эмульсию вводят внутрикожно в не-

в заднюю лапу или в хвостовую кость. После

сколько мест или подкожно в заднюю лапу или

инъекции указанного материала в лапу в тече-

хвост. Коллагениндуцированные артриты также

ние 3 дней развивается неспецифический вос-

зависят от линии используемых животных.

палительный отек, который сменяется имму-

Появление артритов наблюдается через 12-13

нологически индуцированным отеком другой

дней после разрешающей инъекции, а пик раз-

лапы, в которую ничего не вводили. Между 16-

вития воспаления приходится на 21-28-й день

м и 30-м днем наблюдается максимальный

после сенсибилизации коллагеном. Воспаление

отек, приводящий к срастанию поверхностей

Хромогликат

Дж. К. Формен, Ф. Л.

Пирс (J. С. Foreman, F. L. Pearce)

Разработка и клинические

тов, эффективно применяемых при астме (на-

эффекты хромогликата

пример, от B2-адреномиметиков и кортикосте-

роидов), отсутствием действия при использо-

Использование хромогликата как антиаллер-

вании после введения антигена, тогда как по-

гического препарата было начато в Великобри-

следние эффективны после антигена.

тании в 1967 г. Препарат (рис. 102) разработан

Хромогликат эффективен при некоторых

на основе хромона (келлина), выделенного из

аллергических заболеваниях, отличных от аст-

семян восточно-средиземноморского растения

мы, например при аллергическом рините, ато-

Amni visnaga. Келлин обладает сосудорасши-

пических заболеваниях глаз. Он также эффек-

ряющим действием и расслабляет гладкие

тивен при формах астмы, не имеющих аллер-

мышцы, но его применение ограничено ввиду

гической основы, включая астму, индуциро-

побочных токсических эффектов. Хромогликат

ванную физической нагрузкой, и неатопиче-

служит примером препарата, действие которого

скую или криптогенную астму. Активность

было открыто при использовании у людей, а не

хромогликата не зависит от аллергии к какому-

в результате рациональной экспериментальной

либо особому антигену. Показано, что хро-

работы на животных моделях. Анти-

могликат предупреждает как аллергическую

астматический эффект хромогликата был об-

астму, опосредованную классическим взаимо-

наружен Altounyan, который ввел себе препарат

действием IgE- антиген (см. главу 2), так и аст-

во время астматического приступа, вызванного

му, опосредованную взаимодействием IgG-

ингаляцией пыльцевых антигенов, к которым

антиген.

он был сенсибилизирован. Ингаляция

20 мг

хромогликата обеспечивает

90% защиты от

вызываемой антигеном обструкции дыха-

Астма и клиническая фармакология

тельных путей, если препарат принимается за 2

хромогликата

ч до антигена. Эффективность препарата

Неотъемлемой характеристикой всех больных

уменьшается по мере увеличения промежутка

времени между его приемом и введением анти-

астмой является гиперреактивность дыхатель-

ных путей как к специфической стимуляции

гена, но даже при увеличении этого промежут-

ка до

18 ч некоторая активность лекарства

антиген/антитело, так и к неспецифическим

сохраняется.

стимулам, включая химические соединения

Хромогликат не всасывается после приема

(например, гистамин, метахолин и двуокись

внутрь и эффективен только при попадании на

серы), а также к охлаждению.

слизистую оболочку бронхов при ингаляции.

Бронхиальная провокация аллергеном у

Хромогликат отличается от других препара-

больных аллергической астмой вызывает

бронхоконстрикцию, обычно определяемую как

снижение объема форсированного выдоха за 1 с

(OBФ1); причем эта реакция может быть

двухфазной (рис. 103). Реакция на аллерген с

немедленным началом и разрешением через 1-2

ч сменяется в некоторых случаях поздней

реакцией, начинающейся через

4-6 ч после

провокации аллергеном и длящейся несколько

часов. Хромогликат предупреждает как немед-

ленную, так и позднюю реакции (см. рис. 103).

Общепринято, что немедленная реакция

вызывается медиаторами, выделяемыми туч-

Рис. 102. Структура хромогликата.

235

236

Глава 23

Рис. 103. Влияние хромогликата на

раннюю и позднюю фазы бронхиальной

реакции у больного с аллергией к

домашним полевым клещам.

ными и другими клетками. Механизм поздней

при гипервентиляции, сопровождающей на-

реакции и ее взаимоотношения с ранней реак-

грузку. Величина этого эффекта зависит от

цией пока непонятны. У некоторых больных

природы, интенсивности и длительности на-

выявляется только поздняя или только ранняя

грузки, т. е., в конце концов, от частоты и глу-

реакция, поэтому невозможно утверждать, что

бины вентиляции, а также от температуры и

события немедленной реакции необходимы для

влажности вдыхаемого воздуха. Механизм,

формирования поздней. Возможно, что

посредством которого охлаждение дыхательных

медиаторы обеих реакций образуются во время

путей вызывает бронхоспазм, неизвестен.

поступления аллергена. Одни медиаторы,

Возможно, что охлаждение гиперреактивных

например гистамин (см. главу 9) и метаболиты

дыхательных путей само по себе вызывает

арахидоната (см. главу 10), вызывают немед-

сокращение гладких мышц за счет прямой или

ленные эффекты, а другие, такие как ФАТ,

непрямой стимуляции сенсорных рецепторов и

обладают отсроченным действием. Проявления

последующей активации суживающих реф-

немедленной или поздней реакции опре-

лексов блуждающего нерва. Альтернативно

деляются количествами каждого типа медиа-

охлаждение может приводить к выделению из

тора, образованным любым данным стимулом.

