ГОСУДАРСТВЕННАЯ ФАРМАКОПЕЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ (ПЕРВОЕ ИЗДАНИЕ, 2006 год)

кислоты в протеин, вне зависимости от того, подлежат эти протеины

модификации после преобразования или нет;

- полусинтетическим продуктам, получаемым из продуктов ферментации и

продуктов, получаемых посредством биокаталитического преобразования;

- цельным концентратам или сырьевым ферментативным продуктам.

Эта статья содержит общие требования по разработке и производству

продуктов ферментации. Эти требования не являются всеобъемлющими для

каждого конкретного случая. Дополнительные требования к предписаниям данной

статьи могут быть изложены в частной статье или компетентными органами.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Исходя из задач данной статьи, продукты ферментации определяются, как

активные или неактивные фармацевтические вещества, получаемые в процессе

контролируемой ферментации, как непрямые продукты гена. Они представлены

первичными или вторичными метаболитами микроорганизмов типа бактерий,

дрожжей, грибов и микроскопических морских водорослей, модифицированными

либо не модифицированными в соответствии с традиционными технологическими

процессами, либо в соответствии с технологиями рекомбинантной ДНК. Такие

метаболиты включают витамины, аминокислоты, антибиотики, алкалоиды и

полисахариды.

Они могут быть получены в ходе ферментативного процесса по производству

одной партии либо в ходе непрерывного ферментативного процесса, которые

сопровождаются такими технологическими процедурами, как экстракция,

концентрирование, очистка и изолирование.

ПРОИЗВОДСТВО

Производство должно быть основано на воспроизводимом процессе, который

прошел процедуру подтверждения. Степень воспроизводимости определяется по

критическому

(лимитирующему) этапу соответствующего технологического

процесса.

ХАРАКТЕРИСТИКА МИКРООРГАНИЗМА-ПРОИЗВОДИТЕЛЯ

Должна документироваться история развития микроорганизма, используемого

в производственном процессе. Характеристика микроорганизма может включать в

себя определение его фенотипа, макроскопических и микроскопических признаков,

биохимических свойств. Если необходимо, проводится определение генотипа

микроорганизма и его молекулярных генетических свойств.

ПРОЦЕСЫ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ МАТОЧНОЙ СЕРИИ КУЛЬТУР

МИКРООРГАНИЗМОВ

Контрольный банк культур микроорганизмов - это гомогенная суспензия или

лиофилизат оригинальных микроорганизмов, распределенных по индивидуальным

емкостям для хранения. Жизнеспособность и производительность микроорганизмов

при выбранных условиях хранения и их пригодность для ввода в производственный

процесс после хранения должны быть очевидными и надлежащим образом

подтвержденными.

Промежуточный контрольный банк культур микроорганизмов, который может

быть получен с использованием маточной серии культур микроорганизмов,

используется для создания рабочего банка культур микроорганизмов.

Рабочий банк культур микроорганизмов - это гомогенная суспензия или

лиофилизат микроорганизмов, полученных из контрольного банка культур

микроорганизмов, распределенный в равных объемах по индивидуальным емкостям

для хранения (например, в жидком азоте).

Производство может происходить в виде одного законченного цикла или быть

непрерывным производственным процессом, который может заканчиваться при

определенных условиях.

Все емкости с культурами микроорганизмов хранятся в одинаковых условиях.

После хранения, ампулы, флаконы не возвращаются обратно.

ПРОЦЕССЫ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ СТУПЕНЬЧАТОГО РОСТА КУЛЬТУР

МИКРООРГАНИЗМОВ

Содержимое емкости рабочего банка культур микроорганизмов

(при

необходимости, после ресуспензирования) используется для приготовления

прививочного материала в подходящую питательную среду. После

соответствующего периода роста, культуры используются для инициации

ферментативного процесса (если это необходимо, после этапа прекультивирования

в преферментаторе). Условия, которые необходимы на каждой стадии процесса,

строго определяются и должны выполняться при каждом производственном цикле.

КОНТРОЛЬ ИЗМЕНЕНИЙ

Если в ходе производственного процесса происходят какие-либо изменения,

которые существенным образом могут изменить профили примесей продукта,

критические этапы производства, связанные с этими изменениями, должны

утверждаться повторно.

Если существенное изменение затрагивает сам микроорганизм, используемый

для производства, и влечет за собой существенное изменение в профиле примесей

продукта, все критические этапы производственного процесса, связанные с этим

изменением, в частности процедура очистки и изолирования, также утверждаются

повторно.

Согласование произошедших изменений включает в себя подтверждение того,

что новые примеси в продукте, появившиеся вследствие изменения, могут

соответствующим образом контролироваться в ходе производственного процесса.

Если возникает необходимость в дополнительных или альтернативных испытаниях,

то они должны вводится с определенными ограничениями. Если изменение в

процессе или в микроорганизмах приводит к увеличению уровня уже

присутствующих примесей, то приемлемость такого увеличения должна быть четко

установлена.

При замене контрольного банка культур микроорганизмов, критические этапы

производственного процесса должны повторно согласовываться таким образом,

чтобы было очевидно, что никаких отрицательных изменений в качестве продукта и

его соответствии стандарту не произошло. Если в процесс вводится

видоизмененный или новый микроорганизм, то особое внимание необходимо

обратить на изменения в профиле примеси продукта.

СЫРЬЕ

Сырье, используемое на всех этапах процесса ферментации и/или

последующих этапах обработки должно иметь соответствующее качество. Оно

проверяется на соответствие письменным спецификациям.

Уровни биологической нагрузки в среде или входящем для аэрации воздухе

уменьшаются до уровня, гарантирующего, что в случае возникновения микробной

контаминации не возникнет негативного воздействия на качество, чистоту и

безопасность продукта. Добавка таких компонентов, как питательные вещества,

прекурсоры и субстраты во время ферментации проводится в асептических

условиях.

КОНТРОЛЬ В ПРОЦЕССЕ ФЕРМЕНТАЦИИ

Контроль в ходе процесса ферментации осуществляется для того, чтобы

гарантировать постоянство условий во время самого процесса и последующих

этапов обработки, а также для обеспечения качества изолированного продукта.

