содержание   ..  1  2  3  4  ..

В качестве вакцин используются антигены разного происхождения, это могут быть живые и убитые бактерии, вирусы, анатоксины, а также антигены, полученные с помощью генной инженерии и синтетические.

От состава вакцин во многом зависят их иммунобиологические свойства, способность индуцировать специфический иммунный ответ. Однако некоторые составные части вакцин могут вызвать и нежелательные реакции, что следует учитывать при проведении иммунизации.

Существующее многообразие вакцин можно подразделить на две основные группы: на живые и убитые (инактивированные) вакцины. В свою очередь какждая из этих групп может быть разделена на подгруппы [11].

1. Живые вакцины - из аттенуированных штаммов возбудителя (штаммы с ослабленной патогенностью).

2. Убитые вакцины
- Молекулярные, полученные путем:
а) биологического синтеза;
б) химического синтеза.
- Корпускулярные:
а) из цельных микробов;
б) из субклеточных надмолекулярных структур.

В последние годы созданы синтетические молекулярные вакцины, а так же плазмидные (генные) вакцины.

Постановка вопроса о предпочтительном выборе либо живых, либо убитых вакцин нам кажется неоправданной, так как в каждом конкретном случае эти принципиально разные препараты имеют свои преимущества и свои недостатки.

Традиционные вакцины

а) инактивированные

Инактивированные вакцины получают путем воздействия на микроорганизмы химическим путем или нагреванием. Такие вакцины являются достаточно стабильными и безопасными, так как не могут вызвать реверсию вирулентности. Они часто не трубуют хранения на холоде, что удобно в практическом использовании. Однако у этих вакцин имеется и ряд недостатков, в частности, они стимулируют более слабый иммунный ответ и требуют применения нескольких доз (бустерные иммунизации).

б) живые аттенуированнные

Хотя живые вакцины требуют специальных условий хранения, они продуцируют достаточно эффективный клеточный и гуморальный иммунитет и обычно требуют лишь одно бустерное введение. Большинство живых вакцин вводится парентерально (за исключением полиомиелитной вакцины).

На фоне преимуществ живых вакцин имеется и одно предостережение, а именно: возможность реверсии вирулентных форм, что может стать причиной заболевания вакцинируемого. По этой причине живые вакцины должны быть тщательно протестированы. Пациенты с иммунодефицитами (получающие иммуносупрессивную терапию, при СПИДе и опухолях) не должны получать такие вакцины.

в) анатоксины

Многие микроорганизмы, вызывающие заболевания у человека, опасны тем, что выделяют экзотоксины, которые являются основными патогенетическими факторами заболевания (например, дифтерия, столбник). Анатоксины, используемые в качестве вакцин, индуцируют специфический иммунный ответ. Для получения вакцин токсины чаще всего обезвреживают с помощью формалина.

Ниже (табл. 15) приведена сравнительная характеристика вакцин [11], из которой следует, что инактивированные вакцины более стабильны, менее реактогенны, на их основе можно конструировать многокомпонентные вакцины, хотя в то же время по иммуногенности они уступают живым вакцинам.

Таблица 15. Факторы, влияющие на иммунный ответ на антиген

Примечания: 0> - признак не выражен, +> - слабо выражен, ++ - выражен, +++ - сильно выражен, (+) - тенденция в сторону усиления признака.

Новое поколение вакцин

Использование новых технологий позволило создать вакцины второй генерации.

Рассмотрим подробнее некоторые из них:

а) конъюгированные

Некоторые бактерии, вызывающие такие опасные заболевания, как менингиты или пневмонию (гемофилюс инфлюэнце, пневмококки), имеют антигены, трудно распознаваемые незрелой иммунной системой новорожденных и грудных детей. В конъюгированных вакцинах используется принцип связывания таких антигенов с протеинами или анатоксинами другого типа микроорганизмов, хорошо распознаваемых иммунной системой ребенка. Протективный иммунитет вырабатывается против конъюгированных антигенов.

На примере вакцины против гемофилюс инфлюэнце (Hib-b) показана эффективность в снижении заболеваемости Hib-менингитами детей до 5-ти лет в США за период с 1989 по 1994 г.г. с 35 до 5 случаев.