тучных клеток таких медиаторов, как гистамин,

Как будет сказано ниже, получены дока-

что наблюдается при холодовой крапивнице.

зательства того, что хромогликат предупреж-

Дополнительно к охлаждению при испарении

дает выделение медиаторов, вызывающих не-

потеря воды со слизистой оболочки бронхов

медленную реакцию

(гистамин), но это не

может привести к образованию гипер-

означает, что он предупреждает выделение ме-

осмолярной среды в тканях, что либо прямо

диаторов поздней реакции. Есть данные, что

вызовет выделение медиаторов, либо усилит

хромогликат отменяет некоторые эффекты ФАТ

реакцию дыхательных путей на иммунную сти-

(см. главу

16). Таким образом, противо-

муляцию тучных клеток легких.

астматическое действие хромогликата может

При астме, индуцированной физической на-

складываться из нескольких механизмов.

грузкой, как у больных с аллергической формой

Ингаляция хромогликата в настоящее время

заболевания, так и у астматиков-неаллергиков

принята в качестве надежного метода лечения

отмечается выделение в плазму медиаторов

астмы, индуцированной физической нагрузкой.

тучных клеток-гистамина и хемотаксиче-ского

Одним из важных начальных событий при

фактора нейтрофилов (см. главу 11). Выявлена

данном виде астмы является сужение бронхов

корреляция между временем появления этих

вследствие охлаждения дыхательных путей.

медиаторов и развитием бронхоспаз-ма, а также

Оно возникает в результате увеличенной потери

между их концентрацией и силой бронхоспазма.

тепла и латентного тепла испарения

Лечение таких больных хромо-

Хромогликат

237

гликатом перед нагрузкой предупреждает как

ном. Этот эффект был детально изучен на

развитие бронхоконстрикции, так и выделение

собаках, у которых при анестезии хлоралозой

указанных медиаторов. Отсюда сделано за-

ингаляция гистамина приводила к выраженному

ключение, что действие хромогликата связано

повышению сопротивления дыхательных путей.

с предупреждением выделения медиаторов туч-

Данный эффект индуцируется также прямой

ными клетками; однако имеются сообщения об

электрической

стимуляцией эфферентных

индуцированной физической нагрузкой астме,

вагусных нервов и подавляется охлаждением

приступы которой не сопровождаются увели-

блуждающего нерва до возникновения блока

чением в плазме гистамина; но и в этом случае

проводимости. Более того, хромогликат

заболевание можно было предупредить хромо-

ослабляет бронхоконстрикцию, вызванную ги-

гликатом.

стамином, но не действует на бронхоспазм,

Выше отмечалось, что хромогликат обладает

обусловленный прямой электрической стиму-

разными механизмами действия на немед-

ляцией вагуса. Сначала это действие препарата

ленную и позднюю фазы астматической брон-

связывали с десенситизацией ирритантных ре-

хоконстрикции. Более того, выявлена дивер-

цепторов легких. Аналогичный механизм пред-

гентность кривых доза-эффект для хромо-

лагается для объяснения защитного действия

гликата как профилактического средства при

хромогликата при бронхоспазме, вызванном

бронхоконстрикции, вызванной антигеном, и

двуокисью серы у людей. Однако электрофи-

при астме, индуцированной двуокисью серы.

зиологическая регистрация с одиночных воло-

Это также свидетельствует в пользу того, что

кон, идущих от ирритантных рецепторов легких

хромогликат действует посредством разных

у собак, не выявила какого-либо влияния

механизмов в зависимости от природы стимула

хромогликата ни на фоновые разряды, ни на

(специфический, аллергический или неспе-

разряды, индуцированные гистамином. Напро-

цифический).

тив, препарат повышает скорость разрядов

Важно отметить, что хромогликат не об-

рецепторов, расположенных в эндокарде левого

ладает бронхорасширяющей, противовоспали-

желудочка сердца собак. На этом основании

тельной или антихолинергической активно-

утверждается, что ирритантные легочные ре-

стью. Он также не является антагонистом ги-

цепторы у собак, которые стимулируются гис-

стамина или других медиаторов острых аллер-

тамином (а возможно, и другими стимулами),

гических реакций. Помимо возможного влия-

вызывают бронхоспазм, а рецепторы левого

ния хромогликата на выделение медиаторов

желудочка, чувствительные к хромогликату,

предполагается (по данным последних иссле-

подавляют их рефлекторное действие. Пока

дований) его действие на нервные механизмы,

неясен механизм, посредством которого акти-

принимающие участие в астме.

вация последних рецепторов предупреждает или

Действие основного констрикторного меха-

отменяет

бронхоконстрикцию.

Вероятно,

низма в дыхательных путях обеспечивается

повышенная активность рецепторов левого же-

холинергической парасимпатической нервной

лудочка подавляет активность центральной

системой. Дыхательные пути человека получа-

нервной системы, которая связана с рефлек-

ют обильную холинергическую иннервацию

торными бронхоконстрикторными механизмами

через блуждающий нерв, синапсы эфферентных

в стволе мозга.

волокон которого находятся в ганглиях, лока-

В более поздних исследованиях определя-

лизующихся в стенках дыхательных путей.

