Аутотрансплантация легкого в эксперименте (Петровский Б.В.) - часть 5

Методика и техника аутотрансплантации 

67 

медиастинальной плевры во избежание двустороннего пневмото­

ракса в послеоперационном периоде. 

После мобилизации всех элементов корня правого легкого про­

изводят пробу с пережатием правой легочной артерии. Если в те­
чение 5 минут состояние животного не ухудшается, то легочную 
артерию перевязывают и пересекают. Производят перевязку и пе­
ресечение легочных вен. Для ускорения операции правый глав­
ный бронх прошивают аппаратом УАП-30 и пересекают. После уда­

ления правого легкого культю правого главного бронха плевризи-
руют медиастинальной плеврой с помощью двух-трех швов. 

После проверки герметизма в превральную полость вводят 

500 000 ед. пенициллина и стрептомицина. Грудную клетку пос­
лойно зашивают. Воздух из плевральной полости удаляют с по­
мощью временпого резинового дренажа. Прекращают искусствен­
ную вентиляцию и переводят животное на самостоятельное дыха­

ние. Операцию производят в течение 30—40 минут с минималь­
ной кровопотерей. По окончании операции и восстановлении само­
стоятельного дыхания обследование животного начинают на опе­
рационном столе. 

О ПРИМЕНЕНИИ СШИВАЮЩИХ АППАРАТОВ 

ПРИ АУТОТРАНСПЛАНТАЦИИ ЛЕГКОГО ИЛИ ДОЛИ 

В литературе имеются сообщения о применении сшивающих 

аппаратов типа АСЦ-8 при аутотрансплантации легкого (Юта-

нов, 1963, 1964; Guilmet et al., 1965; Лацис, 1967) и при алло-

трансплантации легкого (Carpinisan et al., 1969; Емельянов и со-

авт., 1970). В. Tesauro (1965, 1966) сшивал артерию и вену при ал-

лотрансплантации с помощью скобок аппаратом Накаяма. 

Авторы применяли сшивающие аппараты для соединения пе­

ресеченных концов легочной артерии. Предсердно-венозный ана­

стомоз и анастомоз бронха выполняли с помощью ручного шва. 

Авторы отмечали технические трудности при выполнении шва 
легочной артерии из-за коротких концов сосуда и хрупкости сосу­

дистой стенки. 

При изучении проблемы аутотрансплантации легкого и его до­

ли в эксперименте нами были исследованы возможности примене­
ния сосудосшивающих аппаратов (АСЦ-8 и УС-18) при различных 
вариантах операций. 

Как известно, сосудосшивающие аппараты для наложения ме­

ханического шва значительно сокращают время операции, обеспе­
чивают надежность и хорошую проходимость анастомозов. Основ­
ными противопоказаниями или ограничениями для применения 
сосудосшивающих аппаратов являются: значительная разница 

5* 

OS 

Глава вторая 

диаметров концов сшиваемых сосудов, патологически измененные 
или очень короткие концы сосуда (Петрова, 1966). 

При сшивании концов легочной артерии во время аутотранс­

нлантации с использованием сосудосшивающего аппарата типа 

АСЦ-8 возникают технические трудности вследствие образования 
очень короткого проксимального конца легочной артерии, который 

после пересечения сокращается до 0,5 см; дистальный конец легоч­
ной артерии несколько длиннее, однако при наложении аппарата и 
разбортовке трудности возникают из-за крупной ветви легочной 
артерии к верхней доле и близости ткани легкого, которые меша­
ют наложению аппарата. Эти факторы осложняют сшивание пе­
ресеченных концов легочной артерии с помощью сосудосшиваю­
щего аппарата. Что касается раздельного сшивания вен при ауто-
трансплантации целого легкого сосудосшивающим аппаратом, то 
из-за коротких концов разбортовка их на аппарате и сшивание не 

представляются возможными. 

Следовательно, механический шов с помощью сосудосшиваю­

щего аппарата АСЦ-8 в настоящее время не может быть реко­

мендован при аутотрансплантации целого легкого. 

В двух экспериментах сосудосшивающие аппараты АСЦ-8 

и УС-18 были применены при аутотрансплантации нижней доли 
левого легкого с удалением верхней и сердечной долей. 

Сшивание пересеченных концов легочной артерии с помощью 

аппарата АСЦ-8 осуществляют без каких-либо технических труд­
ностей, так как концы легочной артерии при этом варианте опе­
рации имеют достаточную длину для разбортовки сосуда. 

При пересечении нижней легочной вены при этой операции 

создаются короткие концы, которые не могут быть разбортованы 

на аппарате АСЦ-8. Сшивание с помощью аппарата УС-18 концов 
пересеченной нижней легочной вены также было затруднено. Оба 
животных погибли в ближайшие дни после операции. В области 
артериального шва отмечена полная состоятельность анастомоза, 
а в области венозного анастомоза обнаружен массивный тромб, 

полностью обтурирующий просвет вены и свисающий в просвет 

левого предсердия. 

Таким образом, при аутотрансплантации нижней доли приме­

нение сосудосшивающих аппаратов АСЦ-8 и УС-18 дает неудов­
летворительные результаты из-за наличия коротких концов вены 
с тромбозом венозного анастомоза в послеоперационном периоде. 