б) субъединичные вакцины

Субъединичные вакцины состоят из фрагментов антигена, способных обеспечить адекватный иммунный ответ. Эти вакцины могут быть представлены как частицами микробов, так и получены в лабораторных условиях с использованием генно-инженерной технологии.

Примерами субъедиинчных вакцин, в которых используются фрагменты микроорганизмов, являются вакцины против Streptococcus pneumoniae и вакцина против менингококка типа А.

Рекомбинантные субъединичные вакцины (например, против гепатита B) получают путем введения части генетического материала вируса гепатита B в клетки пекарских дрожжей. В результате экспрессии вирусного гена происходит наработка антигенного материала, который затем очищается и связывается с адъювантом. В результате получается эффективная и безопасная вакцина.

в) рекомбинантные векторные вакцины

Вектор, или носитель, - это ослабленные вирусы или бактерии, внутрь которых может быть вставлен генетический материал от другого микроорганизма, являющегося причинно-значимым для развития заболевания, к которому необходимо создание протективного иммунитета. Вирус коровьей оспы используется для создания рекомбинантных векторных вакцин, в частности, против ВИЧ-инфекции. Подобные исследования проводятся с ослабленными бактериями, в частности, сальмонеллами, как носителями частиц вируса гепатита B.  В настоящее время широкого применения векторные вакцины не нашли.

3.1. Компоненты вакцин

Как известно, основу каждой вакцины составляют протективные антигены, представляющие собой лишь небольшую часть бактериальной клетки или вируса и обеспечивающие развитие специфического иммунного ответа. Протективные антигены могут являться белками, гликопротеидами, липополисахаридобелковыми комплексами. Они могут быть связаны с микробными клетками (коклюшная палочка, стрептококки и др.), секретироваться ими (бактериальные токсины), а у вирусов располагаются преимущественно в поверхностных слоях суперкапсида вириона [11].

Поскольку для создания вакцин необходимо получение протективного антигена в достаточных количествах, то, прежде всего, нарабатываются большие объемы биомассы (культивируемые бактерии, вирусы). Далее производится выделение и очистка протективного антигена, причем в зависимости от условий это может быть как живая биомасса, так и инактивированная. Для инактивации используют формалин, фенол, перекись водорода, тепло, УФО-облучение и т.д.

Выделение и очистка протективного антигена также сопряжены с физическими или химическими методами воздействия, что определяется в основном свойствами антигена. Это могут быть методы изоэлектрического осаждения кислотами и щелочами, высаливание нейтральными солями, осаждение спиртом, сорбция и элюция, ультрафильтрация, колоночная хроматография и т.д.

Важно, что при всех указанных действиях должна максимально сохраняться первоначальная структура протективного антигена и в то же время должна быть получена максимальная степень чистоты препарата [11].

Несмотря на постоянное совершенствование вакцин, существует целый ряд обстоятельств, изменение которых в настоящий момент невозможно. К ним относятся следующие: добавление к вакцине стабилизаторов, наличие остатков питательных сред, добавление антибиотиков и т.д. Известно, что вакцины могут быть разными и тогда, когда они выпускаются разными фирмами. Кроме того, активные и инертные ингредиенты в разных вакцинах могут быть не всегда идентичными (для одинаковых вакцин).

Консерванты, стабилизаторы, антибиотики

Эти компоненты вакцин, анатоксинов и иммуноглобулинов используются для ингибиции и предотвращения роста бактерий в вирусных культурах, для стабилизации антигенов. Для лиофилизации используют лактозу, сахарозу, человеческий альбумин, мальтозу и др. В качестве консервантов наиболее часто в отечественных вакцинах используют меркуротиолят (мертиолят или тимеросал), стабилизатора - раствор хлористого магния. Наряду с этим в зарубежных вакцинах используют формальдегид, гидрометиламинометан, фенол, феноксиэтанол и др.

Аллергические реакции могут иметь место, если реципиент чувствителен к одной из этих добавок (тимеросал или мертиолят, фенолы, альбумин, глицин, неомицин).

Растворители вакцин

В качестве растворителей могут использоваться стерильная вода, физиологический раствор, раствор, содержащий протеин или другие составляющие, происходящие из биологических жидкостей - сывороточные протеины.