лось действие хромогликата на волокна миели-

Электрическая стимуляция блуждающего нерва

низированных афферентных нервов (С-волок-

у животных вызывает сужение просвета брон-

на), связанных с чувствительными нервными

хов, которое частично блокируется мускарино-

окончаниями в легких собак. Стимуляция этих

вым антагонистом атропином или ганглио-

окончаний капсаицином вызывает рефлектор-

блокатором гексаметонием. Среди бронхоле-

ную бронхоконстрикцию, а хромогликат по-

гочных афферентных волокон, проходящих в

давляет возбуждение. Возможно, что хромо-

блуждающем нерве, находятся волокна, иду-

гликат подавляет рефлекторные бронхоконст-

щие от ирритантных рецепторов эпителия тра-

рикторные реакции, возникающие при стиму-

хеи и бронхов. Эти рецепторы стимулируются

ляции С-волокон или соответствующих чувст-

гистамином и, возможно, другими медиатора-

вительных рецепторов в легких человека. Не-

ми анафилаксии и вызывают рефлекторную

зависимо от точных механизмов данного про-

бронхоконстрикцию, которая блокируется пе-

цесса, кажется вполне вероятным, что превен-

ресечением блуждающего нерва или атропи-

тивное действие хромогликата при астмати-

238

Глава 23

ческих реакциях на неспецифические стимулы

в данной системе отмечена активность других,

опосредуется нейрофизиологическими механиз-

более сильных хромогликатоподобных препа-

мами.

ратов. Причина такого несоответствия непо-

Таким образом, обсуждается в основном

нятна и, возможно, связана с условиями им-

профилактика хромогликатом бронхоспазма,

мунизации экспериментальных животных. Не-

вызванного специфическими или неспецифиче-

смотря на эти различия, совершенно очевидно,

скими стимулами. Как уже отмечалось, ведущей

что изучение дыхательных функций на экспе-

патологией при астме является гиперре-

риментальной модели приматов- наиболее до-

активность дыхательных путей к различным

ступное и адекватное исследование для опре-

агентам. В связи с этим возникает вопрос, каким

деления потенциальной антиастматической ак-

образом хромогликат изменяет реактивность

тивности соединений. Ввиду технических труд-

дыхательных путей. Здесь могут рас-

ностей и высокой стоимости эксперимента с

сматриваться как влияние хромогликата на

использованием приматов вряд ли можно счи-

выделение медиаторов, так и его действие на

тать данную систему пригодной для начально-

нервные пути. Существуют сведения о том, что

го скрининга новых антиастматических препа-

хромогликат снижает чувствительность дыха-

ратов.

тельных путей к гистамину, но, поскольку он не

Для изучения дыхательной анафилаксии

обладает активностью антагониста гиста-

широко используются морские свинки и крысы.

миновых рецепторов, предполагается, что его

У крыс после активной или пассивной

действие связано с уменьшением реактивности

сенсибилизации определяется бронхоконстрик-

дыхательных путей. Эта идея должна быть

ция. В последней системе хромогликат, как

рассмотрена критически, так как не во всех

правило, более эффективен в предупреждении

исследованиях получены результаты, подтвер-

повышения резистентности дыхательных путей

ждающие ее правильность.

и оказывает довольно слабое действие у актив-

но сенсибилизированных животных. Причины

этого не вполне понятны, но они могут отра-

Исследование механизма действия

жать различия механизмов, участвующих в

хромогликата на экспериментальных

развитии бронхоконстрикции в обоих случаях.

моделях in vivo

В отличие от крыс влияние хромогликата на

анафилактическую бронхоконстрикцию у мор-

Уникальная превентивная активность хромо-

ских свинок менее выражено. В первых иссле-

гликата в отношении аллергической астмы

дованиях было обнаружено, что хромон в по-

первоначально была выявлена у человека. По-

добной системе неэффективен. В более поздних

добный подход не может быть использован для

работах препарат в определенных условиях

поиска новых препаратов, поэтому для таких

частично ослаблял реакции, опосредованные

целей разработан ряд животных моделей.

IgE-антителами, но не влиял на реакции, опо-

средованные IgG. Сниженная активность хро-

могликата в данной системе почти наверняка

Респираторная анафилаксия

отражает видовую и тканевую специфичность

Респираторная анафилаксия у человекообраз-

хромона. Тучные клетки морских свинок ока-

ных приматов служит моделью бронхиальной

зались достаточно рефрактерными к данному

астмы человека. Обезьяны, сенсибилизирован-

соединению. Аналогично этому, препарат не

ные к антигену Ascaris, реагируют на после-

предупреждает острой системой анафилаксии у

дующую ингаляцию аэрозольного антигена

телят, сенсибилизированных сывороткой ло-

выраженным ухудшением некоторых функций

шади, причем легкие у телят являются главным

легких - скорости потока воздуха, объема ды-

шоковым органом. Препарат обладает слабым и

хания, транслегочного давления, общего легоч-

непостоянным действием на респираторные

ного сопротивления и динамической податли-

реакции у собак.

вости легких.

Вызванные антигеном нарушения легочных

Пассивная перитонеальная анафилаксия у

функций у сенсибилизированных обезьян в том

крыс

же исследовании ослаблялись хромогликатом.

Однако эти результаты не были подтверждены

Для создания данной модели сначала произво-

всеми последующими исследованиями, хотя

дят пассивную сенсибилизацию тучных клеток

перитонеальной полости крыс внутрибрюшин-

Хромогликат

239

ной инъекцией IgE-антител. Последующее вве-

Затем животное забивают и удаляют кожу

дение соответствующего антигена приводит к

спины для исследования подкожного слоя.