Сшивающий аппарат типа АСЦ-8 был применен в 7 опытах при 

гетеротопической аутотрансплантации нижней доли правого лег­
кого в левую плевральную полость на место удаленной нижней 
доли или целого легкого. 

Несмотря на то что при этой операции имелись несколько бо­

лее длинные концы сосудов, также отмечены технические труд-

Методика и техника аутотрансплантации 

69 

ности при сшивании концов пересеченных легочной артерии и 
вены, так как при разбортовке концов сосудов на аппаратах иног­
да повреждалась стенка сосуда, после прошивания отмечалось 

кровотечение, поэтому часто приходилось накладывать дополни­
тельные швы. 

Следовательно, существующие в настоящее время модели со-

судосшивающих аппаратов АСЦ-8 и УС-18 могут быть примене­

ны при аутотрансплантации легкого и его доли только для соеди­
нения концов пересеченной легочной артерии при некоторых ва­
риантах операции, когда длина этих концов достаточна для разбор­
товки артерии. 

Опыт успешного применения односкобочного сшивающего ап­

парата с иглообразными матрицами (СБ-2) при комбинирован­

ных резекциях бронха и легочной артерии в эксперименте (Пе-

рельман и соавт., 1968; Петрова и соавт., 1972; Rabinowitsch et 
al., 1973) позволяет нам рекомендовать применение этого аппара­
та при различных видах циркулярного шва бронха, в том числе 
и при аутотрансплантации легкого и его доли в эксперименте. 

Глава третья 

МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ 

ЖИВОТНЫХ 

Функциональные и морфологические исследования при ауто-

трансплантации легкого и его доли имеют важное значение для 
получения информации о состоянии функции и структуры легкого 
до и после операции. 

В данной главе общеизвестные методы исследования приведе­

ны кратко, так как подробное изложение их дано в специальных 

руководствах. Более детально описаны методы исследования, раз­

работанные специально для решения ряда вопросов в наших экс­
периментах, или методики, по которым имеется сравнительно ма­

ло публикаций в литературе. 

НАРКОЗ ПРИ РЕНТГЕНОЛОГИЧЕСКИХ 

И ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ИССЛЕДОВАНИЯХ 

Проведение клинико-рентгенологических (бронхоскопия, рент­

генография, бронхография, ангиопульмонография) и функци­
ональных (спирография, бронхоспирографпя, бронхопневмотахо-
графия и т. д.) исследований осуществляют у собак только под нар­

козом. Для этих целей применяют внутримышечный морфин-тио-

пенталовый наркоз. 

Для премедикации за 30—40 минут до наркоза вводят подкожно 

морфин (1 мл 1%-ного раствора на 1 кг веса), 1 мл 0,1%-ного ра­
створа солянокислого атропина и 0,5 мл 10%-ного раствора кофе­

ина. После введения морфина у животных возникает рвота, дефе­

кация и усиленная саливация, а затем они становятся вялыми, 
сонливыми. 

Для проведения наркоза внутримышечно вводят тиопентал-

натрий в 5%-ном растворе (30 мг на 1 кг веса животного). Через 

10—15 минут животные засыпают и могут быть взяты для исследо­

вания. Внутримышечный морфин-тиопенталовый наркоз по этой 
методике позволяет получить ровный поверхностный сон в тече­
ние 1 —1,5 час. (наркоз в стадии аналгезии или на I уровне хи­
рургической стадии). При проведении наркоза по этой методике 
введение тубуса бронхоскопа, эндотрахеальная и эндобронхиаль-

ная интубации осуществляются легко. Если исследование затяги-

Методика исследования животных 71 

вается и животное начинает просыпаться, то вводят дополнитель­

но внутримышечно дробными дозами тиопентал-натрий (5 мг на 

1 кг веса животного). При проведении интубации под внутримы­

шечным морфин-тиопенталовым наркозом мышечные релаксанты 
не вводят, так как они могут исказить результаты, получаемые 
при исследовании функции внешнего дыхания. 

РЕНТГЕНОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 

Рентгенологические исследования для контроля за изменения­

ми аутотрансплаптированного легкого и его доли, а также для изу­

чения топографических соотношений органов грудной полости по­

сле этих операций прижизненно осуществляют с помощью следу­
ющих методик: 1) рентгенографии грудной клетки в прямой и 

боковой проекциях; 2) бронхоскопии с бронхографией в сочетании 
с рентгенотелевизионной бронхокинематографией; 3) ангиокино-
пульмонографии. 

Все рентгенологические исследования производят под поверх­

ностным внутримышечным морфин-тиопенталовым наркозом. 

Рентгенографию органов грудной клетки производят в прямой 

проекции при фиксации животного на спине на аппарате РУМ-780 
при следующих технических условиях: 55 KV, 15 мА/сек. 

Бронхоскопию с бронхографией проводят в рентгеновском ка­

бинете на аппарате РУМ-780 или на рентгенотелевизионной уста­
новке фирмы «Филлипс», снабженной кинокамерой, рассчитанной 

на применение 30 м рулонов 35-миллиметровой перфорированной 
флюорографической пленки типа РФ-3. 