Адъюванты

Многие антигены вызывают субоптимальный иммунологический ответ. Усиление иммуногенности включает связывание антигенов с различными субстанциями или адъювантами (например, фосфат алюминия или гидроокись алюминия).

При создании вакцин учитывается способ их введения. Так, в препаратах для парентерального введения целесообразно использование адъювантов и консервантов, а для энтерального применения - кислотоустойчивое покрытие.

В технологии создания вакцин предусматривается стерилизация растворов антигенов. С этой целью используются термическая обработка, облучение, фильтрация и т.п. Безусловно все эти воздействия не должны повлиять на сохранность протективного антигена и его количество [11].

Таким образом, создание современных вакцин - это высокотехнологичный процесс, использующий достижения во многих отраслях знаний.

3.2. Критерии эффективных вакцин

Актуальной задачей современной вакцинологии является постоянное совершенствование вакцинных препаратов. Эксперты международных организаций по контролю за вакцинацией разработали ряд критериев эффективных вакцин, которые соблюдаются всеми странами-производителями вакцин. Перечислим некоторые из них (Табл. 16)

Таблица 16. Некоторые критерии эффективных вакцин
(Janeway C.A., et al., 1996)

Другой вопрос, который следует иметь ввиду при реализации любых программ массовых иммунизаций - это соотношение между безопасностью вакцин и их эффективностью. В программах иммунизации детей против инфекций имеется конфликт между интересом индивидуума (вакцина должна быть безопасна и эффективна) и интересом общества (вакцина должна вызывать достаточный протективный иммунитет). К сожалению, на сегодняшний день в большинстве случаев частота осложнений вакцинации тем выше, чем выше ее эффективность. Авторы такой концепции приводят соответствующий пример - эффективной, но довольно реактогенной паротитной вакцины, содержащей штамм Urabe Am9, и менее эффективной, содержащей штамм Jeryl Lynn [130]. В результате эксперты по практике иммунизации в США пришли к заключению, что нет "вакцин совершенно безопасных или совершенно эффективных" ("Рекомендации по иммунизации" - ACIP., 1994).

В настоящее время существуют определенные требования к вакцинам:

3.3. Условия эффективной вакцинации

На сегодняшний день эффективной считается та вакцинация, в результате которой развивается длительная защита вакцинируемого от инфекции. Ряд требований эффективной вакцинации перечисляются ниже.

3.4. Состав отечественных и зарубежных вакцин, используемых для проведения рутинной иммунизации

На сегодняшний день в России зарегистрировано или находится в стадии регистрации достаточно большое количество вакцин импортного производства. Во многом состав их подобен отечественным аналогам, однако целый ряд вакцин в России не производится. Знание состава этих вакцин необходимо для того, чтобы иметь представление о возможных нежелательных реакциях и мерах предосторожности при их введении.

Прежде всего приведем перечень вакцин, которые можно использовать для профилактики основных "управляемых" инфекций (табл. 17).

Таблица 17. Перечень отечественных и зарубежных вакцин, используемых для профилактики некоторых инфекционных заболеваний.

Как видно из представленного перечня, практикующий врач может иметь дело с довольно большой группой вакцин, причем для профилактики ряда инфекций (например, гепатит В) наряду с отечественной предлагается 3-4 импортных вакцины.

С одной стороны, такое многообразие дает возможность врачу подобрать оптимальные варианты иммунизации, а с другой - заставляет подробно изучать характеристики разных вакцин, сравнивая при этом не только качество антигена, используемого в вакцине и метод его получения, но также другие компоненты вакцины.

С этой целью считаем необходимым привести краткие сведения о составе как отечественных, так и импортных вакцин.

3.4.1. Состав вакцин, входящих в прививочный календарь

Отечественные вакцины

Прежде всего приведем характеристику отечественных вакцин, используемых как у детей, так и у взрослых. Кроме того, приводим рекомендации по способу введения вакцин, считая это достаточно важным моментом в правильной организации вакцинации.

Таблица 18. Состав отечественных вакцин, входящих в прививочный календарь.

Анализ причин нежелательных реакций на вакцины показывает, что нельзя упускать из виду строгое соблюдение указаний по технике введения вакцин. Более того, формирование иммунитета так же напрямую зависит от соблюдения способа введения вакцин. Учитывая важность этого вопроса для практического врача остановимся подробнее на его рассмотрении (табл. 19).

