содержание      ..     13      14      15      16     ..

Технология лекарственных форм. Том 1-2 (1991 год) - часть 15

Глава 15
ПРЕПАРАТЫ ИЗ СВЕЖИХ РАСТЕНИЙ. ПРЕПАРАТЫ БИОГЕННЫХ СТИМУЛЯТОРОВ

15.1. ПРЕПАРАТЫ ИЗ СВЕЖИХ РАСТЕНИЙ

Галеноеые и новогаленовые препараты обычно получают из высушенного растительного сырья. Однако действующие вещества многих растительных материалов во время сушки и последующего хранения подвергаются изменениям вследствие энзимэтических процессов, испарения, действия кислорода воздуха и других факторов Так, например, исследования, проведенные отделом фармакогнозии ВИЛР, показы вают, что после 1 года хранения биологическая активность травы ландыша уменьшается на 77%, содержание эфирного масла в корнях валерианы - на 50% и т.д. В ряде случаев препараты, полученные из свежих растений, обладают большей активностью, чем соответствующие препараты из высушенного сырья. Так, настойка из свежих корней валерианы в 2-3 раза активнее настойки, полученной из высушенных корней. Фитонцидная активность наблюдается, как правило, лишь в препаратах, приготовленных из невысушенного растительного сырья.

Указанные наблюдения приводят к выводу о целесообразности использования в ряде случаев препаратов из сеежгх растений. Однако массовая переработка свежесобранного сырья имеет трудности чисто технического порядка. Ввиду того что многие растения зацветают и созревают в одно и тоже время, причем время сбора их бывает весьма коротким, нужны большие производственные мощности для быстрой переработки свежего сырья. Так как свежее растительное сырье не может храниться, а транспортировка затруднена, заводы должны быть приближены к месту его заготовки. Эта проблема в нашей стране пока не решена. Поэтому препараты из свежих растений получают в небольших количествах, номенклатура их невелика, их можно разделить на три группы: экстракционные препараты (настойки, экстракты и соки)

15.1.1. Экстракционные препараты из свежих растений (настойки, экстракты)

Свежесобранное сырье отмывают от пыли и загрязнений, проветривают на воздухе и измельчают Необходимо тонкое измельчение сырья, так как живая клетка находится в состоянии тургора, протоплазма плотно прижата к клеточной стенке и, обладая свойством полупроницаемости, не пропускает наружу вещества, растворенные в клеточном соке. Поэтому для извлечения биологически активных соединений клеточные стенки необходимо разрушить. Свежее сырье содержит большое количество влаги (в среднем 50- 80%), поэтому обладает высокой упругостью и измельчается трудно. Измельчают его в специальных машинах-волчках, устроенных по типу механизированных мясорубок и вальцов. На последних растительный материал вначале раздавливается, а затем истирается.

Настойки из свежего растительного сырья получают методом мацерации или бисмацерации. Обычно из 1 части по массе несильнодействующего сырья получают 5 объемных частей настойки, а из 1 части сильнодействующего-10 объемных частей. В отдельных случаях НТД предусмотрено иное соотношение исходного сырья и готовой настойки (например, 1:4, 1:20).

При получении настоек методом мацерации, измельченное сырье заливают крепким этанолом (обычно 90%), настаивают в течение 14 сут, извлечение отделяют и сырье отжимают. Настойку отстаивают в течение 7 сут при температуре не выше 8°С и фильтруют.

При использовании метода бисмацерации, измельченное сырье первый раз заливают 96% этанолом и настаивают 7 сут; второй раз - 20% этанолом 3 сут. Объединенные извлечения отстаивают, фильтруют и получают настойки с содержанием 40-50% этанола. Их стандартизуют' по тем же показателям, что и настойки, полученные из высушенных растений: содержание действующих веществ, концентрация этанола или плотность и сухой остаток. Настойки из свежего растительного сырья обычно входят в состав сложных, комплексных препаратов. В качестве примера может служить состав и технология кардиовалена и аллилчепа.

Кардиовален (Cardiovalenum). Состав: сока желтушника 17,2 мл, адонизида концентрат (активность 85 ЛЕД в 1 мл) 30,3 мл, настойки из свежих корневищ с корнями валерианы 48,6 мл, экстракта боярышника жидкого 2,2 мл, камфоры 0,4 г, натрия бромида 2,0 г, этанола 96% 1,6 мл, хлорбутанолгид-рата 0,25 г.

Жидкость светло-бурого цвета, солоновато-горького вкуса, с запахом камфоры и валерианы. Стандартизируют биологически: в I мл должно содержаться 45-55 ЛЕД. Выпускают во флаконах по 15, 20 и 25 мл. Хранят по списку Б, в прохладном, защищенном от света месте.