Особое внимание должно быть уделено способности используемых методов

контроля обнаружить любого микробное загрязнение, которое может отрицательно

сказаться на качестве, чистоте и безопасности продукта.

Производственные условия могут контролироваться путем выполнения

соответствующих процедур, например, посредством регулирования и проверки:

- температуры,

- значения pH,

- нормы аэрации,

- скорости перемешивания,

- давления,

а также посредством контроля концентрации требуемого продукта.

ОБРАБОТКА НА ВЫХОДЕ

В конце ферментации, микроорганизм-продуцент инактивируется или

удаляется. Дальнейшая обработка проводится с целью удаления остатков

питательной среды до приемлемого уровня, чтобы гарантировать постоянное

качество требуемого продукта.

Могут использоваться различные процессы очистки, например, обработка

активированным углем, ультрафильтрация и экстракция растворителем.

Необходимо убедиться, что выбранный процесс или процедура уменьшает до

минимума или удаляет:

- остатки микроорганизма-продуцента, питательной среды, субстратов и

прекурсоров,

- нежелательные продукты трансформации субстратов и прекурсоров.

Если необходимо, соответствующие испытания выполняются либо в ходе

процесса ферментации, либо на изолированном продукте ферментации.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ, ИСПЫТАНИЯ И ПРОБЫ

Требования и специальные методы исследования, которым продукт должен

соответствовать в течение всего периода проверки качества, указываются в

конкретных частных статьях.

ХРАНЕНИЕ

Условия хранения указывают в частной статье.

МАРКИРОВКА

Требования к маркировке указывают в частных статьях.

ПРОДУКТЫ, КОТОРЫЕ МОГУТ БЫТЬ ПЕРЕНОСЧИКАМИ ГУБЧАТОЙ

ЭНЦЕФАЛОПАТИИ ЖИВОТНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ

ОПРЕДЕЛЕНИЯ

К продуктам, которые могут быть переносчиками губчатой энцефалопатии

относятся продукты, полученные из тканей или секретов животных, которые могут

быть переносчиками губчатой энцефалопатии. Эта статья относится ко всем

субстанциям или препаратам:

- полученным от таких животных,

- в состав которых входят продукты, полученные от таких животных,

- в производстве которых использовались такие продукты, например в

качестве наполнителей, исходных материалов или реактивов.

ПРОИЗВОДСТВО

Производство осуществляется в соответствии с разделом

«Минимизация

риска передачи губчатой энцефалопатии животного происхождения через

лекарственные средства» (5.2.8).

РАДИОАКТИВНЫЕ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Данная общая статья распространяется на следующие радиоактивные

фармацевтические препараты:

- радиоактивное лекарственное средство: любое лекарственное средство,

готовое к медицинскому применению, которое содержит один или более

радионуклидов (радиоактивные изотопы).

- изотопный генератор: любая система, включающая установленный

материнский радионуклид, от которого производится дочерний радионуклид,

удаляемый элюированием или любым другим методом и используемый для

приготовлении радиоактивного лекарственного средства,

- комплект для приготовления радиоактивного лекарственного средства:

используется при заключительном приготовлении радиоактивного лекарственного

средства, обычно перед его применением,

- радиоактивный фармацевтический прекурсор: радионуклид, используемый

для радиоактивной метки другого вещества имеющего первичное назначение.

Нуклид

- разновидность атома, характеризующегося числом протонов и

нейтронов в его ядре (т.е. его атомным номером Z, и массовым числом A), а также

его потенциалом ядерной энергии. Изотопы элемента - это нуклиды с одинаковым

атомным номером, но с различным массовым числом. Нуклиды, содержащие

нестабильные комбинации протонов и нейтронов, могут преобразовываться

спонтанно в устойчивые или другие нестабильные комбинации протонов и

нейтронов с постоянной статистической вероятностью. Такие нуклиды являются

радиоактивными и называются радионуклидами. Начальный нестабильный нуклид

называется материнским радионуклидом, а конечный нуклид - дочерним нуклидом.

Радиоактивный распад или преобразование может повлечь излучение

заряженных частиц, электронный захват

(ЭЗ) или изомерный переход

(ИП).

Заряженные частицы, исходящие от ядра, могут быть альфа-частицами (ядрами

гелия с массовым числом 4) или бета-частицами (отрицательно заряженные -

электроны или положительно заряженные

- позитроны). Эмиссия заряженных

частиц от ядра может сопровождаться гамма-излучением. Гамма-излучение также

происходит в процессе изомерного перехода. Эта эмиссия может быть частично

заменена выбросом электронов

(конверсионные электроны). Данное явление,

подобно процессу электронного захвата, влечет вторичное рентгеновское излучение

из-за реорганизации электронов в атоме. Вторичная эмиссия может быть частично

заменена выбросом электронов

(оже-электронов). Радионуклиды с дефицитом

нейтронов могут распадаться, излучая позитроны. Эти радионуклиды называют

эмиттерами позитрона. Позитроны уничтожаются при контакте с электронами. Этот

процесс, обычно сопровождаемый эмиссией двух гамма-фотонов, каждый с

энергией 511 кэВ, обычно с излучением под углом 180° друг к другу, называется

аннигиляционным излучением.

Распад радионуклида происходит согласно законам вероятности с

характерным постоянством и находится в экспоненциальной зависимости. Время, в

течение которого число радиоактивных ядер уменьшается вдвое, называют

периодом полураспада (T_1/2).

Проникающая способность каждого излучения существенно изменяется в

зависимости от его природы и энергии. Альфа-частицы полностью поглощаются

объектом, толщиной от нескольких микрометров до нескольких десятков

микрометров. Бета-частицы полностью поглощаются объектом, толщиной от

нескольких миллиметров до нескольких сантиметров. Гамма-излучение полностью

не поглощается, а только уменьшается, и, например, для десятикратного

уменьшения может потребоваться пластина свинца толщиной несколько

сантиметров. В большинстве случаев с увеличением плотности объекта,

уменьшается проникающая способность альфа- и бета-частиц и гамма-излучения.

