содержание .. 5 6 7 8 ..
Биологическая химия - часть 7
и т.д.), то эти данные с большой долей вероятности могут свидетельство-
вать об однородности исследуемого белка.
В основе иммунохимического метода контроля гомогенности исследуе-
мого белка лежит реакция преципитации его с соответствующей антисыво-
роткой, полученной от иммунизированных этим белком животных. Для
строгого доказательства гомогенности белка требуется одновременное
использование нескольких методов.
Не потерял своего значения и метод кристаллизации белков с использо-
ванием сульфата аммония, а также метод определения растворимости
белка. Последний, предложенный еще Д. Нортропом *, основан на правиле
фаз Гиббса, согласно которому растворимость чистого вещества при
данных условиях опыта зависит только от температуры, но не зависит от
количества вещества, находящегося в твердой фазе. Метод может быть
выполнен сравнительно легко и быстро в микромасштабах. Обычно опреде-
ляют растворимость увеличивающегося количества исследуемого белка при
постоянном количестве растворителя.
АМИНОКИСЛОТНЫЙ СОСТАВ БЕЛКОВ
Несмотря на то что первая аминокислота – глицин – была выделена А. Бра-
конно еще в 1820 г. из кислотного гидролизата желатина, полный амино-
кислотный состав белков был расшифрован только к 30-м годам XX в.
Большая заслуга в этом принадлежит работам Н.Н. Любавина, который
в 1871 г. установил, что под действием ферментов пищеварительных соков
белки расщепляются на аминокислоты.
Были сделаны два важных вывода: 1) в состав белков входят аминокис-
лоты; 2) методами гидролиза может быть изучен химический, в частности
амнокислотный, состав белков.
Для изучения аминокислотного состава белков пользуются сочетанием
кислотного (НСl), щелочного [Ва(ОН)
2
] и, реже, ферментативного гидро-
лиза ** или одним из них. Установлено, что при гидролизе чистого белка, не
содержащего примесей, освобождаются 20 различных α-аминокислот. Все
другие открытые в тканях животных, растений и микроорганизмов амино-
кислоты (более 300) существуют в природе в свободном состоянии либо
в виде коротких пептидов или комплексов с другими органическими
веществами.
α-Аминокислоты представляют собой производные карбоновых кислот,
у которых один водородный атом, у α-углерода, замещен на аминогруппу
(—NH
2
), например:
Жирная кислота
α-Аминокислота
* В лаборатории Нортропа в 1930-1931 гг. впервые получены в химически индивидуаль-
ном и кристаллическом состоянии пепсин, химотрипсин и трипсин.
** При кислотном и щелочном гидролизе белков наблюдается почти полный распад
триптофана и цистеина, поэтому для их определения предложены специальные методы.
33