высвобождению медиаторов тучных клеток,

Экстравазация маркера устанавливается путем

таких как гистамин и леикотриены. После об-

определения диаметра отечных поражений или

наружения этих веществ в перитонеальной

при экстракции с последующим спектрофото-

жидкости их стали использовать как показатель

метрическим определением красителя. Альтер-

активации тучных клеток. Затем метод

нативно экстравазацию можно определить с

модифицировали, вводя внутривенно животным

помощью радиоактивного высокомолекуляр-

маркер (краситель) перед внутрибрюшин-ным

ного маркера. Исследуемые препараты обычно

введением антигена. Последующее попадание

вводят внутривенно или (когда возможно) пе-

красителя в перитонеальную полость может

рорально вместе с антигеном и маркером.

использоваться как показатель воспаления в

Хромогликат относится к очень сильным и

брюшной полости. Инъекция хромогли-ката

эффективным ингибиторам реакций ПКА

(у

непосредственно перед нагрузкой антигеном

крыс), опосредованных гомологичными IgE-

почти полностью подавляет выделение

антителами. Как и в других системах тести-

гистамина и несколько уменьшает проникнове-

рования, активность препарата варьирует в об-

ние красителя, а также выделение лейкотрие-

ратной зависимости от силы анафилактической

нов. Основной трудностью в интерпретации

реакции, но оптимальные концентрации

результатов является изменение концентрации

хромогликата могут полностью отменять ре-

выделившихся медиаторов, которое определя-

акцию. Однако кожные реакции, опосредован-

ется не только скоростью их выделения, но и

ные IgG-антителами, труднее подавляются

скоростью их удаления из брюшной полости

данными соединениями. Как и в моделях in

вследствие абсорбции и метаболизма. Тем не

vitro, активность хромогликата в модели ПКА

менее данный метод дополнительно позволяет

крыс резко снижается, если антиген и препарат

оценить действие препаратов на воспаление в

не вводят одновременно. Этот эффект связан с

брюшной полости в результате активации

генуинной тахифилаксией, поскольку вторая

тучных клеток. Экстравазация серозной жид-

доза хромона, введенная одновременно с анти-

кости в просвет бронхов больных астмой вносит

геном, не подавляет реакции. Другие антиал-

определенный вклад в патогенез заболевания,

лергические препараты могут обладать подоб-

поэтому препараты, влияющие на данный

ными тахифилактическими свойствами, а также

процесс, могут иметь клиническую ценность.

перекрестной реактивностью с хромоглика-том,

Однако степень достоверности, с которой ак-

т. е. первая доза одного соединения может

тивность препаратов, подавляющих перитоне-

подавлять активность последующей дозы вто-

альную анафилаксию у крыс, прогнозирует

рого соединения. Определение перекрестной

подобную активность у человека, достаточно

тахифилаксии с хромогликатом принято в ка-

ограничена.

честве критерия оценки сходства механизма

действия с хромоном исследуемого соединения

Пассивная кожная анафилаксия

и может свидетельствовать о потенциальной

антиастматической активности.

Опосредованные IgE реакции пассивной кож-

На первый взгляд, модель реакции ПКА

ной анафилаксии

(ПКА), особенно у крыс,

крыс имеет много явных преимуществ в каче-

очень широко используются для первичного

стве скрининговой модели антиаллергических

скрининга антиаллергических соединений. В

соединений. Она быстровыполнима, проста, и с

этой модели воспалительные медиаторы, вы-

ее помощью можно исследовать большое

свобождаемые в результате реакции гиперсен-

количество препаратов. Однако метод зависит

ситивности немедленного типа в коже, вызы-

от способности исследуемых соединений по-

вают локальное повышение проницаемости ка-

давлять дегрануляцию тучных клеток кожи

пилляров. Ее измерение позволяет установить

крыс. Учитывая гетерогенность реакций тучных

интенсивность кожной анафилактической реак-

клеток на антиаллергические соединения,

ции. В модели обязательно используются внут-

трудно предопределить надежность экстрапо-

рикожное введение соответствующего количе-

ляции результатов, полученных в данной моде-

ства IgE-антител. После латентного периода

ли, на человека. Эта точка зрения будет де-

(24-72 ч), в течение которого наблюдается сен-

тально обсуждаться ниже, здесь же в под-

сибилизация тучных клеток кожи, животному

тверждение специфичности действия препарата

внутривенно вводят смесь антигена и маркера.

следует отметить, что хромогликат не по-

240

Глава 23

давляет кожные анафилактические реакции in

та подавляют выделение гистамина тучными

vivo у коров, морских свинок, людей, обезьян,

клетками, стимулированными антигеном, но не

мышей и кроликов. Если другие препараты

влияют на высвобождение медиатора под

обладают аналогичной специфичностью, то этот

действием кальциевого ионофора А23187 (см.

эффект может весьма серьезно ограничивать

главу 2). Эти данные свидетельствуют о том,

целесообразность любой экспериментальной

что хромогликат подавляет выделение гиста-

модели при прогнозировании антиастма-

мина, нарушая антигениндуцированный вход

тической активности соединений у людей.

кальция в тучные клетки, что и было показано

для хромогликата, доксантразола (родственный

препарат) и дибутирила цАМФ. Активность

Исследование механизма действия

указанных соединений как ингибиторов

хромогликата in vitro

транспорта кальция была такой же, как и инги-

биторов выделения гистамина.