Животное укладывают на оперированную сторону. С помощью 

бронхоскопа Брюнингса осматривают трахею, главные бронхи, ли­

нию анастомоза, долевые бронхи и устья сегментарных бронхов. 
После осмотра бронхиального дерева в устье левого главного брон­
ха вводят катетер. 

В качестве контрастного вещества используют смесь 50%-ных 

водных растворов йодорганических веществ (кардиотраста или 

дийодона) и пищевого желатина — желйодон (Фельдман, 1966). 

Контрастную смесь нагревают на водяной бане при температуре 

37—40°, набирают в пластмассовый шприц и вводят через катетер. 

В случае применения бронхокинематографии рентгенокино-

съемку со скоростью 24 кадра в секунду начинают с момента по­
ступления контрастного вещества в субсегментарные бронхи. По­
сле тугого заполнения субсегментарных и более мелких бронхов 
производят снимки в боковой и прямой проекциях при следующих 

технических условиях: 60 KV, 10 мА/сек. После окончания иссле­

дования контрастную массу удаляют из бронхов через катетер с 
помощью электроотсоса. 

72 

Глава третья 

Преимуществом применения у собак в качестве контрастных 

веществ водных растворов йодорганических соединений и пищево­
го желатина является возможность быстрого удаления рентгено-
контрастных частей (через 10 минут) и полного удаления в тече­
ние суток остатков введенной массы. Животные хорошо переносят 
бронхографию, контрастное вещество не остается в бронхах, и это 
позволяет повторять бронхографическое исследование с целью ди­

намического наблюдения. 

Ангиокинопульмонографию производят также на рентгеноте-

левизионной установке фирмы «Филлипс» с кинокамерой. Рентге-
ноконтрастный зонд через бедренную вену под контролем экрана 
вводят в легочную артерию. В качестве контрастных веществ ис­

пользуют 70%-ный кардиотраст или 70%-ный дийодон. Киносъем­

ку производят со скоростью 48 кадров в секунду при следующих 
технических условиях: 40—45 KV, 10 мА/сек. 

Методика посмертных рентгенологических исследований 

аутотрансплантированного легкого или доли 

Бронхография. Посмертную бронхографию осуществляют пос­

ле извлечения сердечно-легочного препарата. В качестве контраст­
ного вещества используют водную взвесь сернокислого бария, ра­

стертую в ступке до сливкообразной консистенции. Через трахею 
легкие раздувают воздухом, а затем с помощью воронки вводят 

в трахеобронхиальное дерево контрастную массу. Рентгенограм­

мы производят при следующих технических условиях: 125 kV, 
10 мА/сек, расстояние от пленки до фокуса трубки 2 м. Снимки 
делают на пленку без усиливающих экранов. 

Ангиография легочной артерии. Констрастное исследование ле­

гочной артерии производят на сердечно-легочном препарате, из­

влеченном из грудной полости. Выделяют ствол легочной артерии, 

через правый желудочек вводят специальный катетер с канюлей, 
который фиксируют в легочной артерии двумя лигатурами. В ка­
честве контрастного вещества используют йодолипол, который 
вводят через катетер под равномерным давлением. Рентгеногра­
фию осуществляют при тех же технических условиях, что и брон­
хографию. 

Рентгеноконтрастное исследование бронхиальных артерий. Для 

изучения восстановления кровоснабжения аутотрансплантирован­

ного легкого по системе бронхиальных артерий производят по­
смертное рентгеноконтрастное исследование бронхиальных артерий. 

Авторы, изучавшие бронхиальное кровоснабжение в экспери­

менте при различных операциях и аутотрансплантации легкого, 
использовали разные методы контрастирования бронхиальных ар-

Методика исследования животных 

73 

терий (Щапк et al., 1966; Milhiet et al., 1968; Neveux et al., 1968; 
Берестецкий, 1969; Mills et al., 1970). Мы выбрали простую мето­

дику исследования бронхиальных артерий, которая позволяла по­
лучать хорошее контрастирование в различные сроки после опе­
рации. 

После проведения комплекса функциональных и рентгенологи­

ческих исследований животное забивают быстрым внутривенным 

введением 2,0 10%-ного раствора тиопентала-натрия и 500 мг 
листенона, фиксируют на секционном столе в положении на спине. 
Торакотомию производят путем пересечения реберных хрящей 
справа и слева с удалением грудины. Производят осмотр плевраль­
ных полостей, сращения не разделяют. Аорту перевязывают двумя 
лигатурами у места отхождения от сердца и над диафрагмой. 
Далее перевязывают ствол легочной артерии и крупные ветви 
дуги аорты (кроме плечеголовной артерии, которую выделяют и 

берут на держалки). 

Смесь для контрастного исследования бронхиальных артерий готовят 

следующим образом: 72 г углекислого свинца (основного), растертого в фар­

форовой ступке и просеянного через 4 слоя марли, размешивают, постепенно 
добавляя 30 мл воды; в другой посуде заранее растворяют 5 г желатина в 

20 мл воды, подогревая на водяной бане; после этого смешивают углекислый 

свинец с раствором желатина. 