Таблица 19. Способы и дозы введения отечественных вакцин, входящих в прививочный календарь.

Импортные вакцины

В России используется целый ряд вакцин, производимых крупными иностранными фирмами. Для того, чтобы познакомить врачей с составом этих вакцин, приводим их перечень (табл. 20).

Таблица 20. Состав некоторых импортных вакцин.

Если с отечественными вакцинами медицинским работникам приходится встречаться ежедневно и, следовательно, знание техники введения вакцин должно быть достаточно полным, то, что касается импортных препаратов - это пока малознакомая область. Это требует от врачей и средних медработников освоения навыков работы с импортными препаратами.

В приводимой ниже таблице 21 нами не расшифровываются места введения, поскольку имеется аналогия с отечественными препаратами.

Таблица 21. Способы введения и разовые дозы импортных вакцин.

3.4.2. Хранение и транспортировка вакцин

Говоря о качестве вакцин, нельзя не остановиться на вопросе их хранения и транспортировки, поскольку биологические препараты в наибольшей степени нуждаются в правильном обращении с ними. Пренебрежение указанными ниже правилами приводит к резкому снижению биологической активности препарата и возрастанию числа побочных эффектов.

3.4.3. Техника вакцинации

Другое важное условие успешной вакцинации, соблюдение которого является необходимым - это правильная техника вакцинации. Ниже приведен целый ряд рекомендаций, разработанных Наблюдательным комитетом по иммунизации (ACIP) США (1997), имеющих не менее важное значение и для практической работы по иммунизации в нашей стране.

Пути и техника введения вакцин

За некоторым исключением вакцины чаще всего вводят при помощи шприца внутримышечно или подкожно. Оральный путь введения применяется лишь при вакцинации против полиомиелита, тифа и холеры.

В то же время по многим причинам вакцины будущего должны быть все-таки предназначены для приема per os. В пользу такого пути введения вакцин говорят следующие факторы:
1) меньше риск передачи инфекций с кровью (ВИЧ, гепатиты В, С);
2) экономически этот путь дешевле, так как отсутствует необходимость шприцев и игл;
3) относительно низкая стоимость производства вакцин,
4) лучший охват населения.

Иммунологическое обоснование перорального пути введения в том, что вовлекаются элементы местного иммунитета (секреторный иммуноглобулин А), что важно при защите от инфекций, поражающих слизистые оболочки.

Среди таких создаваемых вакцин - ротавирусная, гриппозная, а также для профилактики респираторно-синцитиальной инфекции и Helicobacter pylori.

Что касается вакцин, вводимых с помощью шприца, то главное стратегическое направление в их усовершенствовании - это создание комбинированных вакцин.

Общие инструкции

Внутримышечные инъекции

Предпочтительные места для внутримышечного введения вакцин - это переднелатеральная верхняя часть бедра и дельтовидная мышца руки.

Инъекции в ягодичную область нельзя считать оптимальными для активной вакцинации новорожденных, грудных детей или взрослых. Это связано, во-первых, с риском повреждения седалищного нерва. Во-вторых, инъекции в ягодицу связывают с уменьшением иммуногенности вакцин из-за возможности попадания в глубокие жировые ткани. Если используются ягодицы для пассивной иммунизации, когда необходимо введение больших доз иммуноглобулинов, то следует избегать центральной части ягодицы. Для всех внутримышечных инъекций игла должна быть достаточно длинной, чтобы достигнуть мышечной ткани и предотвратить протекание вакцины в подкожные ткани, но и не такой, чтобы повредить нейроваскулярные структуры или кость.

Врач должен знать структурную анатомию места, куда он вводит вакцину. Длина иглы и место инъекции должны выбираться индивидуально в зависимости от возраста, объема материала для введения, размера мускулатуры и глубины мышечной поверхности, куда вводится материал.

Грудные дети (моложе 12 месяцев). Для таких детей рекомендуется введение вакцин в бедро, так как здесь наибольшая мышечная масса. Однако, в тех случаях, когда надо вводить несколько вакцин одновременно, можно использовать и дельтовидную мышцу.