Подавление выделения гистамина

Данная гипотеза представляется слишком

тучными клетками

простой: ведь если выделение гистамина туч-

ными клетками индуцируется ионофором

Перитонеальные тучные клетки крыс активно

А23187, то ЕС50 хромогликата для его подав-

используются для изучения механизма действия

ления составляет 300 мкМ, а при использовании

хромогликата по следующим причинам: во-

в качестве стимула антигена и соединения

первых, выделение гистамина тучными клетками

48/80- 10 мкМ. Кроме того, против механизма

рассматривается как основная часть патогенеза

действия хромогликата, направленного на пре-

астмы; во-вторых, перитонеальные тучные

дупреждение изменений потоков кальция, при-

клетки крыс могут служить типичным примером

водятся данные о блокировании хромоглика-

изолированных тучных клеток, относительно

том выделения гистамина под действием сти-

легко получаемых в очищенном виде. Однако

мулов, не зависящих от внеклеточного кальция.

обнаружение гетерогенности тучных клеток (см.

Однако это не является обязательным условием.

главу

2) предполагает, что перитонеальные

Установлено, что выделение гистамина

тучные клетки крыс не всегда являются

тучными клетками зависит от возрастания

идеальной моделью тучных клеток легких

внутриклеточной концентрации ионизиро-

человека. Кроме того, накапливается все больше

ванного кальция (см. главу 2). Кальций имеет

данных о том, что роль тучных клеток в

либо внеклеточное происхождение, либо вы-

патогенезе астмы не столь значительна, как это

свобождается из внутриклеточного депо. Не

представлялось раньше. Тем не менее показано,

исключено, что транспорт кальция через кле-

что

хромогликат

подавляет

выделение

точную мембрану или через мембраны внут-

медиаторов из тучных клеток человека как in

ренних депо одинаков, поэтому хромогликат

vitro, так и in vivo, а исследования на

может нарушать оба процесса одним и тем же

перитонеальных тучных клетках крыс и

механизмом, например фосфорилированием

крысиных клетках базофильного лейкоза в на-

особых белков (см. ниже). Без всякого сомне-

стоящее время позволяют получать наиболее

ния, хромогликат подавляет выделение гис-

полную информацию о механизме действия

тамина тучными клетками, которое индуциру-

хромогликата на клеточном уровне.

ется ионофором, но этот факт сам по себе не

Хромогликат

(1-100 мкМ) вызывает дозо-

отрицает возможного наличия разных меха-

зависимое подавление выделения гистамина

низмов влияния хромогликата на транспорт

перитонеальными тучными клетками, стиму-

кальция в тучных клетках и на некоторые

лированными реакцией антиген-антитело или

другие биохимические события, относящиеся к

соединением 48/80. Степень подавления выде-

потоку кальция и происходящие более дис-

ления гистамина под действием соединения

тально в секреторном механизме.

48/80, которая достигается при использовании

хромогликата, при низком уровне стимуляции

Тахифилаксия

явно выше, чем при высоком. Хромогликат

эффективен при его добавлении к тучным клет-

При изучении хромогликата как ингибитора

кам одновременно с антигеном; предваритель-

выделения гистамина тучными клетками отме-

ная преинкубация клеток с препаратом снижает

чено, что препарат более эффективен при его

эффект. По данным некоторых исследований,

использовании одновременно со стимулятором

определенные концентрации хромоглика-

процесса. Данный факт не совсем обычен,

Хромогликат

241

поскольку многим препаратам для проявления

ной хромогликату клинической антиастматиче-

их максимального ингибиторного эффекта тре-

ской активностью. Это свидетельствует о том,

буется предварительная инкубация с тканью.

что действие хромогликата и данных веществ на

Для хромогликата установлена обратная зави-

тучные клетки крыс имеет мало общего с

симость: сила подавления выделения гистами-

клинической эффективностью препарата.

на уменьшаетсяс увеличением времени пре-

Механизм тахифилаксии хромогликата не-

инкубации с препаратом перед добавлением

ясен; известно, однако, что она не обусловлена

стимулятора. Это также контрастирует с кли-

инактивацией препарата. Предполагается, что

ническими наблюдениями при использовании

хромогликат подавляет выделение гистамина,

хромогликата, который активен при введении за

вызывая образование компонента, опосредую-

2 и 18 ч до провокации бронхиальной астмы

щего ингибирование. В этом случае тахифи-

антигеном. На крысиных тучных клетках по-

лаксия должна отражать истощение этого эн-

давление хромогликатом выделения гистамина

догенного компонента, несмотря на присутствие

уменьшается в пределах преинкубационного

препарата на его рецепторе. Одним из

времени 0-10 мин. При внесении хромогликата

кандидатов на роль эндогенного компонента,

за 20 мин до стимуляции регистрируется лишь

образование которого вызывается хромогли-

75% эффекта, получаемого при внесении

катом, является фосфорилированный белок (см.

препарата одновременно со стимулом. При

ниже); в таком случае тахифилаксия отражает

преинкубации клеток с препаратом более 20

автоматическую дефосфориляцию белка в

мин ингибиторный эффект хромогликата вновь

клетке в присутствии хромогликата.

возрастает. Таким образом, минимальный

ингибиторный эффект наблюдается в про-

Влияние на транспорт кальция:

межутке преинкубационного времени

10-20

хромогликатсвязывающий белок

мин. Интересно, что точно такой же феномен

наблюдается при использовании хромогликата

В настоящее время получены убедительные

для подавления выделения гистамина из

доказательства индукции выделения гистамина

фрагментов легких крыс или при ингибиро-

клетками под действием возрастающих кон-

вании пассивной кожной анафилаксии в коже

центраций ионизированного кальция в цитозо-

крыс. Уменьшение ингибиторного действия

ле после взаимодействия антигена с мембран-

хромогликата при увеличении времени преин-

ным IgE (см. главу 2). Увеличение концентра-

кубации с тканями перед стимуляцией не свя-

ции обеспечивается, по крайней мере частично,

зано с захватом, метаболизмом или другой

перемещением внеклеточного кальция во внут-

инактивацией препарата, поскольку дополни-

риклеточный отсек. Как полагают, кальций

тельное внесение препарата в момент стимуля-

перемещается по мембранным каналам, которые

ции тканей не вызывает усиления ингибиторно-

открываются при взаимодействии антигена и

го эффекта или отмены тахифилаксии, вызван-

IgE на поверхности мембраны. Одна из ранних

ной преинкубацией. Тахифилаксия, индуциро-

гипотез о механизме действия хромогликата

ванная хромогликатом, зависит и от концент-

заключается в том, что препарат предупреждает

рации препарата: более высокие концентрации

вход

кальция

тучные

клетки,

вызывают и более сильную тахифилаксию.