• Контрастную смесь помещают в герметический сосуд, который 

постоянно встряхивают, и через систему, снабженную ртутным ма­
нометром, с помощью канюли, введенной в плечеголовную артерию, 
вводят в аорту под давлением 140 мм рт. ст. Давление поднимают 
постепенно и стабильно удерживают его на одном и том же уровне 

в течение 40 минут. После этого пережимают резиновую трубку от 
канюли, оставляют ее в аорте, а систему отключают. 

Животное оставляют в прохладном помещении на 12 часов. 

Контрастная масса, введенная в аорту, проникает в сосудистую 
систему, отходящую от аорты, до мельчайших разветвлений сосу­
дов и застывает. Через 12 часов удаляют сердечно-легочный ком­
плекс. Трахею и легкие отделяют от сердца и аорты. В области 

бифуркации трахеи и корней легких удаляют лимфатические узлы. 

Рентгенограммы производят на аппаратах «Diagnomax» или 

«Durometa» с использованием микрофокуса трубки (3 мм

2

). Усло­

вия съемки следующие: 125 kV, lO мА/сек, расстояние от пленки 

до фокуса трубки 2 м. Снимки делают на пленку без усиливающих 
экранов. Полученные рентгенограммы изучают обычным путем и 
с применением лупы (Х2,5). Сравнивают сосудистую сеть ауто-
трансплантированного и интактного легких. 

В одном наблюдении была произведена наливка сосудов ауто-

трансплантпрованного легкого 5%-ным раствором туши с желати-

74 

Глава третья 

ном с последующим просветлением препарата в глицериновой 
батарее возрастающей крепости. 

При изучении восстановления кровоснабжения по системе 

бронхиальных артерий после аутотрансплантации легкого посмерт­
ное контрастное исследование бронхиальных артерий, по нашему 

мнению, имеет ряд важных преимуществ по сравнению с прижиз­

ненной ангиографией по следующим соображениям: 1) при при­
жизненной ангиографии трудно контрастировать изолированно 

бронхиальные артерии, так как при этом наслаиваются межребер­
ные артерии, которые затрудняют интерпретацию снимка; 2) селек­

тивная ангиография бронхиальных артерий на живой собаке тех­

нически трудна из-за малого их калибра; 3) при контрастировании 

бронхиальных артерий аутотрансплантированного легкого на жи­
вой собаке очень трудно выявить бронхиальные артерии противопо­
ложной, интактной стороны, которые служат для сравнения. Поэто­

му для изучения восстановления кровоснабжения по системе брон­

хиальных артерий после аутотрансплантации легкого в экспери­

менте предпочитают посмертное контрастирование этих сосудов. 

ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ДЫХАНИЯ, 

ГАЗОВ КРОВИ И КИСЛОТНО-ЩЕЛОЧНОГО СОСТОЯНИЯ 

Для изучения функции аутотрансплантированного легкого и его 

доли использован комплекс современных методов исследования, 

который применяется в настоящее время в экспериментальной и 

клинической пульмонологии (Fleisch, 1956; Bartels et al., 1959; 

Комро и соавт., 1961; Агапов, 1968; Навратил и соавт., 1967; Тели-

-ченас, 1968; Ulmer et al., 1970). 

Исследование функционального состояния легких было прове­

дено с применением спирографии и бронхоспирографии, электро­

миографии дыхательных мышц, бронхопневмотаграфии, а также 

с изучением рефлекса Геринга — Брейера. Одновременно изучали 
газы крови и кислотно-щелочное состояние. 

Информация, полученная при применении этих методов, 

позволила дать оценку функционального состояния аутотрансплан­
тированного легкого и его доли до операции и на разных этапах 
послеоперационного периода, а также в условиях функциональ­

ных нагрузок и вмешательств на противоположном интактном 
легком. 

Спирографию и бронхоспирографию производят под поверхност­

ным внутримышечным морфин-тиопенталовым наркозом на оте­
чественном бронхоспирографе закрытого типа модели СГ-1М. Ис­
следование под наркозом создает однотипные условия, которые 

могут быть неоднократно повторены и не зависят от воздействия 

Методика исследования животных 

75 

окружающей среды на подопытное животное. Исследования произ­

водят в стандартном положении животного на спине с фиксиро­
ванной челюстью. 

После интубации однопросветной трубкой к ней через переход­

ник подключают систему спирографа. После адаптации животного 

в течение 5—10 минут включают кимограф, воздуходувку и отмет­

чик времени, одновременно с этим дыхательные пути подопытного 

животного соединяют непосредственно с замкнутой системой ап­
парата, заполненной атмосферным воздухом. Спирографическую 
запись производят со скоростью продвижения бумажной ленты 

50 мм/мин в течение 5—7 минут. После этого удаляют однопро-
светную трубку и производят интубацию двупросветной трубкой, 

меняют воздух в колоколах спирографов и подключают трубки к 

обоим спирографам. 

Производят одновременную спирографическую регистрацию 

дыхания каждого легкого отдельно в течение 3—5 минут, затем от­
ключают правое (интактное) легкое на 7—10 минут. В случае не­
обходимости через 10—15 минут исследование повторяют после 
смены воздуха в колоколах спирографов. 