Аллилчеп (Allilcepum)-жидкий экстракт, получаемый из репчатого или зеленого лука (Allium sepa L.). Луковицы репчатого лука очищают от наружных пленок и измельчают на волчках. Кашицеобразную массу заливают 70% этанолом 1:1,5 и настаивают при комнатной температуре в течение 7 сут. Извлечение сливают в отстойник. Сырье в экстракторе мацерируют вторично, для чего заливают 60% этанолом (1:1) и настаивают 24 ч. По истечении указанного времени извлечение присоединяют к первому сливу Оставшееся сырье прессуют и отжим объединяют с извлечениями В полученном экстракте определяют содержание этанола (оно обычно находится в пределах 42-46%), а сухой остаток в пределах 2,3-2,5% На основании результатов анализа экстракт разбавляют 44% этанолом, чтобы содержание сухого остатка было 1,3-1,5% К стандартизованному экстракту для осветления добавляют уголь активированный (из расчета 0,3 г на 1 л) и фильтруют через фильтры-мешки из бельтинга. Аллилчеп - прозрачная жидкость желтого или зеленого цвета. Выпускают во флаконах по 50 мл, хранят в прохладном месте. Применяют внутрь по 15-20 капель при атонии кишечника, атеросклерозе.

15.1.2. Соки растений (Succi plantarum)

Институтом фармакохимии АН Грузинской ССР разработана технология соков из ряда растений. Свежесобранное растительное сырье измельчают и полученную кашицу прессуют под высоким давлением на гидравлических прессах Если сырье бедно соком, то до прессования его мацерируют этанолом. К отжатому соку немедленно добавляют этанол, обычно на 85 частей сока 15 частей 95% этанола. Для некоторых препаратов его количество увеличивают до 20-40 частей. В качестве стабилизаторов используют хлор-бутанолгидрат или натрия метабисульфит. Очищают соки отстаиванием при температуре не выше 8°С и последующим фильтрованием. Иногда применяют термическую обработку, в основном для соков, богатых ферментами, пектиновыми, белковыми, слизистыми веществами. Сок быстро нагревают до температуры не выше 80°С, выдерживают в этом режиме 30 мин и быстро охлаждают в проточной воде. Стандартизируют по содержанию действующих веществ и концентрации этанола.

В качестве примера приводим технологию некоторых соков.

Сок желтушника (Succus Erysimi) получают из свежесобранной травы желтушника раскидистого (серого) (Erysimum diffusum Ehrh. или Erysimum canescens Roth.) по выше описанной схеме. При прессовании измельченной травы получают сок в количестве 42-47% от массы растения, добавляют равный объем 95% этанола, хлорбутанолгидрат - 0,25% или натрия метабисульфит - 0,25%, отстаивают и фильтруют. Стандартизуют биологическим методом. 1 мл сока должен содержать не менее 150 ЛЕД, этанола - не менее 35%, сухой остаток -не менее 3,5%.

Сок желтушника разливают в бутыли вместимостью 20 л, укупоренные корковыми или стеклянными притертыми пробками, заливают мастикой или парафином. Хранят по списку А, в прохладном, защищенном от света месте. Сок желтушника является полуфабрикатом для приготовления препарата «Кар-диовален».

Сок подорожника (Succus Plantagirris) - это смесь сока из свежих листьев подорожника блошного (Plantago major L.) и сока из травы подорожника блошного (Plantago psyllium L.).

Сок подорожника блошного получают прессованием измельченных листьев, его выход достигает 60- 62% от массы взятого сырья (при влажности 80 - 85%). Жом вторично измельчают на волчках и отжимают на прессе. При вторичном прессовании выход сока около 10%. К отжатому соку немедленно при перемешивании добавляют 25% этанола, что обеспечивает необходимое содержание его в конечной смеси в количестве 20%, отстаивают в течение 3 сут. и фильтруют через вакуумный фильтр «Грибок», добавляют натрия метабисульфит 0,15%.

Трава подорожника блошного содержит меньше влаги и выход сока при прессовании невелик. Поэтому действующие вещества экстрагируют методом мацерации. Свежую траву дважды измельчают на волчках (эмалированной мясорубке) и немедленно заливают этанолом и водой в соотношении: 7 кг - 21 л - 14 л соответственно. Экстрагент сливают, а массу дважды отпрессовывают. Жом заливают водой дистиллированной в соотношении 2-1 для извлечения этанола и оставшихся в сырье экстрактивных веществ, уплотняют и оставляют на ночь. На второй день водный мацерат отпрессовывают и присоединяют его к э'танолыюму, определяют содержание этанола и, если необходимо, вносят его дополнительное количество до концентрации 20%. Фильтруют через фильтр «Грибок», добавляют 0,1.5% натрия метабисульфита.