стимулированные взаимодействием антиген-

После открытия хромогликата было разра-

IgE. В качестве доказательства приводятся

ботано множество препаратов, подавляющих

данные исследований, в которых хромогликат

выделение гистамина тучными клетками in vitro

предупреждает захват 45Са тучными клетками,

и пассивную кожную анафилаксию. Примером

стимулированными взаимодействием антиген-

подобных соединений могут служить

IgE; причем активность препарата в отношении

доксантразол и буфролин. Показано, что не-

захвата 45Са сравнима с активностью препарата

которые из этих соединений обладают пере-

как ингибитора секреции гистамина этими

крестной тахифилаксией с хромогликатом, что

клетками.

указывает на общие механизмы их действия, а

В последующем было показано, что хромо-

именно подавление выделения гистамина

гликат в органических растворителях образует

тучными клетками. Интересно, что флавоноид

комплексы с двухвалентными катионами,

кверцетин, являющийся ингибитором выделе-

включая Mg, Ca, Sn, Ba, Zn и Мп. Эти комп-

ния гистамина, также обнаруживает перекрест-

лексы образуются за счет электростатического

ную тахифилаксию с хромогликатом. К сожа-

взаимодействия двух карбоксильных групп

лению, эти препараты не обладают аналогич-

хромогликата с двумя положительными заря-

242

Глава 23

дами двухвалентных ионов со стохиометрией

го свободного кальция. Данные варианты кле-

1:1. Однако захват кальция хромогликатом не

ток неспособны захватывать 45Са при стиму-

объясняет его активности как ингибитора вы-

ляции реакцией антиген- IgE на мембране, где

деления гистамина по двум причинам: а) хро-

не выявляется белок, связывающий хромогли-

могликат подавляет выделение гистамина в

кат. Поэтому был сделан вывод о том, что

микромолярной концентрации в присутствии

хромогликатный рецептор мембраны представ-

миллимолярной концентрации внеклеточного

ляет собой транспортный белок кальция, кото-

кальция; б) у тучных клеток, обработанных

рый необходим для выделения гистамина при

хромогликатом, а затем отмытых от него,

стимуляции антиген- IgE. Соответственно хро-

сохраняется подавление выделения гистамина.

могликат подавляет выделение гистамина, на-

Показано, что хромогликат подавляет выделе-

рушая транспортную функцию этого белка в

ние гистамина посредством механизма, вклю-

отношении кальция.

чающего взаимодействие препарата и ионов

Дополнительные подтверждения гипотезы о

кальция с мембранным белком. Для изучения

роли белка, связывающего хромогликат, по-

связывания хромогликата с базофильными

лучены при слиянии очищенного хромогликат-

лейкозными клетками крыс (RBL-2H3) препарат

связывающего белка, заключенного в оболочку

добавляли в нерастворимые матриксы бус.

вируса Сендай, с вариантом клеток RBL-2НЗ,

Связывание препарата специфично в отношении

неспособных секретировать гистамин в ответ

клеток RBL-2H3 и не определяется у клеток

на стимуляцию реакцией антиген-IgE. Такое

мастоцитомы Р-815, не секретирующей

слияние с включением белка в дефектные

гистамин, а также у тимоцитов. Удаление

клетки превращает их из нереактивных в отве-

трипсином мембранного белка отменяет свя-

чающие на стимуляцию антиген- IgE. Кроме

зывание хромогликата с клетками RBL, как и

секреции гистамина в ответ на антигенную

связывание кальция с помощью EDTA. Сле-

стимуляцию, вариантные клетки становятся

довательно, хромогликат взаимодействует с

способными к захвату 45Са. Захват кальция и

мембранным белком на клетках RBL, для чего

секреция гистамина в ответ на стимуляцию

требуются ионы кальция. Связывание клеток и

антиген- IgE пропорциональны количеству

хромогликата, конъюгированного с бусами,

хромогликатсвязывающего белка, внесенного в

предупреждается свободным хромогликатом,

клетку, причем насыщение ответа достигается

тогда как хромогликат, конъюгированный с

на уровне, соответствующем содержанию белка

бусами, подавляет выделение гистамина из

в нормальных отвечающих клетках RBL.

клеток в ответ на стимуляцию антиген-IgE.

Анализ полученных данных свидетельствует

Данные наблюдения свидетельствуют о на-

о том, что белок, связывающий хромогликат,

личии мембранного белкового рецептора для

является белком, переносящим кальций,

хромогликата. Были предприняты попытки

который необходим для секреции гистамина

изолировать рецептор с помощью двух само-

клетками RBL, стимулированными взаимодей-

стоятельных подходов, один из которых вклю-

ствием антиген- IgE. Экспериментально вы-

чает в себя аффинную хроматографию, а дру-

полнен следующий этап исследования: включе-

гой-иммунопреципитацию мембранного белка.