При спирографии и бронхоспирографии изучают следующие показатели: 

частоту дыхания (ЧД), дыхательный объем (ДО), минутный объем дыхания 

(МОД), поглощение кислорода (ПОг), коэффициент использования кислоро­

да (КИ0

2

). Частоту дыхания определяют подсчетом дыхательных циклов 

за 2—3 минуты с последующим делением на соответствующее число минут. 

Дыхательный объем вычисляют путем умножения величины амплитуды од­
ного вдоха (выдоха), в мм, на коэффициент, обозначающий эквивалент 1 мм 

емкости аппарата (эта величина у спирографа СГ-1М составляет 20 мл воз­

духа) . В случае неравномерного дыхания ДО находят умножением числа мм 

кривой записи вдоха (выдоха) за 2 минуты на коэффициент, обозначаю­

щий эквивалент 1 мм емкости аппарата, с последующим делением на час­
тоту дыхания за то же число минут. МОД вычисляют умножением ДО на 
ЧД за минуту. П0

2

 определяют умножением высоты объема записи дыхания 

с начала и до конца исследования в мм на коэффициент, обозначающий 

эквивалент 1 мм емкости аппарата, с последующим делением на время ис­

следования в минутах. КИОг вычисляют путем деления количества ПОг 

(в мл за минуту) на величину МОД (в л за минуту). 

При расчете сппрограмм все фактические показатели выра­

жают в абсолютных цифрах, приравнивая их к стандартным фи­
зическим условиям, т. е. к сухому газу при температуре 0° и 
760 мм рт. ст., путем применения факторов пересчета (Сыркина, 

1956; Комро и соавт., 1961; Агапов, 1968; Навратил и соавт., 1967; 
Теличенас, 1968). Это позволяет сравнивать полученные величины 

вне зависимости от разности температурных условий и атмосфер­

ного давления. 

70 

Глава третья 

При определении процентного соотношения участия каждого 

легкого суммированную величину вентиляции обоих легких при­
нимают за 100%. Вентиляцию и газообмен аутотрансплантпро-
ванной нижней доли легкого определяют путем вычисления про­
цента участия доли в общей вентиляции и газообмене после опе­
рации. 

Функциональную пробу при бронхоспирографии производят 

путем отключения канала двупросветной трубки, относящегося к 
интактному легкому. 

Эта проба, которую считают в определенной степени имитаци­

ей пульмонэктомии, позволяет выявить потенциальную способ­
ность организма перенести операцию удаления противоположно­
го, интактного легкого. Однако такая функциональная проба яв­
ляется большей нагрузкой, чем пульмонэктомия, так как при ее 
проведении интактное легкое отключается из вентиляции, но не 
прекращается кровоток по его сосудам. В связи с этим кровь, про­
текающая через сосуды интактного легкого, не обогащается кис­
лородом, создается «артерио-венозный шунт» больших объемов, 
снижается насыщение артериальной крови кислородом, и повы­

шается насыщение всей ее массы углекислотой. В ответ на изме­
нение в химическом составе крови дыхательный центр реагирует 
увеличением вентиляции и газообмена. Если компенсаторные 
возможности аутотрапсплантированного легкого достаточны, то 
вскоре показатели газового состава восстанавливаются или, сни­
зившись незначительно, устанавливаются на новом уровне, доста­
точном для обеспечения окислительно-восстановительных процес­
сов в организме. 

При тщательном соблюдении методических условий проведе­

ния наркоза и исследования функции внешнего дыхания живот­
ные удовлетворительно переносят эту процедуру, несмотря на 
частые повторные исследования, особенно в раннем послеопера­
ционном периоде. 

Бронхопневмотахография. Для исследования механических 

свойств легочной ткани и бронхиального дерева после аутотранс-

плантации легкого в эксперименте была использована бронхо­
пневмотахография, впервые примененная нами совместно с 
В. Д. Колесниковым и Ю. В. Кипренским для этой цели в 1964 г. 

В отличие от общей пневмотахографии методика бронхопневмо-
тахографии дает возможность сравнивать показатели обоих лег­
ких, полученные в одинаковых условиях, и, таким образом, поз­
воляет выявить изменения механики дыхания после аутотранс-

плантации левого легкого. 

Запись бронхопневмотахограмм производят с помощью уни­

версального пневмотахографа ПТ-1 (конструкции ВНИИМИО). 

Под морфин-тиопенталовым наркозом в положении животно-

Методика исследования животных 77 

го на спине производят интубацию бронхов двупросветной трубкой. 

В просвет пищевода вводят тонкий пищеводный зонд, снабжен­
ный тонкостенным надувным баллончиком. Зонд устанавливают 
таким образом, чтобы резиновый баллончик находился в нижней 
трети пищевода. Это наиболее удобное место, так как здесь мень­

ше передаются сердечные толчки, которые дают дополнительные 
волны на кривой внутрипищеводного давления и затрудняют ее 
расшифровку. После проверки правильности положения интуба­
ционной трубки и пищеводного зонда производят запись бронхоспи-
рограммы. 