Каждый радионуклид характеризуется постоянным периодом полураспада,

выраженным в единицах времени, природой и энергией его излучения. Энергия

выражается в электронвольтах

(эВ),

килоэлектронвольтах

(кэВ)

или

мегаэлектронвольтах (МэВ).

Термин

“радиоактивность” используется для описания феномена

радиоактивного распада и для количественного физического выражения

(активности) этого феномена. Радиоактивность вещества - это количество ядерных

распадов или преобразований в единицу времени.

В Международной Системе единиц

(СИ) радиоактивность выражается в

беккерелях (Бк), один беккерель равен одному ядерному превращению в секунду.

Точные (абсолютные) измерения радиоактивности могут быть сделаны только в

специализированной лаборатории. Идентификация и относительное измерение

уровня радиации могут быть выполнены в обычной лаборатории путем сравнения со

стандартизированными веществами, проверенными компетентными органами.

Радионуклидная чистота: отношение радиоактивности определенного

радионуклида к общей радиоактивности радиоактивного лекарственного средства,

выраженное в процентах. Радионуклидные примеси, которые могут встречаться в

лекарственном средстве с их предельными значениями, должны быть указаны в

частной статье.

Радиохимическая чистота: отношение радиоактивности определенного

радионуклида, который присутствует в радиоактивном лекарственном средстве в

заявленной химической форме, к общей радиоактивности радионуклидов,

присутствующих в радиоактивном лекарственном средстве, выраженное в

процентах. Радиохимические примеси, которые могут встречаться в лекарственном

средстве с их предельными значениями, должны быть указаны в частной статье.

Химическая чистота: химические примеси, которые могут встречаться в

радиоактивном лекарственном средстве с их предельными значениями, должны

быть указаны в частной статье.

Переносчик изотопа: стабильный изотоп соответствующего элемента,

присутствующий или добавленный в радиоактивное лекарственное средство, в той

же самой химической форме, что и сам радионуклид.

Удельная радиоактивность: радиоактивность радионуклида на единицу

массы элемента или определенной химической формы.

Радиоактивная концентрация: радиоактивность радионуклида на единицу

объема.

Общая радиоактивность: радиоактивность радионуклида на единицу

измерения (флакон, капсула, ампула, генератор, и т.д.).

Стартовые материалы: все составляющие, которые используются при

приготовлении радиоактивного лекарственного средства.

Гарантийный срок: время, в течение которого должны выдерживаться все

показатели, указанные в частной статье. Срок годности и, при необходимости, время

должны указываться в частной статье.

ПРОИЗВОДСТВО

Частная статья должна описывать метод производства радионуклида

настолько точно, насколько это возможно. Радиоактивное лекарственное средство

содержит радионуклид:

- как элемент в атомной или молекулярной форме, например [¹³³Xe], [¹⁵O] О₂,

- как ион, например [¹³¹I] йодид, [^99mTc] пертехнетат,

- включенный в органические молекулы с образованием координационного

комплекса, например

[¹¹¹In] оксин или ковалентного соединения, например

[¹⁸F]фтор-2-деокси-D-глюкоза.

Практические способы производства радионуклидов для использования в

радиоактивных лекарственных средствах или как непосредственно радиоактивное

лекарственное средство:

- бомбардировка материала-мишени нейтронами (в ядерных реакторах),

- бомбардировка материала-мишени заряженными частицами

(в

акселераторах типа циклотронов),

- ядерное деление тяжелых нуклидов материала-мишени (обычно после

бомбардировки нейтронами или частицами),

- от изотопного генератора.

БОМБАРДИРОВКА НЕЙТРОНАМИ ИЛИ ЗАРЯЖЕННЫМИ ЧАСТИЦАМИ

Ядерная реакция и вероятность ее возникновения в единицу времени зависит

от природы и физических свойств материала-мишени и природы, энергии и

количества бомбардирующих частиц.

Ядерное преобразование, появляющееся в результате бомбардировки

частицами может быть записано в следующей форме: ядро-мишень

(бомбардирующая частица, излученная частица или излучение) произведенные

ядра.

примеры: ⁵⁸Fe (n, γ) ⁵⁹Fe

¹⁸O (p, n) ¹⁸F

В дополнение к желаемой ядерной реакции могут произойти случайные

преобразования, которые могут привести к появлению радиоактивных примесей.

Они будут оказывать влияние на энергию образующихся частиц и чистоту

материала-мишени. Такие побочные преобразования могут приводить к

возрастанию уровня примесей в лекарственном средстве.

ДЕЛЕНИЕ ЯДРА

Небольшое количество нуклидов с высоким атомным номером являются

делимыми. Например, наиболее часто используемой реакцией является реакция

расщепления урана-235 нейтронами в ядерном реакторе.

Иод-131, молибден-99 и ксенон-133 могут быть произведены при ядерном

расщеплении урана-235. Их выделение из смеси содержащей более 200 других

радионуклидов должно тщательно контролироваться, чтобы минимизировать

количество радиоактивных примесей.

ИЗОТОПНЫЕ ГЕНЕРАТОРЫ

Система изотопных генераторов использует относительно долгоживущий

материнский радионуклид, который распадается до дочернего радионуклида,

обычно обладающего более коротким периодом полураспада.

Несмотря на короткий период полураспада, допускается использование

дочернего радионуклида в дальнейшем. Для этого его отделяют от материнского

радионуклида, используя химический или физический процессы.

МАТЕРИАЛЫ-МИШЕНИ

Процентное соотношение основного радионуклида и радиоактивных примесей

зависит от изотопного состава и чистоты бомбардируемого материала-мишени.

Использование искусственно обогащенного изотопами материала-мишени, может

улучшить конечный продукт на выходе.

Химическая форма, чистота, физическое состояние, химические добавки,

условия бомбардировки, физическая и химическая среда, определяют химическое

состояние и химическую чистоту произведенных радионуклидов.

При производстве радионуклидов и, в частности, короткоживущих

радионуклидов перед обработкой и производством радиоактивного лекарственного

средства невозможно определить какой-либо из качественных критериев. Поэтому

каждая серия бомбардируемого материала-мишени должна проверяться в опытных

производственных запусках перед его использованием в основном

производственном процессе, чтобы обеспечить, при указанных условиях, выход

радионуклидов в требуемом количестве с соответствующим качеством.