Дети старше года. Если мышечная масса у них достаточная, то можно использовать дельтовидную мышцу для введения вакцины. Однако можно использовать и бедро, но в этом случае игла должна быть длиннее.

Подростки и взрослые. Рекомендуется введение вакцин в дельтовидную мышцу руки.

Внутрикожные инъекции

Обычно в/к инъекции проводят в наружную поверхность плеча. При вакцинации иглу следует вводить так, чтобы все отверстие было под кожей. Из-за небольшого количества антигена, используемого во в/к вакцинации, необходимо следить за тем, чтобы вакцину не ввести подкожно, так как результатом такого введения может быть субоптимальная иммунологическая реакция.

Подкожное введение

Подкожно вакцины вводят в бедро новорожденных или в дельтовидную область у более старших детей и взрослых. Кроме того, используется подлопаточная область.

Одновременная множественная вакцинация

Если вводится более одной вакцины одновременно или вакцина и иммуноглобулин, то лучше избегать введения двух вакцин в одну конечность, особенно, если одним из вводимых препаратов является АКДС. Однако, в тех случаях, когда приходится делать инъекции в одну конечность, то лучше это делать в бедро из-за большей мышечной массы. Инъекции должны отстоять одна от другой не менее, чем на 3-5 см, чтобы не перекрылись возможные местные реакции.

Оральное введение вакцин

Младенцы иногда не могут проглотить оральные препараты (ОПВ). Если вакцина вылилась, выплюнута или ребенка вырвало вскоре после введения (спустя 5-10 минут), то нужно дать еще одну дозу вакцины. Если эта доза также не усвоена, то повторять более не следует, а перенести вакцинацию на другой визит.

Назальная иммунизация

Иммунизация через слизистые оболочки - это перспективное направление в дальнейшем совершенствовании иммунопрофилактики. В частности, пациентам с иммунопатологией - (IgA нефропатией) проводили назальную иммунизацию АС-анатоксином. Уровень специфических антител у них достоверно повышался [178].

Отклонения от техники вакцинации

Не допускается отклонений от правильной техники вакцинации, так как это может привести к целому ряду нежелательных явлений:

Таким образом, вакцинация дозой меньшей, чем нужно, а также нестандартный путь введения или место введения вакцины требуют считать вакцинацию несостоявшейся. В таких случаях ребенка следует ревакцинировать согласно возраста. Если есть опасения, что ревакцинация может привести к риску побочных эффектов и отсутствию иммунитета, то можно провести предварительное серологическое исследование для проверки наличия сероконверсии.

3.5. Вакцинные препараты

Современная вакцинология располагает лечебными препаратами нового поколения, состоящими из очищенных бактериальных лизатов, а также препаратами рибосомальных фракций микроорганизмов. Все они получили название вакцинных препаратов, использование их в клинике позволяет достичь эффекта оздоровления у часто болеющих пациентов. Примерами таких препаратов являются:

Бронхо-мунал (Broncho-munal; Lek, Словения) - препарат, состоящий из лизатов следующих бактерий: St.pneumoniae, H.influenzae, S.aureus, K.pneumoniae, K.ozaenae, St.pyogenes, B.catarrhalis. Препарат применяют с лечебной и профилактической целью. Детям - в дозе 3,5 мг (1 капсула) 1 раз в день утром натощак в течение 10 дней. При необходимости курс лечения может быть продлен до 20-30 дней. Профилактический курс - 10 дней в каждом месяце в течение 3-х месяцев подряд. Бронхо-мунал вызывает стимулирующее действие в отношении гуморального и клеточного иммунитета, а также стимулирует местный иммунитет в кишечнике.

ИРС-19 (Lec, Словения) состоит из рибосомальных фракций 19 штаммов бактерий: D.pneumoniae, St.faecalis, St.pyogenes, N.catarralis, H.influenzae, K.pneumoniae, M.pyogenes, N.perflava, G.tetragena, N.flava, Moraxella и др. Препарат вызывает стимуляцию иммунитета слизистых. Назначают с целью профилактики и лечения рецидивирующих бактериальных инфекций ЛОР-органов. Форма выпуска - аэрозоль.