По окончании бронхоспирографии к одному из каналов дву­

просветной трубки присоединяют трубку пневмотахографа. Вви­
ду того, что диаметр трубки пневмотахографа намного больше, чем 
интубационной, нами был сконструирован специальный резино­
вый конус-переходник для соединения концов обеих трубок. Этот 
переходник обеспечивал плавный переход от более узкого диа­
метра интубационной трубки к более широкому трубки пневмо­
тахографа. 

Вначале записывают пневмотахограмму аутотрансплантпро-

ванного легкого, затем интактного. После записи нескольких цик­
лов спокойного дыхания на скорости лентопротяжного механиз­

ма 12,5 мм/сек производят запись внутриальвеолярного давления 
методом кратковременных перекрытий воздушного потока. Сна­
чала несколько перекрытий делают на вдохе, а затем на выдохе. 

Скорость движения ленты при этом 25 мм/сек. Последним запи­
сывают внутрипищеводное давление на скорости 50 мм/сек. 

Для записи спокойного дыхания используют манометр М-20, 

внутриальвеолярного давления — манометр М-100, внутрипище­
водного — М-700 (цифры показывают максимально допустимые 
для каждого манометра давления в см вод. ст.). Во время записи 
спокойного дыхания и внутриальвеолярного давления второй 
канал интубационной трубки оставляют открытым. При записи 
внутрипищеводного давления второй канал трубки перекрывают 
на выдохе и только после этого устанавливают нулевую отметку 
датчика. Этим устраняют влияние на внутрипищеводное давление 
изменений внутриплеврального давления противоположной сто­
роны. 

Ввиду того, что животное невозможно заставить сделать фор­

сированный вдох или выдох, применяют следующий прием: для 
получения форсированного вдоха оба канала интубационной труб­

ки перекрывают на выдохе и вновь открывают лишь на период 

следующего выдоха, и так повторяют 3—4 раза. При следующей 
попытке животного сделать вдох зажимы снимают, и животное 
делает несколько глубоких вдохов, которые и записывают пнев-

мотахографом. Для получения форсированного выдоха применяют 

78 

Глава третья 

тот же прием, только интубационную трубку пережимают в кон­
це вдоха. 

Введение в дыхательные пути интубационной трубки изменя­

ет условия вентиляции и увеличивает сопротивление дыханию. 
Но так как оба канала интубационной трубки имеют одинаковые 
диаметры, оба легких находятся в одинаковых условиях и показа­
тели пневмотахограммы, полученные в этих условиях, вполне со­
поставимы. 

При оценке результатов исследования анализируют не абсо­

лютные цифры, а сравнивают показатели пневмотахограммы каж­

дого легкого в отдельности, записанные в идентичных условиях.. 
При сравнении все показатели правого (интактного) легкого при­
нимают за единицу. Это дает возможность выразить показатели 
пневмотахограммы аутотрансплантированного левого легкого в. 
десятичных дробях, что, на наш взгляд, является весьма удобным. 
Помимо наглядного представления о соотношении одних и тех же 
показателей в обоих легких это облегчает статистическую обра­
ботку полученного материала. 

Пневмотахограммы представляют собой ряд кривых и ломаных линий, 

записанных световым лучом на специальную фотобумагу, чувствительную к 
ультрафиолетовой части спектра. Запись проявляют прп рассеянном дневном 

свете без применения проявляющих растворов. 

По данным бронхопневмотахограммы определяют и рассчиты­

вают следующие показатели функции внешнего дыхания: макси­
мальные скорости воздушной струи на вдохе и выдохе при спо­
койном дыхании, частоту дыхания, объем вдоха и выдоха, ми­
нутный объем вентиляции, сопротивление дыханию воздухонос­
ных путей, максимальные скорости воздушной струи на вдохе п 

выдохе при форсированном дыхании, внутриальвеолярное давле­
ние, растяжимость и эластичность легких (Ulmer et al., 1970). 

Для изучения динамической растяжимости легких использо­

ван метод К. V. Neergaard, К. Wirz (1927). В норме у человека 
величина растяжимости легких значительно колеблется и равня­

ется 0,11—0,33 л/см вод. ст. На величину растяжимости легких 

влияет помимо состояния легочной ткани величина самих легких. 

Поэтому у мужчин растяжимость несколько больше, чем у женщин 
и детей (Cook et al., 1957). Эта же закономерность относится и к 

лабораторным животным (Agostoni et el., 1959). 

Методика электромиографических исследований дыхания-

Исследования электрической активности дыхательных мышц про­
ведены для изучения функционального состояния дыхательного-
центра после аутотрансплантации левого легкого. 

В каждом опыте обследование повторяют на одних и тех же-

бодрствующих животных при поверхностном внутримышечном 

Методика исследования животных 

79 

морфин-тиопенталовом наркозе в фиксированном положении на 
спине. 

Отведение биотоков от межреберных мышц осуществляют пла­

стинчатыми электродами (6 X 12 мм). Электроды накладывают 
симметрично справа и слева в 8-м и 9-м межреберьях по средней 
подмышечной линии на выбритую и обработанную спиртом и эфи­

ром кожу. Так как пластинчатые электроды занимают сравнитель­
но большой участок поверхности межреберья, то через эти элек­
троды передается импульсация как от инспираторных, так и от 
экспираторных мышц. Поэтому в зависимости от соотношения 
электрической активности в этих группах мышц регистрируют 
либо потенциалы действия инспираторных, либо потенциалы экс­
пираторных мышц. Для лучшего контакта и проводимости биото­
ков поверхность электродов смазывают специальной электролити­

ческой пастой. 