Бомбардируемый материал в газообразном, жидком или твердом виде должен

находиться в емкости, обеспечивающей возможность облучения. Для

бомбардировки нейтронами бомбардируемый материал обычно помещается в

кварцевые ампулы или в алюминиевые или титановые контейнеры высокой степени

очистки. Необходимо убедиться, что никакого взаимодействия между контейнером и

его содержимым в условиях облучения (температура, давление, время) произойти

не может.

Для бомбардировки заряженными частицами, емкость для бомбардируемых

материалов обычно делают из алюминия или другого соответствующего металла, с

входным отверстием и портами выхода, системой охлаждения и окном из тонкой

металлической фольги. Природа и толщина окна оказывают влияние на продукт

ядерной реакции и могут также повлиять на радиоактивную чистоту.

Описание производственного процесса включает:

- бомбардируемый материал-мишень,

- тип емкости для материала-мишени,

- способ загрузки материала-мишени в систему облучения,

- метод облучения (бомбардировки),

- выделение требуемого радионуклида,

и влияние всех условий производства на качественный и количественный

выход готового радионуклида.

Химическое состояние изолированного радионуклида может играть основную

роль в дальнейшей обработке.

ПРЕКУРСОРЫ ДЛЯ СИНТЕЗА

Обычно прекурсоры не производятся в больших масштабах. Прекурсоры

синтезируются в лаборатории для производства радиоактивных лекарственных

средств или поставляются специализированными производителями или

лабораториями.

Испытания на идентичность, на химическую чистоту и количественное

определение должны проводится в соответствии с валидированными процедурами.

Когда партии прекурсоров выбираются по данным сертификатов качества

производителя, то должно проводиться, по крайней мере, одно испытание на

идентичность.

Перед использованием в основном производственном процессе по

изготовлению радиоактивных лекарственных средств, рекомендуется проверять

материалы-прекурсоры в опытных производственных запусках, чтобы убедиться, что

при указанных условиях производства, прекурсор дает на выходе радиоактивное

лекарственное средство в требуемом количестве и соответствующего качества.

ПРОИЗВОДСТВЕННАЯ СИСТЕМА

Все операции, от подготовки бомбардировки до распределения готового

радиоактивного лекарственного средства, включая их влияние на чистоту готового

продукта и эффективность процесса, должны быть документированы. По

возможности, необходимо выполнять контроль в ходе производственного процесса с

регистрацией результатов на каждом этапе производства.

а) При производстве радиоактивного лекарственного средства могут

использоваться механические и автоматизированные процессы, которые применимы

в фармацевтической промышленности, и адаптированы к специфике радиоактивного

производства.

б) Для изготовления радиоактивных лекарственных средств, содержащих

короткоживущие радионуклиды, типа некоторых эмиттеров позитрона, обычно

используются дистанционное управление производством и автоматизированный

радиоактивный синтез. Для радионуклидов с очень коротким периодом полураспада

(меньше

20 мин) контроль работы производственной системы является очень

важной процедурой, так как это позволяет проверить качество радиоактивного

лекарственного средства перед его выходом.

в) Любая производственная процедура должна быть валидирована в опытных

производственных запусках перед ее использованием в основном производственном

процессе, чтобы убедиться, что при указанных условиях производства,

производственная система дает на выходе радиоактивное лекарственное средство в

требуемом количестве с соответствующим качеством.

г) В практике медицинской радиологии приготовление дозированных форм

готового радиоактивного лекарственного средства обычно включает ограничение

радиоактивности начиная с готовых к использованию радиоактивных лекарственных

средств, генераторов, комплектов и радиоактивных прекурсоров. Все условия,

которые могут отразиться на качестве продукта

(например, радиохимическая

чистота и стерильность) должны быть четко установлены, а также включать

соответствующие меры защиты от облучения.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Радиоактивный распад: радиоактивный распад находится в

экспоненциальной зависимости от констант распада каждого отдельного

радионуклида.

Кривая экспоненциального распада (кривая распада) выражается уравнением:

Аt - радиоактивность во время t,

A₀ - радиоактивность во время t = 0,

λ - константа распада характерная для каждого радионуклида,

e - основание натурального логарифма.

Период полураспада (T_1/2) связан с константой распада (λ) уравнением:

ln 2

(ln 2 ≈ 0,693)

Радионуклид идентифицируется по его периоду полураспада, природе и

энергии его излучения, как указано в частной статье.

Измерение периода полураспада: Период полураспада измеряется с

помощью подходящей аппаратуры обнаружения, такой как ионизационная камера,

счетчик Гейгера-Мюллера, сцинтилляционный счетчик (твердый кристалл, жидкость)

или полупроводниковый детектор. Исследуемый образец используется в том виде, в

каком есть или растворяется, либо высушивается в капсуле после соответствующего

растворения. Выбранная радиоактивность, используемая в экспериментальных

условиях, должна быть достаточного уровня для обнаружения в течение нескольких

периодов полураспада.

Исследуемое радиоактивное вещество подготавливается таким образом,

чтобы избежать потери материала в период обработки. Жидкости

(растворы),

помещают во флаконы или запечатанные тубы, твердые вещества (остаток при

высушивании в капсуле) помещают в упаковку из клейкой ацетилцеллюлозы или

какого-либо другого материала.

Период полураспада исследуемого радиоактивного вещества измеряется при

постоянных геометрических условиях и с промежутками, обычно соответствующими

половине установленного периода полураспада, в течение времени приблизительно

равного трем периодам полураспада. Правильное функционирование аппарата

проверяется путем использования вещества с длинным периодом полураспада и,

при необходимости, корректируется (см. Измерение радиоактивности).

Строится график зависимости времени

(ось абсцисс) от логарифма

относительного показания прибора

(ось ординат). Рассчитанный период

полураспада может отличаться не более, чем на

% от установленного в

Фармакопее периода полураспада, если нет иных указаний в частной статье.

Определение природы и энергии излучаемой радиации:

Природа и энергия излучаемой радиации могут определяться путем

построения кривой ослабления и использования метода спектрометрии. Кривая

ослабления используется для анализа электронного излучения; спектрометрия

используется для идентификации гамма-лучей и детектируемого рентгеновского

излучения.