Курс лечебно-профилактического использования равен 2 неделям, распыляют по 1 дозе препарата от 2 (профилактическая доза) до 5 раз в сутки (лечебная доза). Может быть использован у детей с аллергическими заболеваниями.

Рибомунил (Ribomunyl; Пьер Фабр, Франция) - содержит рибосомы бактерий Kl.pneumoniae, D.pneumoniae, Str.pyogenes, H.influenzae и протеогликаны мембранной части Kl.pneumoniae. Бактериальные рибосомы обладают антигенныеми свойствами, что обеспечивает возможность специфической иммунизации. Рекомендуется назначать детям с 2-летнего возраста в таблетках, порошке и ингаляционно. Разовая доза - 3 таблетки или 1 порошок, утром, до еды 1 раз в сутки 3 недели подряд (первые 4 дня недели), затем - повторять первые 4 дня каждого последующего месяца (всего 2-5 мес).

Изучение сравнительной эффективности указанных вакцинных препаратов показывает, что рибомунил наиболее целесообразно использовать в период ремиссии заболеваний, в то время как бронхо-мунал и ИРС-19 эффективны и при обострении воспалительных заболеваний.

3.6. Разработка новых видов вакцин

Успехи медицинской биотехнологии привели к созданию вакцин для профилактики более 75 инфекционных заболеваний. Но, к сожалению, вакцинация опирается не только на биотехнологию, но и на политику и ресурсы. Страны, которые больше всех нуждаются в вакцинах, практически не способны платить за них или производить их. Инфраструктура здравоохранения и зачастую отсутствие соответствующего диагностического оборудования также мешают проектам иммунизации в развивающихся странах. Кроме того, в ряде регионов имеется очень сильное противостояние вакцинации по религиозным соображениям.

Взаимодействие нескольких факторов важно для развития новых вакцин и для улучшения старых. Научные и биомедицинские технологии, включающие микробиологию и иммунологию, продолжают быстро продвигаться и разрабатывать фундаментальные концепции иммунизации. Для успешной работы необходима экономическая поддержка, которая может осуществляться из нескольких источников: бюджет, неправительственные организации и общественные фонды, фармацевтические кампании. Не менее важным является также социально-политическое состояние общества и его заинтересованность в иммунопрофилактике населения. А это во многом зависит от характера распространения тех или иных инфекционных заболеваний в разных регионах.

Как уже отмечалось, в настоящее время существуют вакцины для профилактики более 75 инфекций. Эти вакцины находятся на разных стадиях исследования, производства и применения. Есть надежда, что благодаря современной биотехнологии для большинства важнейших патогенов будут созданы эффективные вакцины, хотя ВИЧ-1, возбудитель малярии и микобактерии туберкулеза продолжают разбивать все усилия ученых на разработку новых вакцин (ВИЧ-1 и малярия) или усовершенствование старых (БЦЖ).

Таблица 22. Некоторые современные вакцины, находящиеся на разных стадиях исследования и разработки, для создания которых используются следующие патогены [97].

Поскольку большая часть финансовой поддержки фундаментальных исследований и клинических испытаний идет из правительственных и неправительственных источников, то приоритет отдается вакцинам, предотвращающим наиболее частые заболевания в развитых странах. В противоположность, некоторые болезни, вызывающие огромную смертность, чаще имеют место в развивающихся странах с низким экономическим развитием, но разработка вакцин здесь затруднена именно по экономическим соображениям. Тем не менее подобная работа не прекращается.

Так, в США проведена первая стадия испытания вакцины из E.coli 0157 (0-специфический полисахарид) в комбинации с Pseudomonas aeruginosa (рекомбинантная). Вакцина предназначается пока для взрослых. У 81% добровольцев имело место 4-кратное повышение титра специфических антител класса G спустя 1 неделю после вакцинации. Планируется проведение 2-й фазы испытаний у детей [105].

Цитомегаловирусная инфекция на сегодняшний день представляет собой важную проблему при пересадках органов и тканей, у лиц, получающих цитостатическую терапию, у детей с иммунодефицитами. Клинические проявления ЦМВ включают: пневмонии, гепатиты, гастроинтестинальные поражения, лейкопению, хореоретиниты. Наслоение ЦМВ часто приводит к летальному исходу у реципиентов и иммунодефицитных лиц. Для предупреждения и лечения этой инфекции могут быть использованы гипериммунный глобулин или противовирусная терапия (высокие дозы ацикловира). Для профилактики ЦМВ перед трансплантацией рекомендуется использовать живую аттенуированную вакцину, содержащую штамм Towne, которая проходит соответствующие испытания [80].

