Цитогенетика эмбрионального развития - часть 45

Рис.  10.12.  Общность  рисунка  линейной 

дифференцированности 

метафазных 

хромосом  из  эмбриональных  клеток  че-

ловека  при  различных  способах  воздейс-

твия: а – метод RBA (хромосомы из ФГА-

стимулированных  лимфоцитов  пуповин-

ной крови, полученных при кордоцентезе 

в  22  недели  беременности);  б  –  метод 

ник-трансляции in situ с предобработкой 

HpaII (хромосомы из эмбриональных кле-

ток  медицинского  абортуса  5/6  недель 

беременности,  слева  -  FITC+PI,  справа 

– FITC)

Рис.10.13. Метафазная пластинка из клеток цитотрофобласта хориона (аутопсий-

ный материал от медицинского абортуса, беременность 9 недель): а – ник-транс-

ляция  in  situ  с  предобработкой  ДНКазой  I  и  2-кратной  амплификацией  сигнала 

(FITC+PI), б – окраска DAPI

а)

б)

Рис.10.11. Метафазная пластинка на препарате из почки эмбриона человека (аутоп-

сийный материал от медицинского абортуса, беременность 9 недель): а –ник-транс-

ляция in situ с предобработкой ДНКазой и 2-кратной амплификацией сигнала (FITC, 

желтый; окраска йодистым пропидием); б – окраска DAPI

а)

б)

а)

б)

Рис.10.15.  Распределение  ник-трансляционного  сигнала  (желтый)  на  метафазной 

хромосоме 11 из клеток цитотрофобласта хориона после предобработки Hpa II (а) и  

ДНКазыI (б). Указаны районы Т-сегментов (11p15, 11q13, 11q23)

Рис.10.17. Различия в интенсивности флуоресценции ник-трансляционного сигнала в 

районе 15q11-q13 (предобработка Нра II) на гомологичных хромосомах из метафазной 

пластинки (аутопсийный материал почки от медицинского абортуса, беременность 

6/7 недель). Регистрация изображений каждого из гомологов в последовательности 

слева направо – DAPI, FITC+PI, FITC, PI

Рис.10.18. Метафазные хромосомы 11 из цитотрофобласта хориона и эмбриональ-

ных клеток (аутопсийный материал от медицинского абортуса, беременность 8/9 

недель) после ник-трансляции in situ c предобработкой Нра II. Гомологи хромосомы 

11 из метафазных пластинок соответствующих тканей расположены по вертикали. 

Регистрация изображений каждой из хромосом в последовательности слева направо 

– FITC+PI, FITC, PI, DAPI. Наличие ник-трансляционного сигнала в районе 11р15 от-

мечено знаком «+», отсутствие сигнала – знаком «-»

Рис.10.19.  Межтканевые  различия  по 

интенсивности  ник-трансляционно-

го сигнала в районах 1qh (a), 9qh (б) и 

16qh (в) (предобработка эндонуклеазой 

НраII).  По  горизонтали  представле-

ны  видеоизображения  гомологичных 

хромосом  из  метафазных  пластинок 

соответствующих  тканей.  Наличие 

ник-трансляционного  сигнала  в  райо-

нах конститутивного гетерохромати-

на отмечено  знаком  «+»,  отсутствие 

сигнала – знаком «-» 

Рис.10.20. Различия в характере метилирования района 16qh в клетках цитотрофоб-

ласта (кариотип 47,XY,+16). (а) гомологи хромосом 16 из ФГА-стимулированных лим-

фоцитов периферической крови родителей (окраска DAPI); (б) триада хромосом 16 из 

клеток цитотрофобласта (окраска DAPI); (в) хромосомы 16 из клеток цитотрофоб-

ласта (ник-трансляция in situ, опосредованная НрaII. Наличие ник-трансляционного 

сигнала в районе 16qh отмечено  знаком «+», отсутствие – знаком «-»

а)

б)

в)