Кривая ослабления строится:

- для чистых электронных эмиттеров, когда нет в распоряжении спектрометра

для бета-лучей,

- для бета/гама эмиттеров, когда нет в распоряжении спектрометра для

гамма-лучей.

Этот метод оценки максимальной энергии бета радиации дает только

приблизительное значение. Исследуемое радиоактивное вещество, помещается в

постоянные геометрические условия, впереди тонкого окна счетчика Гейгера-

Мюллера или пропорционального счетчика. Исследуемое радиоактивное вещество

подготавливается, как описано выше. Измеряют число разрядов исследуемого

радиоактивного вещества. Между исследуемым веществом и счетчиком, сохраняя

постоянные геометрические условия, последовательно помещают не менее шести

алюминиевых экранов с увеличением массы каждого последующего на единицу

площади таким образом, чтобы добавление каждого последующего экрана не

сказывалось на числе разрядов чистого бета-излучения. Строят график зависимости

массы экрана на единицу его площади выраженной в миллиграммах на квадратный

сантиметр (ось абсцисс) от логарифма числа разрядов полученных для этого экрана

(ось ординат). Таким же образом строят график зависимости для

стандартизированного вещества. Массовые коэффициенты ослабления

рассчитываются из срединных (прямолинейных) частей кривых.

Массовый коэффициент ослабления µ_m, выраженный в квадратных

сантиметрах на миллиграмм, зависит от спектра энергии бета-излучения и от

природы и физических свойств экрана. Это позволяет идентифицировать бета-

эмиттеры. Массовый коэффициент ослабления рассчитывается по уравнению:

A₁

-ln

-m

m₁ - масса на единицу площади самого легкого экрана,

m₂ - масса на единицу площади самого тяжелого экрана, m₁ и m₂ должны

находиться в пределах прямолинейной части кривой,

A₁ - число разрядов для m₁,

A₂ - число разрядов для m₂.

Рассчитанный таким образом массовый коэффициент ослабленияµ_m может

отличаться не более, чем на 10 % от коэффициента, полученного при идентичных

условиях, используя стандартизированную подготовку того же самого радионуклида.

Амплитуда бета-частиц

- это дополнительный параметр, который может

использоваться для определения бета-энергии. Ее определяют как массу на

единицу площади, соответствующую пересечению экстраполяций спускающейся

прямолинейной части кривой и горизонтальной линии фоновой радиоактивности из

кривой ослабления, описанной выше.

Жидкостный сцинтилляционный счетчик может использоваться для

получения спектров α и ß^- эмиттеров (см. Измерение радиоактивности).

Гамма-спектрометрия используется для идентификации радионуклидов по

энергии и интенсивности рентгеновского и гамма- излучений.

Наиболее подходящим детектором для рентгеновской и гамма-спектрометрии

является германиевый полупроводниковый детектор. Также используется

активизированный таллием йодисто-натриевый сцинтилляционный детектор, но он

имеет более низкую энергетическую разрешающую способность.

Гамма-детектор должен быть откалиброван посредством использования

стандартных радиоактивных веществ. Эффективность обнаружения измеряется

путем использования калиброванного радиоактивного вещества или, для общих

целей - по графику зависимости эффективности от энергии рентгеновского и гамма-

излучения, который строится с помощью калиброванных радиоактивных веществ -

источников различных радионуклидов.

Гамма- и рентгеновские спектры радионуклидов, являются специфическими

для данного нуклида и характеризуются энергией и количеством фотонов,

излучаемых при переходе из одного энергетического уровня на другой. Эта свойство

используется для идентификации присутствующих радионуклидов в радиоактивном

веществе и определения их количества, а также позволяет оценить количество

других радионуклидных примесей.

Таблица физических характеристик радионуклидов (5.7) содержит наиболее

общие физические характеристики радионуклидов, применяемых в медицинской

практике и описанных в частных статьях. Кроме того, таблица содержит физические

характеристики основных потенциальных примесей радионуклидов, описанных в

частных статьях.

Под термином

“вероятностью перехода” подразумевается вероятность

преобразования ядра в данном состоянии энергии через определенный переход.

Под термином “вероятность эмиссии” подразумевают вероятность атома

радионуклида, вызывать эмиссию частиц или определенного излучения.

Вероятность обычно измеряется за период 100 распадов.

ИЗМЕРЕНИЕ РАДИОАКТИВНОСТИ

Радиоактивность препарата устанавливается на определенный день и, если

необходимо, на определенное время.

Абсолютное измерение радиоактивности конкретного образца может быть

выполнено, если известна схема распада радионуклида, но на практике приходится

вносить много исправлений, чтобы получить точные результаты. По этой причине

обычно выполняют измерение при помощи первичного, стандартного

радиоактивного вещества. Короткоживущие радионуклиды, например эмиттеры

позитрона, не имеют первичных стандартов. Измерительные приборы калибруются с

использованием стандартов определенных радионуклидов. Стандарты получают из

аттестованных для этих целей лабораторий. Ионизационные камеры и счетчики

Гейгера-Мюллера могут использоваться для измерения бета и бета/гамма

эмиттеров; сцинтилляционые или полупроводниковые счетчики или ионизационные

камеры могут использоваться для измерения гамма-эмиттеров; для измерения

низкоэнергетических бета-эмиттеров используется жидкостный сцинтилляционный

счетчик. Для обнаружения и измерения альфа-эмиттеров необходимы специальные

оборудование и методы. Для получения точных результатов необходимо выполнять

испытания исследуемых радиоактивных веществ и стандартов в одинаковых

условиях.

Низкоэнергетические бета-эмиттеры могут измеряться с помощью

жидкостного сцинтилляционного счетчика. Для этого образец растворяют в

растворе, содержащем один или более двух органических флуоресцентных

вещества (первичные и вторичные сцинтилляторы), которые преобразовывают часть

энергии распада в фотоны света, которые обнаруживаются фотомножителем и

преобразовываются в электрические импульсы. При использовании жидкостного

сцинтилляционного счетчика сравнительные измерения корректируются с поправкой

на подавляющие свет эффекты. Прямые (непосредственные) измерения проводятся

всегда в одинаковых условиях для исследуемого и стандартного радиоактивных

веществ (например, объемы и тип растворов).