Биотоки регистрируют на фотобумагу трехканальным электро­

миографом «ДИЗА». На первый канал отводят биотоки межребер­
ных мышц левой стороны, на третий — правой стороны, на вто­

рой — показания интегратора. Интегрированная электрическая ак­
тивность межреберных мышц правой и левой сторон отмечается 
в виде двух кривых. Для учета фаз дыхательного цикла одновре­
менно с помощью пневмографа на фотобумаге записывают дыха­
тельные движения грудной клетки. 

Для получения более достоверной информации запись электро-

миограмм повторяют 2—3 раза и дополнительно проводят конт­
роль, изменяя положение датчиков-электродов. При анализе элек-
тромиограмм учитывают синхронность, частоту, продолжитель­
ность, форму и амплитуду залпов импульсов биопотенциалов. 

Биотоки от межреберных мышц отводят как при дыхании воз­

духом, так и при воздействии специфических стимуляторов дыха­

ния 6%-ным СОг или 10%-ным Ог. Собаки в бодрствующем состоя­
нии дышат газовой смесью через маску с дыхательными клапана­
ми, под наркозом — через интубационную трубку. Газовые смеси, 

содержащие 6%-ный СОг или 10%-ный Ог, применяют в качестве 
функциональной нагрузки для выявления компенсаторных воз­

можностей дыхательного центра и аппарата внешнего дыхания 

после аутотрансплантации левого легкого. 

Одновременно с регистрацией биопотенциалов инспираторных 

и экспираторных мышц учитывают частоту, глубину и минутный 

объем дыхания с помощью газовых водяных часов. 

Методика исследования рефлекса Геринга — Брейера. Ауто­

трансплантации легкого сопровождается полным пересечением 
всех структур и нервных волокон корня легкого. При этом преры­
вается афферентный путь рефлекса Геринга — Брейера, который 
представляет особый интерес при изучении иннервации легкого, 

80 

Глава третья 

так как он является наиболее простым тестом для оценки функци­
ональной целостности афферентных нервных волокон блуждающе­
го нерва. Для исследования рефлекса Геринга — Брейера приме­

няются в настоящее время различные методы. 

В. A. Portia et al. (1960), М. J. Trummei- et al. (1964, 1965), 

J. D. Hardy et al. (1966) и др. проводили изучение рефлекса Ге­
ринга — Брейера путем временной окклюзии бронха на высоте 
вдоха. Другие авторы (Peset et al., 1969) исследовали легочные 
рефлексы на вдыхание путем создания положительного давления 
на колокол бронхоспирографа. При этом оказалось, что интактное 
легкое реагирует на увеличение груза уменьшением частоты дыха­
ния, а при значительном увеличении груза паступает задержка 

дыхания до 1 минуты. W. L. Secrist et al. (1967) получали реф­

лекс Геринга — Брейера путем вдувания воздуха в легкое под 
давлением 20 см вод. ст. при бронхоспирометрии. Наиболее физи­
ологичным методом изучения рефлекса Геринга — Брейера в на­
стоящее время является методика кратковременного отключения 
бронха на высоте вдоха. 

Рефлекс Геринга—Брейера воспроизводят под поверхностным 

внутримышечным морфин-тиопенталовым наркозом при интуба­

ции бронхов двупросветной трубкой. Вначале осуществляют брон-
хосппрографию с отключением противоположного (интактного) 
и аутотрансплантированного легких. Бронхоспирография позволя­
ет окончательно убедиться в правильном положении интубацион-
ной трубки с полным разобщением главных бронхов и герметиз-
мом системы. 

На высоте вдоха производят кратковременное отключение лег­

кого путем пережатия одного из каналов интубацпонной трубки 

(на время, соответствующее одному вдоху и выдоху). В результа­

те возникает тормозной рефлекс Геринга — Брейера, выражаю­
щийся в остановке дыхания противоположного легкого на вдохе. 

Механизм рефлекса следующий: происходит раздражение аффе­
рентных волокон блуждающего нерва, возникает импульс, который 

поступает в дыхательный центр, и рефлекторная дуга по диафраг-
мальному нерву заканчивается в диафрагме, вызывая ее расслаб­

ление, что обусловливает прекращение дыхания на один вдох, пос­

ле чего следует выдох. Если при кратковременном отключении 
легкого остановка дыхания не возникает или происходит лишь бо­

лее глубокий выдох, то это означает, что рефлекс Геринга — Брейе­
ра отсутствует. Обычно во время бронхоспирографии производят 
несколько повторных исследований у одного и того же живот­
ного. 

Исследование насыщения крови кислородом и кислотно-ще­

лочного состояния. Взятие крови для исследования проводят без 

применения жгута и без предварительного введения наркотиче-

Методика исследования животных 81 

ских препаратов. Животных фиксируют на столе в положении 

на спине. После привыкания к окружающей обстановке и к пер­

соналу, особенно после повторных исследований, животные 
спокойно переносят необычную обстановку и процедуру иссле­

дования. Через 15—20 минут дыхание становится ровным и спо­

койным. 