ние белка, связывающего хромогликат, в ли-

В результате исследований получен белок с

пидный бислой индуцирует проводимость би-

молекулярной массой 60 000, который специ-

слоя при его обработке антителами к белку.

фичен для клеток RBL-2H3 и не выявляется на

Антиген или анти-IgE подобным действием не

клетках мастоцитомы Р-815 и тимоцитах. Сво-

обладает. Проводимость бислоя возникает при

бодный хромогликат и EDTA предупреждают

наличии Fc-рецептора и(или) одного связыва-

иммунопреципитацию белка антителами к

ющего белка, но в отсутствие антигена. Прово-

хромогликату. В ряде очень изящных экспери-

димость каналов, образуемых в двойном слое в

ментов продемонстрирована функциональная

результате перекрестного связывания Fc-pe-

значимость полученного белка. Некоторые ва-

цепторов для IgE в присутствии хромогликат-

рианты клеток линии RBL-2H3 несут IgE-pe-

связывающего белка, составляет примерно 2pS,

цепторы, но не выделяют гистамин в ответ на

но «время открытия» слишком вариабельно для

стимуляцию антиген-IgE. Эти варианты клеток

точного определения.

секретируют гистамин при действии ионо-фора

Эти очень изящные эксперименты направ-

А23187, что указывает на сохранность

лены на определение наличия в мембранах

секреторного механизма, который активируется

клеток RBL белка, способного к формированию

повышением концентрации внутриклеточно-

каналов. Более специфично белок взаимо-

Хромогликат

243

действует с Fc-рецепторами для IgE, поскольку

белка специфично в отношении белка с моле-

перекрестное связывание Fc-рецепторов анти-

кулярной массой 78000, а препарат одинаково

геном активирует функцию кальциевых кана-

эффективен как ингибитор секреции и как ин-

лов. Однако при обсуждении данной модели

дуктор фосфорилирования при его введении

необходимо сделать одну или две оговорки.

одновременно со стимулятором тучных клеток

Недавно при использовании метода быстрой

(соединение 48/80). При обеих формах актив-

фиксации не удалось выявить каких-либо кана-

ности хромогликата (фосфорилирование и по-

лов в мембранах интактных тучных клеток,

давление секреции) выявлена тахифилаксия.

стимулированных взаимодействием антиген-

Повторная экспозиция клеток с хромогликатом

IgE. Возможно, каналы не обнаруживаются

не вызывает фосфорилирования. Временные

именно этим методом; не исключаются, одна-

характеристики дефосфорилирования белка с

ко, и иные объяснения, полученные на основа-

молекулярной массой

78000

идентичны

нии данных других экспериментальных работ

временным характеристикам потери чувстви-

(см. главу

2). Клетки RBL являются, кроме

тельности (тахифилаксия) тучных клеток к хро-

того, чистой линией, в которой идентифициро-

могликату при тестировании подавления выде-

ван белок, связывающий хромогликат, поэтому

ления гистамина.

необходимо проведение подобных исследо-

Фосфорилирование белка тучных клеток с

ваний на других клеточных линиях, таких как

молекулярной массой 78000 стимулируется и

крысиные перитонеальные тучные клетки или

другими хромонами, отличающимися от

(лучше) тучные клетки человека. По сравнению

хромогликата. Относительная активность хро-

с тучными клетками крыс клетки RBL относи-

монов как ингибиторов гистаминовой секреции

тельно нечувствительны к подавлению хромо-

соответствует их активности как индукторов

гликатом выделения гистамина, которое вы-

фосфорилирования с молекулярной массой 78

звано антиген- IgE; поэтому ряду исследова-

000. Напротив, другие ингибиторы секреции

телей не удалось получить подавление выде-

гистамина, сальбутамол и дибутирил цАМФ,

ления гистамина хромогликатом на клетках

вызывающие фосфорилирование белка через

RBL.

цАМФ-зависимые протеинкиназы, не иниции-

руют фосфорилирования белка тучных клеток с

молекулярной массой 78 000. Таким образом,

Фосфорилирование белков

если индукция фосфорилирования является ме-

Известно, что фосфорилирование белков играет

ханизмом, с помощью которого хромогликат

основную роль в регуляции клеточных функций

подавляет секрецию гистамина, то данный

(см. главы

4). При стимуляции тучных

процесс не опосредуется цАМФ-зависимыми

клеток из перитонеальной полости крыс проис-

протеинкиназами. Показано, что дибутирил-и 8-

ходит фосфорилирование белков с молекуляр-

бромоциклический ГМФ фосфорилируют белок

ной массой 68 000, 59000 и 42000; эти фосфо-

с молекулярной массой

000 так же, как

рилированные белки участвуют в активации

хромогликат, поэтому не исключено, что хро-

процесса секреции гистамина

(см. главу

2).

могликат может активировать цГМФ-зависи-

Белок тучных клеток с молекулярной массой 78

мую протеинкиназу. В нескольких работах по-

000 также подвергается фосфорилированию, но,

казано, что хромогликат и другие новые со-

вероятно, этот процесс связан с down-регу-

единения с аналогичным механизмом действия

ляцией секреции гистамина (см. главу 2).