Все измерения радиоактивности должны корректироваться вычитанием фона,

возникшего из-за радиоактивности окружающей среды, и из-за побочных сигналов,

генерируемых самим оборудованием.

При работе с оборудованием, когда измерения производятся при высоких

уровнях радиоактивности, иногда необходимо сделать поправку на конечное время

отклика

(“мертвое” время) детектора и связанного с ним другого электронного

оборудования. Для системы подсчета с фиксированным “мертвым” временем t

расчет производят по формуле:

наб

⁼1

наб

N - истинное число распадов в секунду,

N_наб - наблюдаемое число распадов в секунду,

t - “мертвое” время, в секундах.

Для некоторого оборудования это корректировка выполняется автоматически.

Эти корректировки должны быть сделаны перед корректировкой фонового

излучения.

После учета фона и электронных эффектов прибора (число распадов, поток

ионизации, и т.д.), корректировка распада в течение времени t_m измерения

определяется по формуле:

корр

2ˆ

1-expÁ-

1 2

R_корр

- показания прибора, откорректированные на начало отдельного

измерения,

R - показания прибора до корректировки распада, но уже откорректированные

с учетом фона, и т.д.

Результаты определений радиоактивности представляют собой колебания,

которые являются результатом случайных процессов ядерного преобразования.

Поэтому должно быть зарегистрировано достаточное количество распадов за

единицу времени. Стандартное отклонение - это квадратный корень количества

распадов, поэтому при минимуме в 10 000 распадов относительное стандартное

отклонение составит не более 1 % (доверительный интервал 1 σ).

Результаты измерения радиоактивности сопровождаются указанием даты и,

если необходимо, времени измерения. Эти данные должны быть сделаны со

ссылкой на часовой пояс. Радиоактивность в другое время может быть рассчитана

из экспоненциального уравнения или из таблиц.

Радиоактивность раствора выражается радиоактивной концентрацией.

Радиоактивная концентрация - это радиоактивность единицы объема раствора.

РАДИОНУКЛИДНАЯ ЧИСТОТА

В большинстве случаев для определения радионуклидной чистоты

радиоактивного

фармацевтического

препарата,

идентичность

каждого

присутствующего радионуклида и их радиоактивности должны быть известны.

Самым подходящим методом для проверки радионуклидной чистоты является

гамма-спектрометрия. Однако этим методом не всегда легко обнаруживаются

альфа- и бета-излучения, и, если используется йодисто-натриевый детектор, пики

примесей с гамма-излучением часто затеняются спектром основного радионуклида.

Требования по радионуклидной чистоте (например, спектр гамма-излучения

не должен значительно отличаться от спектра стандартизированного

радиоактивного вещества) и нормы содержания определенных радионуклидных

примесей (например, кобальт-60 в кобальте-57) указывают в частных статьях. Хотя

эти требования необходимы, они не являются достаточными, чтобы определять

радиоактивное лекарственное средство годным к медицинскому применению.

Изготовитель должен проверить радионуклидные препараты с коротким периодом

полураспада на содержание примесей с долгим периодом полураспада после

соответствующего периода распада. Таким образом получают информацию

относительно пригодности производственных процессов и адекватности процедур

испытания. В случаях, когда два или более радионуклидов, излучающие позитроны

необходимо идентифицировать и/или дифференцировать, как, например,

18F-

примеси в

13N-препаратах, определение периода полураспада должно быть

выполнено дополнительно методом гамма-спектрометрии.

Из-за различий в периодах полураспада различных радионуклидов,

присутствующих в радиоактивном лекарственном средстве, радионуклидная чистота

может изменяться со временем, но требования к радионуклидной чистоте должно

выполняться в течение всего срока годности. В случае, когда период полураспада

радионуклида в радиоактивном лекарственном средстве очень короток, такие

испытания выполнить трудно. Поэтому перед разрешением выпуска серии

радиоактивного лекарственного средства проводится контроль производственного

процесса.

РАДИОХИМИЧЕСКАЯ ЧИСТОТА

Определение радиохимической чистоты радиоактивного лекарственного

средства требует разделения входящих в его состав химических веществ,

содержащих радионуклид и оценки их радиоактивности. Радиохимические примеси

могут возникать при:

- производстве радионуклида,

- последующих химических процессах,

- неполном подготовительном разделении,

- химических изменениях в период хранения.

Требование радиохимической чистоты должны выполняться в течение всего

срока годности.

Для определения радиохимической чистоты можно использовать любой метод

аналитического разделения. Например, бумажная хроматография

(2.2.26),

тонкослойная хроматография

(2.2.27), электрофорез

(2.2.31), эксклюзионная

хроматография

(2.2.30),

газовая хроматография

(2.2.28) и жидкостная

хроматография (2.2.29). При этом необходимо принять соответствующие меры для

защиты от облучения.

УДЕЛЬНАЯ РАДИОАКТИВНОСТЬ

Удельная радиоактивность обычно вычисляется из радиоактивной

концентрации (радиоактивность на единицу объема) и концентрации химического

вещества, после определения радионуклидной и радиохимической чистоты

радиоактивного лекарственного средства.

Удельная радиоактивность изменяется со временем, поэтому необходимо

указывать дату

(и время) определения. Требуемый уровень удельной

радиоактивности должен выдерживаться в течение срока годности радиоактивного

лекарственного средства.

ХИМИЧЕСКАЯ ЧИСТОТА

Для определения химической чистоты необходимо определить количество

индивидуальных химических примесей, указанных в частной статье.

ЭНАНТИОМЕРНАЯ ЧИСТОТА

Необходимость проверки стереоизомерной чистоты, указывается в частной

статье.

ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ РАСПРЕДЕЛЕНИЕ

В частных статьях описываются испытания физиологического распределения

радиоактивного лекарственного средства.

В общем, испытание выполняется следующим образом.

Исследуемое лекарственное средство вводится внутривенно каждому из трех

животных. Разновидность, пол, порода и вес и/или возраст животных указываются в

частной статье.