Прошла первая фаза клинических испытаний Т-клеточных вакцин при аутоиммунных заболеваниях, когда больным с рассеянным склерозом вводили аутореактивные Т-клетки. Показано иммунорегуляторное и терапевтическое действие Т-клеточных вакцин путем индукции специфической регуляторной Т-клеточной сети в иммунной системе человека, истощающее пул циркулирующих MBP (myelin basic protein)-реактивных Т-клеток. (Zang J. et. al., 1996).

Разрабатываются вакцины против гельминтов, что особенно важно у животных, особенно овец, коров, кур и в мясной индустрии. Были апробированы 2 стратегии в исследовании вакцин: вакцины против паразитов в окончательном хозяине и в промежуточном хозяине. Было установлено, что вакцины против лентеца (Taenia) и эхинококка более эффективны для промежуточных хозяев (Lightowlers M.W. et. al., 1996).

Вакцинация против опухолей. За последние 30 лет в большом числе исследований использовали нативные немодифицированные или модифицированные опухолевые клетки с целью индукции специфического иммунного ответа против опухоли. Этот метод используется в комбинации с химиотерапией, в частности, при опухолях в гинекологии (Mallmann P., 1995).

Вакцинация для контроля зачатия. Новые методы регуляции рождаемости - это вакцины и активная иммунизация против антигенов репродукции. Эти вакцины появились два десятилетия тому назад. Однако, перекрестное реагирование и увеличение аутоантител у вакцинированных является серьезным препятствием для широкого применения таких вакцин. (Dirnhofer S., et. al., 1995).

На сегодняшний день назрела необходимость активной разработки вакцин для заболеваний, передающихся половым путем. Разрабатываемые вакцины представлены ниже (табл. 23).

Таблица 23. Патогены, использующиеся в качестве кандидатов для создания вакцин для профилактики заболеваний, передающихся половым путем.

– Neisseria gonorrhoea
– Chlamydia trachomatis
– Herpes simplex type 2
– Human papilloma viruses
– Treponema pallidum

Наиболее значительными достижениями последних лет в исследовании вакцин стало привлечение науки о растениях. Начиная с 1990 года, несколько групп ученых в области растений начали исследовать возможность использования трансгенных растений как продуктов для создания съедобных вакцин. Использовано 2 стратегии: одна-интеграция микробного гена в хромосому растений, вторая- инкорпорация чужеродного гена в геном вируса растений. Есть несколько преимуществ последней системы, в частности, вирусы растений имеют высокую структурную устойчивость и могут аккумулироваться в высоких титрах в "естественных" хозяевах. Такие вирусы могут быть использованы как векторы для кодовых генов эпитопов антигенов вакцин.

В случае успешной разработки вакцин из съедобных растений, имеющих антигены в своих тканях, эти натуральные биокапсулярные вакцины будут использованы как еда.

Успешные эксперименты уже проведены с картофелем. Сейчас внимание исследователей привлекают бананы. Использование бананов имеет ряд преимуществ, включая доступность в тропических и субтропических странах, где сфокусировано внимание на заболеваниях, предотвращаемых вакцинами, кроме того, они нравятся детям и их не нужно готовить, что разрушает антигены [97].

С 1993 г. ведутся работы по созданию вакцин, принципиально отличающихся от всех известных ранее - это иммунизация с помощью плазмидной ДНК, иными словами, генная иммунизация. [148, 157]. Оказалось, что можно эффективно и безопасно иммунизировать животных не с помощью соответствующего нативного антигена, а с помощью плазмидной ДНК (pDNA), выделенной из этого антигена (на модели гриппа, ЦМВ).

При введении в организм pDNA захватывается целым рядом клеток, в частности, мышечными клетками, кератиноцитами, фибробластами, а также другими клетками, которые могут выполнять функции антиген-презентирующих. Под дейcтвием pDNA клетки начинают синтезировать антиген в небольшом количестве, что не может вызвать заболевания. В ответ на такие "самоизготовленные антигены", которые могут синтезироваться в организме мышей до 6 месяцев, появляется длительный антиген-специфический клеточный и гуморальный иммунный ответ.