являются ингибиторами фосфодиэстераз цик-

Хромогликат вызывает фосфорилирование

лических нуклеотидов, но во всех случаях зна-

белка с молекулярной массой 78 000 при от-

чения ІС50 для хромогликата при подавлении

сутствии любой стимуляции клеток. Кривая

фосфодиэстеразы были по крайней мере на 1 - 2

концентрация - эффект для хромогликатинду-

порядка выше ІС50 при подавлении секреции

цированного фосфорилирования совершенно

гистамина. Одна из фосфодиэстераз тучных

идентична кривой для вызванного хромогли-

клеток обладает преимущественным сродством

катом подавления выделения гистамина при

к цГМФ как к субстрату, а поскольку этот

стимуляции соединением 48/80. Если фосфори-

циклический нуклеотид фосфорилирует тот же

лирование данного белка связано с обратной

белок, что и хромогликат, не исключено, что

регуляцией, то его фосфорилирование хромо-

хромогликат может действовать

(по крайней

гликатом объясняет подавление секреции гис-

мере частично), предотвращая распад цГМФ.

тамина этим препаратом. Более того, индуци-

В более поздних работах отмечалось, что

рованное хромогликатом фосфорилирование

протеинкиназа С фосфорилирует ряд белков

244

Глава 23

тучных клеток и клеток RBL (см. главу 2) и

in vivo у коров, обезьян, мышей и кроликов,

может быть мишенью для хромогликата. Белки,

что вполне соответствует отсутствию активно-

фосфорилированные киназой С, могут

сти в отношении тучных клеток кожи живот-

участвовать в активации и прекращении вы-

ных этих видов. Кроме неспособности к подав-

деления гистамина; однако прямых доказа-

лению выделения гистамина базофильными

тельств изменения активности киназы С под

лейкоцитами человека, хромон неэффективен в

действием хромогликата пока нет.

отношении базофилов коров, морских свинок и

кроликов. Таким образом, препарат обладает

значительной тканевой специфичностью у

Гетерогенность тучных клеток:

конкретного вида животных; например, у крыс

тканевая и видовая специфичность

хромогликат активен в отношении соедини-

хромогликата

тельнотканных клеток, но не в отношении

тучных клеток слизистой оболочки желудочно-

Тучные клетки играют ведущую роль в имму-

кишечного тракта. Препарат обладает подоб-

нопатологии различных аллергических и вос-

ной избирательностью для конкретной ткани у

палительных заболеваний. Для глубокого по-

разных видов, однако в отношении тучных

нимания этих болезней необходимо учитывать,

клеток кожи он активен только у крыс.

что тучные клетки различной локализации зна-

Ввиду использования хромогликата при

чительно различаются как по своим функцио-

бронхиальной астме у людей его действие на

нальным способностям, так и по структурным

тучные клетки легких вызывает дополнитель-

характеристикам

(см. главу

2). В частности,

ный интерес. Некоторе время считалось, что

тучные клетки различаются по своей реактив-

хромогликат в лучшем случае является слабым

ности в отношении секреторных стимулов и по

и непостоянным ингибитором выделения ме-

чувствительности к определенным препаратам.

диаторов фрагментами легочных тканей чело-

Сейчас ясно, что реактивность тучных клеток

века. Аналогичные результаты получены с туч-

разной локализации по отношению к опреде-

ными клетками энзиматически размельченных

ленным антиаллергическим агентам весьма ва-

легочных тканей человека. Препарат макси-

риабельна. Хромогликат является сильным ин-

мально эффективен в отношении фрагментов

гибитором анафилактического выделения гис-

легких обезьян только при субоптимальных

тамина перитонеальными тучными клетками

концентрациях антигена. Все это привело к

крыс; он умеренно эффективен в отношении тех

предположению об отсутствии связи клиниче-

же клеток у хомячков и совершенно неэф-

ской эффективности хромона при астме с его

фективен в отношении перитонеальных клеток

действием на тучные клетки. Тем не менее

мышей. Препарат также неэффективен в отно-

соединение обладает значительной актив-

шении человеческих базофильных лейкоцитов,

ностью в отношении тучных клеток, получен-

легочных и мезентериальных тучных клеток

ных при бронхоальвеолярном лаваже у челове-

морских свинок и интестинальных тучных кле-

ка. В типичном случае такие клетки составляют

ток крыс. Конечно, отсутствие чувствительно-

0,1-0,5% общей популяции ядросодержа-щих

сти клеток последнего типа резко контрастирует

клеток, полученных от здоровых людей.

с высокой степенью реактивности серозных

Интересно, что они обладают одинаковыми

клеток данного вида.

способностями к окрашиванию с тучными

Эффект хромогликата in vitro изучен в ряде

клетками слизистой оболочки желудочно-ки-

других животных систем. Препарат обычно

шечного тракта крыс. Эти клетки представляют

активен в отношении соединительнотканных

собой более гомогенную популяцию, нежели

тучных клеток крыс и

(кроме цитированных

популяция клеток, полученных при энзи-

исследований) подавляет выделение медиатора

матической обработке легочной паренхимы.

из размельченного легкого и срезов кожи дан-

Клетки из лаважа дозозависимо выделяют гис-

ного вида животных. Результаты исследований

тамин при стимуляции анти-IgE человека и не

на других животных системах не столь впечат-

нуждаются в предварительной пассивной сен-

ляющие. Хромогликат не оказывает действия на

сибилизации. Таким образом, в норме они

выделение медиатора из фрагментов легкого

обладают значительным количеством подобных

коровы, собаки и морских свинок, а также из

аннтител на клеточной поверхности и имеют

срезов кожи морских свинок и человека. Как

рецепторы для данного изотипа. У больных

уже отмечалось, препарат также неспособен

бронхиальной астмой при лаваже определяется

подавлять кожные анафилактические реакции

повышенное количество тучных клеток и эо-

Руководство по иммунофармакологии - часть 18