После соответствующей подготовки лекарственное средство вводится в

хвостовую вену животного. В отдельных случаях используют введение в подкожные

вены ног, бедренные, яремные или относящиеся к мужскому половому члену.

Животные с признаками внесосудистой инъекции, исключаются из испытания.

После инъекции каждое животное немедленно помещается в отдельную

клетку, условия содержания в которой, позволяют собирать выделения и

предотвращать загрязнение поверхности тела животного.

По истечении определенного времени после инъекции, животные

умерщвляются и расчленяются соответствующим способом. Из отобранных органов

и тканей берутся пробы на их радиоактивность. Физиологическое распределение

рассчитывается и выражается в процентном значении радиоактивности,

обнаруженной в каждом из отобранных органов или тканей. Для этой цели

радиоактивность в органе соотносится с введенной радиоактивностью,

рассчитанной из радиоактивного содержания шприца, взвешенного до и после

инъекции. Для некоторых радиоактивных лекарственных средств требуется

определение соотношения радиоактивности к массе образцов отобранных тканей

(радиоактивность/масса).

Радиоактивное лекарственное средство должно выдерживать требования

физиологического распределения по крайней мере в двух из трех животных.

СТЕРИЛЬНОСТЬ

Радиоактивное лекарственное средство для парентерального применения

должно производиться в асептических условиях. Испытание на стерильность

выполняется, как описано в общей статье

(2.6.1). Трудности возникают с

радиоактивными лекарственными средствами с коротким периодом полураспада и

из-за радиационной опасности. При невозможности проведения испытания

стерильности готового радиоактивного лекарственного средства перед разрешением

выпуска серии проводится контроль производственного процесса.

Если размер выпускаемой серии радиоактивного лекарственного средства

ограничен одним или несколькими образцами (например, терапевтический или очень

недолговечное радиоактивное лекарственное средство) исследование на

стерильность не производится.

Если период полураспада радионуклида очень короткий (например, менее 20

мин), прием радиоактивного лекарственного средства пациентом обычно происходит

в месте его производства, сразу после его изготовления.

Из соображений безопасности

(высокий уровень радиоактивности)

исследование стерильности

(2.6.1) некоторых радиоактивных лекарственных

средств не проводится.

Метод мембранной фильтрации является предпочтительным для уменьшения

воздействия облучения на персонал.

Добавление антимикробных консервантов в радиоактивные лекарственные

средства, фасованные в многодозовые контейнеры не является обязательным, если

нет других указаний в частной статье.

БАКТЕРИАЛЬНЫЕ ЭНДОТОКСИНЫ - ПИРОГЕНЫ

Для некоторых радиоактивных лекарственных средств проводится испытание

на бактериальные эндотоксины. Испытание выполняется, как указано общей статье

(2.6.14), принимая необходимые меры предосторожности по защите персонала от

облучения.

Предельные показатели для бактериальных эндотоксинов указывают в

частной статье.

Когда природа радиоактивного лекарственного средства не позволяет

провести корректные испытания на пирогенность

(2.6.8), такие испытания

регламентируются специально.

Из-за невозможности проведения испытаний радиоактивных лекарственных

средств с коротким периодом полураспада, перед разрешением выпуска серии

проводится контроль производственного процесса.

ХРАНЕНИЕ

Хранят в герметично укупоренных контейнерах, в местах, обеспечивающих

защиту персонала от облучения первичным или вторичным излучением, в

соответствии с правилами по хранению радиоактивных веществ. В течение

хранения, контейнеры из-за облучения могут темнеть, что не обязательно означает

ухудшение качества лекарственного средства.

МАРКИРОВКА

На этикетке контейнера указывают:

- наименование лекарственного средства,

- наименование предприятия-изготовителя,

- идентификационный номер,

- для жидких и газообразных лекарственных средств: общая радиоактивность

в контейнере, или радиоактивная концентрация на миллилитр с указанием даты и,

если необходимо, времени; объем жидкости в контейнере,

- для твердых лекарственных средств: общая радиоактивность с указанием

даты и, если необходимо, времени. После добавления соответствующего

растворителя, твердое лекарственное средство считают жидким,

- для капсул: радиоактивность в капсуле с указанием даты и, если

необходимо, времени; число капсул в контейнере.

В некоторых случаях на этикетки помещают дополнительную информацию,

например, когда радиоактивные лекарственные средства содержат короткоживущие

радионуклиды.

На вторичной упаковке указывают:

- всю информацию, указанную на контейнере,

- способ применения,

- срок годности,

- где применимо, наименование и концентрация антимикробного консерванта,

- где применимо, специальные

РАСТИТЕЛЬНЫЕ ЖИРНЫЕ МАСЛА

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Растительные жирные масла представляют собой смеси триглицеридов

различных высокомолекулярных жирных кислот. Они могут содержать небольшие

количества других липидов, таких, как воски, свободные жирные кислоты, частичные

глицериды или неомыляемые вещества. Растительные жирные масла получают из

семян и плодов различных растений посредством отжима и/или экстракции

растворителями. Затем, по возможности, их очищают и гидрируют, при

необходимости, добавляют антиоксидант.

Выжимное масло: масло, получаемое из сырья определенного качества

посредством механической обработки

(напр.

холодного отжима или

центрифугирования).

Очищенное масло: масло, получаемое посредством отжима и/или экстракции

растворителями, и последующим щелочным рафинированием

(сопровождается

обесцвечиванием и дезодорацией) или физической очисткой.

Гидрогенизированное масло: масло, получаемое посредством отжима и/или

экстракции растворителями, и последующим щелочным рафинированием или

физической очисткой, гидрированием и последующим обесцвечиванием и

дезодорацией.

Для приготовления парентеральных дозированных форм используются масла

рафинированные только фосфорной кислотой и щелочью.

ПРОИЗВОДСТВО

ПОЛУЧЕНИЕ СЫРОГО МАСЛА

Из растений с высоким содержанием масла, в большинстве случаев, масло

получают посредством горячего отжима с последующей экстракцией; из растений с

низким содержанием масла - путем прямой экстракции.

Механические способы

А. Отжим

Отжим при высоком давлении. Состоит из всех или некоторых

нижеследующих стадий: очистка, сушка, лущение или вышелушивание, размол,

тепловая обработка и отслаивание.