Рис.10.22. Метафазная пластинка из ФГА-стимулированного лимфоцита перифери-

ческой крови (кариотип 46,ХХ). Иммунофлуоресцентная детекция 5-метилцитозина 

с помощью моноклональных антител и FITC-коньюгированных вторичных антител

Рис.10.23. QFH-сегментация и распределение 5-метилцитозина на метафазных хро-

мосомах из ФГА-стимулированных лимфоцитов периферической крови (совмещенная 

кариограмма).  Видеоизображения  хромосом  получены  при  последовательной  обра-

ботке  одной  метафазной  пластинки  флуорохромом  Hoechst  33258  c  контрастиро-

ванием актиномицином D (голубой) и флуоресцентной детекции 5-метилцитозина с 

помощью моноклональных антител (FITC, зеленый)

Рис.10.24.  Комплексная  характеристика  цитохимической  неоднородности  аутосом 

человека. Слева – идиограмма М-сегментации при уровне разрешения 400 сегментов на 

гаплоидный геном [145]. Три оттенка зеленого, белый и черный отражают степень обо-

гащенности 5-метилцитозином, оцененную по 5-балльной системе. Красным отмечены 

R-сегменты, сопоставимые с G-сегментами по содержанию 5-метилцитозина В центре 

– схема распределения тяжелого (Н3) и легкого (L1) изохор (уровень разрешения 850 сег-

ментов) [772]. Cправа – идиограмма R-сегментации (уровень разрешения 400 сегментов) 

[473]. Степень обогащенности GC-парами оснований и Alu-повторами отмечена различ-

ной штриховкой. Пояснения в тексте

Рис.10.25.  Метафазная  пластинка  из  ФГА-сти-

мулированного  лимфоцита  пуповинной  крови  (ка-

риотип 46,ХХ), полученной при кордоцентезе в 22 

недели беременности. Иммунофлуоресцентная де-

текция 5-метилцитозина с помощью моноклональ-

ных антител

Рис.10.26. QFH-рисунок и М-сегментация метафазных хромосом цитотрофобласта 

и эмбриональных клеток (совмещенная кариограмма). Препараты некультивирован-

ных клеток печени (а), мозга (б) и хориона (в) из аутопсийного материала от меди-

цинского абортуса 5/6 недель развития. Видеоизображения хромосом получены при 

последовательной обработке метафазной пластинки флуорохромом Hoechst 33258 c 

контрастированием актиномицином D (голубой) и флуоресцентной детекции 5-ме-

тилцитозина с помощью моноклональных антител (FITC, зеленый). Указаны районы 

хромосом, по которым зарегистрированы отличия в интенсивности флуоресценции 

АТ-МеС между гомологами

а)

б)

в)

Рис.10.27. Фрагмент метафазной пластинки из бластомера триплоидного 2-клеточ-

ного эмбриона человека. Метод QFH (а) и иммунофлуоресцентная детекция 5-метил-

цитозина с помощью моноклональных антител, FITC (б). Красной стрелкой указан 

сестринский хроматидный обмен в длинном плече хромосомы 2

Рис.10.28.  Фрагмент  метафазной  пластинки  из  бластомера  триплоидного  4-кле-

точного эмбриона человека. Метод QFH (а) и иммунофлуоресцентная детекция 5-

метилцитозина с помощью моноклональных антител, FITC (б)

а)

б)

а)

б)

Рис.10.29. Метафазные хромосомы из бластомера триплоидного 8-клеточного эмб-

риона человека. Фрагмент метафазной пластинки (а, б) и гомологи хромосомы 17 (в). 

QFH (голубой), FITC (АТ-5МеС, зеленый)

Рис.10.30. Метафазные хромосомы из бластомера триплоидного 8-клеточного эм-

бриона человека. Фрагмент метафазной пластинки (а, б) и гомологи хромосомы 1 

и 16 (в). QFH (голубой), FITC (АТ-5МеС, зеленый). На идиограмме Q-исчерченности 

гетерохроматиновые районы 1q12 и16q11.2 отмечены красным  

                      а)  

 

 

   в)  

 

 

 б)

                      а)  

 

 

   в)  

 

 

 б)