Артериальную кровь получают путем быстрой пункции бед­

ренной артерии ниже паховой складки в точке проекции сосуда, 
ориентируясь на его пульсацию. Для получения венозной крови 
пунктируют скакальную вену без применения жгута. У легко­

возбудимых собак пункцию сосудов производят под местной ане­

стезией 1%-ным новокаином в количестве 3—5 мл. 

Взятие крови в количестве 5 —10 мл осуществляют шприцем 

в анаэробных условиях под вазелиновое масло. Кровь помещают 
в химически чистый пузырек под слой вазелинового масла и 
тщательно размешивают с 0,1 мл гепарина. 

Взятие крови при проведении функциональной пробы с от­

ключением правого (интактного) легкого при бронхосппрогра-
фии производят в условиях морфин-барбитурового наркоза. 

Для исследования функции аутотрансплантированной ниж­

ней доли производят пункции легочной артерии и нижней легоч­
ной вены до операции и после ее окончания на операционном 
столе. Пункцию легочных сосудов осуществляют иглой Дюфо со 

шприцем «Рекорд» под слой стерильного вазелинового масла 
без пережатия сосудов, непосредственно из потока протекающей 
крови. Пункцию нижней легочной вены производят на уровне 
сегментарной легочной вены. 

Первую пробу крови берут после торакотомии под внутримышечным 

морфин-нембуталовым наркозом (стадия IIIi) при постоянной искусствен­

ной вентиляции Ог по полузакрытому контуру в ритме 15 сжатий дыхатель­
ного мешка в минуту. Эти пробы крови принимают условно за исходные, 

хотя они отражают изменения, возникающие в результате торакотомии. 

Взятие второй пробы крови осуществляют через 10 минут после окон­

чания аутотрансплантации нижней доли и расправления легкого при искус­

ственной вентиляции легких 0

2

 в указанном выше режиме. 

Для изучения компенсаторных возможностей аутотрансплан­

тированной нижней доли непосредственно после окончания 
операции, при открытой грудной клетке, проводят пробы с от­
ключением аутотрансплантированной нижней доли и правого 

(интактного) легкого. Отключение осуществляют при обычном 

режиме искусственной вентиляции путем пережатия одного из 
каналов интубационной трубки. Взятие проб крови осуществля­

ют путем пункции грудной аорты иглой Дюфо в анаэробных ус­
ловиях под слой вазелинового масла. Определение насыщения 

6 Аутотрансплантация легкого 

82 Глава третья 

крови 0

2

 производят кюветным способом на отечественном оксиге-

мометре модели 0-38 завода «Красногвардеец». 

На основании полученных показателей насыщения кислоро­

дом артериальной (НЬОгА) и венозной (НЬ0

2

В) крови вычисляют 

артерио-венозное различие по 0

2

 (А — В). 

При исследовании кислотно-щелочного состояния крови опре­

деляют с помощью микро-рН-метра Аструпа фирмы «Радиометр» 

(Дания) следующие показатели: концентрацию водородных ио­

нов (рН), парциальное давление углекислоты (рС0

2

), стандарт­

ные бикарбонаты (SB), избыток оснований (BE) по принятым 

методикам (Агапов, 1968). 

ИССЛЕДОВАНИЕ СИСТЕМЫ СВЕРТЫВАНИЯ КРОВИ 

Состояние системы свертывания крови оценивалось по следу­

ющим показателям: время свертывания крови по Ли-Уайту; время 
рекальцификации плазмы по методу Хорна, а также по Бергергоф-
фу и Рока; протромбиновое время по Квику; тромбиновое время 
по Перлику; толерантность плазмы к гепарину по Гормсену; вре­
мя свободного гепарина по Сирмаи; определение фибриногена и 
фибринолитической активности по методу Бидвелла в модифика­
ции Г. В. Андреенко; тромбоэластография на аппарате Хартерта. 

Мы применяли тромбоэластографический метод анализа актив­

ности первой, второй и третьей фаз свертывания крови по Хартеру, 

а также оценку максимальной амплитуды тромбоэластограммы и 

лизиса структуры сгустка по Г. А. Якунину и Г. Б. Волковойнову. 
Об общей тенденции изменений свертывания крови судили по тром-
боэластографическому показателю  ( г + К ) , который характеризу­

ет три фазы свертывания крови (Филатов, Котовщикова, 1963). 

Взятие крови для исследования производят перед операцией 

(из бедренной артерии). Во время аутотрансплантации левого лег­

кого взятие крови осуществляют путем пункции левого предсер­
дия в следующие моменты: после мобилизации элементов корня 
легкого, через 5 минут после внутривенного введения гепарина и к 

концу операции, перед зашиванием грудной клетки. 

В опытах с аутотрансплантацией нижней доли левого легкого 

при удалении верхней и сердечной долей взятие крови произво­
дят путем пункции легочной артерии и нижней легочной вены до 

и после аутотрансплантации доли.