На стадии очистки удаляют инородные примеси. Сушка может быть

необходима, если содержание влаги в зернах превышает допустимое содержание

влаги для процесса отжима под давлением. Лущение используют для получения

продукта с большим содержанием белков и уменьшения примесей в масле.

Тепловая обработка применяется для: разрушения клеток содержащих масло,

снижения вязкости масла, коагуляции белков в продукте, регулирования влажности,

стерилизации семян, устранение лишних компонентов семян (госсипол из семян

хлопчатника) и фиксирования определенных фосфатидов в использованном сырье.

Таким образом, уменьшаются потери при очистке. Эффективность процесса

выделения такова, что только от 3 до 6 % масла остаются в использованном сырье.

Влажный отжим. Плоды загружаются в сетчатые барабаны и помещаются в

горизонтальный стерилизатор для обработки паром и теплом с целью инактивации

энзимов, разрыхления плодов, коагуляции белков и т. д. После прогревания в

автоклаве масса загружается в пресс. Масло очищается в центрифуге и сушится в

вакуумной сушилке.

Прессование с последующей экстракцией растворителем. Состоит из выше

описанных стадий. Основное назначение процесса предварительного прессования -

это получение массы с высокой водопроницаемостью для последующей стадии

экстракции растворителями. Экстракция выполняется в перколяционных или

иммерсионных аппаратах. Эффективность экстракции растворителями такова, что

остаточный уровень масла в использованном сырье обычно меньше 1 %.

Б. Центрифугирование

С помощью центрифугирования отделяют маслянистую фракцию от воды и

растворимых в воде компонентов и остаточных твёрдых частиц. Этот способ

производства проводится с использованием:

- самоочистных роликовых или дисковых центрифуг,

- супер-декантаторов.

Экстракция растворителями. Перед экстракцией производятся следующие

действия: семена выдерживаются около недели при температуре ниже 24°С, чтобы

отделить шелуху от семени и позволить семенной влаге достичь баланса. Затем

семена очищаются, шлифуются, лущатся и отделяются от чешуи. Наиболее часто

используемый растворитель - смесь н-гексана и метилпентанов (точка кипения: 65-

70°C), как правило относящихся к

“гексанам”. Из-за высокой опасности

воспламенения или взрыва этой смеси могут использоваться сжиженные или

сверхкритические газы.

ОЧИСТКА

Очистка проводится с целью удаления из масла примесей, таким образом,

чтобы как можно меньше разрушить триглицериды и обойтись минимальными

потерями масла. В результате очистки удаляются следующие примеси:

- свободные жирные кислоты, которые могут вызвать ухудшение качества

масла, проявляющегося в окислении, появлении вкуса дыма при нагревании и

остром запахе (щелочное рафинирование),

- вода, способствующая ферментативному гидролизу

(щелочное

рафинирование, сушка),

- частичные глицериды, которые могут вызвать вспенивание и обуславливать

горький вкус (нейтрализация, промывка),

- фосфатиды и фосфорные соединения, обладающие эмульгирующими

свойствами, которые могут вызвать выпадение осадка, потемнение масла при

нагревании, помутнение и ухудшение органолептических свойств

(щелочное

рафинирование),

- красящие вещества, такие как хлорофилл

(щелочное рафинирование),

каротиноиды (отбеливание),

- гликолипиды, которые могут образовывать коллоидные растворы с водой,

- свободные гидрокарбонаты, парафины, воски, и смолистые материалы,

- металлы

(Fe, Cu, Pb, Sn, Pt, Pd и т д.), являющиеся сильными

катализаторами окисления,

- пигменты, такие, как госсипол (в хлопковом масле) или микотоксины, такие

как афлатоксин (в основном в арахисовом масле),

- пестициды,

- продукты окисления (альдегиды, пероксиды),

- протеины, которые могут вызвать аллергические реакции,

- неомыляемые вещества (например, лигнины, стеролы, токоферолы и другие

витамины).

- полициклические ароматические углеводороды.

Щелочное рафинирование. Включает в себя следующие стадии:

обессмоливание, щелочная нейтрализация, промывка и сушка.

Обессмоливание. На этой стадии проводится обработка водой и/или

фосфорной кислотой, и/или натрия хлоридом, в результате чего удаляются

фосфатиды, фосфорные соединения и металлы. Использование данного процесса

зависит от природы масла.

Щелочная нейтрализация. На этой стадии уменьшается содержание жирных

кислот до уровня менее 0,1 %; жирные кислоты преобразуются в нерастворимые в

масле мыла. Другие вещества могут быть удалены посредством адсорбции на этих

мылах: слизистые субстанции, фосфатиды, продукты окисления, красящие

вещества, и т.д. Все субстанции, не растворимые в масле, при гидратации

удаляются. Недостатком щелочной нейтрализации является возможность омыления

части нейтрального масла.

Промывка. Эта стадия заключается в удалении избытков мыл и щелочей, а

также следов металлов, фосфатидов и иных примесей при помощи горячей воды.

Сушка. Остатки воды устраняются под вакуумом перед последующими

процедурами, такими как обесцвечивание.

Физическая очистка. Она включает паровую обработку масла при низком

давлении и температуре выше 235°С. Эта способ подходит для масел с низким

содержанием фосфатидов и металлов (пальмовое, кокосовое, оливковое масла) или

для масел, из которых фосфатиды и металлы удаляются посредством кислотной

обработки концентрированной фосфорной кислотой и последующей адсорбционной

отбеливающей обработкой (подсолнечное, рапсовое и соевое масла). Этот способ

не применяется для чувствительных к нагреву масел (хлопковое масло темнеет при

обработке).

Обесцвечивание. Общим методом отбеливания является адсорбционная

обработка масла, выдержанного при

90°С в течение

30 мин под вакуумом.

Вещества, такие как хлорофилл и каротиноиды, оставшиеся после очистки, на

данной стадии удаляются полностью.

ГОСУДАРСТВЕННАЯ ФАРМАКОПЕЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ (ПЕРВОЕ ИЗДАНИЕ, 2006 год) - часть 66