Авторы установили, что в отличие от иммунизации нативным протеином, индуцирующим ответ Th2-лимфоцитов и синтез IgG1 и IgE антител, а также секрецию ИЛ-4 и ИЛ-5 Т-клетками, при p DNA-иммунизации индуцируется ответ Th1-клеток и продукция IgG2а изотипа антител, а также секреция IFN-y Т-клетками [157].

На сегодняшний день эти работы носят преклинический характер, так как механизмы геной иммунизации не могут считаться до конца изученными. В частности, маловероятно, хотя теоретически возможно, встраивание pDNA в геном хозяйской клетки и активация онкогенов. Другое возражение требует своего ответа - это возможность образования анти-ДНК антител. До сих пор в работах на мышах этого не найдено, однако считать это окончательным, по-видимому, преждевременно.

Таким образом, в скором будущем вакцинология сможет пополниться новыми вакцинами для профилактики наиболее значимых заболеваний как для отдельной личности, так и для всего человечества в целом.

Огромным достижением отечественных иммунологов является создание искусственных полимерсубъединичных вакцин (ИПС), т.е. макромолекулярных комплексов, составленных из синтетических полиэлектролитов в качестве носителя-иммуностимулятора и антигена, также полученного синтетическим путем, либо изолированного из возбудителя (Петров Р.В., Хаитов Р.М., 1988). Создание полусинтетических и полностью синтетических искусственных вакцин позволило авторам добиться фенотипической коррекции иммунного ответа, иными словами, индукции достаточного иммунного ответа на антиген даже при наличии генетически предопределенной низкой отвечаемости индивидуума на тот же естественный антиген. Этот успех стал возможным после решения проблемы выбора синтетического носителя для искусственного антигена или антигенной детерминанты. Проведенные успешные клинические испытания искусственной вакцины против гриппа являются важным шагом на пути создания других препаратов этого типа.

В заключение следует сказать, что любые новые вакцины проходят целый ряд шагов по их созданию.

Основные этапы создания вакцин

Для создания вакцины, которую можно было бы использовать в широкой практике, требуются долгие и тщательные исследования. Время от момента открытия возбудителя заболевания до создания вакцины может исчисляться многими десятками лет. За этот период происходит изучение заболевания, свойств возбудителя, создание вакцины и ее апробация, лицензирование вакцины и изучение эффекта при массовом использовании [169].

Этапы создания вакцин:

1. Идентификация заболевания:

- распознавание болезни;
- диагонстика;
- локализация и идентификация возбудителя болезни в природе;
- изучение механизмов патогенеза заболевания и защиты организма;
- изучение естественного приобретенного иммунитета.

2. Изучение возбудителя:

- биохиимческие и биофизические характеристики;
- рост в культуре клеток;
- аналих антигенных и генетических особенностей;
- изучение инфекции на животных.

3. Отбор возбудителей-кандидатов для создания вакцины:

- инактивация или ослабление возбудителя;
- селекция и очистка основных антигенов, стимулирующих иммунный ответ;
- отбор адъювантов;
- демонстрация стабильности и незначительных вредных свойств на животных;
- стимуляция протективного иммунного ответа на животных.

4. Тестирование вакцины на добровольцах:

– фаза 1 - изучение безопасности. Изучается безопасность различных доз вакцины. Обычно начинают с небольшого числа волонтеров, а затем включают большее число волонтеров, если вакцина проявляет себя как безопасная;
– фаза 2 - изучение безопасности и иммуногенности. Изучение проходит на сотнях волонтеров и тестируется как безопасность вакцины, так и ее способность индуцировать адекватный протективный иммунитет, обеспечивающий защиту от заболевания;
– фаза 3 - изучение безопасности, иммуногенности и эффективности вакцины. Изучение проходит на тысячах людей. Вакцина должна защищать от заболевания и не вызывать большого числа побочных эффектов.

5. Выпуск вакцины для массового использования.

6. Лицензирование вакцины.

7. Профессиональная оценка вакцины врачами и одобрение со стороны населения.

содержание   ..  1  2  3  4  ..