Соки подорожников большого и блошного смешивают в равных соотношениях (1:1), отстаивают 7 сут и фильтруют. Эта жидкость красно-бурого цвета, кислого вкуса, ароматического запаха. Выпускают во флаконах по' 250 мл, хранят в темном, прохладном месте. Применяют при анацидных гастритах и хронических колитах.

Сок алоэ (Succus Aloes) получают из свежих листьев алоэ древовидного (Aloe arborescons Mill.). измельчая их на фарфоровых или деревянных вальцах. Из полученной кашицы отжимают сок, нагревают его при температуре 100°С выдерживают в течение 5 - 10 мин, охлаждают, помещают в отстойник, добавляют 95% этанол до концентрации 20% и оставляют в прохладном месте па 14-15 сут. После отстаивания сок декантируют, фильтруют, добавляют 0,5% хлорбутанолгидрата. Препарат содержит алоэ-эмодин и другие антраценопроизводные. Его стандартизуют по сухому остатку, содержание которого должно быть не менее 2%. Сок алоэ - мутноватая жидкость светло-оранжевого цвета, горького вкуса, под влиянием света темнеет. Выпускают во флаконах по 100 мл, хранят в прохладном, защищенном от света месте. Применяют при гастритах, запорах. Наружно используют при гнойных ранах, ожогах.

Сок, полученный по описанной выше технологии, но из консервированных листьев, входит в линимент алоэ (Linimentum Aloes), состав которого, г^- сока алоэ (консервированного) 78,0, эмульгатора К? 1 и масла касторового по 10,!; масла эвкалиптового 0,1, кислоты сорбиновой 0,2; натрий карбоксиметилцеллю-лозы 1,5. Линимент алоэ-однородная густая масса белого или светло-кремового цвета с характерным запахом. Выпускают во флаконах оранжевого стекла по 30-50 г.  Хранят в защищенном от света месте при температуре не выше 10°С. Применяют при ожогах и для предупреждения и лечения поражений кожи при лучевой терапии

Сок каланхоэ (Succus Kalanchoes) получают из свежей травы культивируемого растения каланхоэ перистого (Kalanchoe pinnata Lam. Pcrs.) по общей схеме прессованием превращенного в кашицу растительного материала. Сок отстаивают, декантируют и для осветления фильтруют через мезгу. Потерю сока исключают заменой декантации сепарацией. Процесс проводят на жидкостном сепараторе тарельчатого типа Осадок, содержание которого в исходном соке 0.07%, оседает в шламовом отделе сепаратора, а осветленная жидкость (фугат) выводится в приемно-отводящее устройство. После сепарации сок* подвергают стерилизующей, фильтрации. В качестве консерванта добавляют 0,5% хлорбутанолгидрата.

Препарат содержит дубильные вещества (0,09 - 0,13%), витамины (Р и С), полисахариды, кислоты органические, минеральные соли. Плотность сока 1,014-1,015 г/см^-5; значение рН 4,0-5,0. Он представляет собой жидкость желтого цвета, ароматического запаха, прозрачную или слегка опалесцирующую, с мелкой взвесью, легко разбивающейся при встряхивании. Выпускают в ампулах по 3,5, 10 мл, во флаконах-по 10, 20. 100 мл, хранят в защищенном от све та месте, при температуре не выше L0°C. Сок входит в состав мази каланхоэ.

Мазь каланхоэ {Unguentum Kalanchoes) Состав: сока каланхоэ 40,0 г, фуразолидона и новокаина по 0,25г, ланолина безводного 60,0 г.

Выпускают по 10, 30, 50 г, хранят при температуре не выше 10°С.

Сок каланхоэ нашел широкое применение в хирур гической. стоматологической, акушерско-гинекологической, оториноларингологической и офтальмологической практике. Сок и мазь применяют наружную при трофических язвах, незаживающих ранах, ожогах, пролежнях и т п.

15.2. ПРЕПАРАТЫ БИОГЕННЫХ СТИМУЛЯТОРОВ

Биогенные стимуляторы -это вещества, образующиеся в изолированных тканях животных и растений, которые находятся в условиях, неблагоприятных для их существования: для тканей животных -это пониженная температура (2-4° выше нуля), для растительных - пониженная температура и темнота. При этом в клетках тканей происходят биохимические изменения, в результате которых вырабатываются и накапливаются активные вещества, способные поддерживать жизненные процессы. Появление этих веществ рассматривают как результат адаптации тканей к условиям среды.

Первые исследования в этой области выполнены в конце 30-х годов XX в. академиком В. П. Филатовым, предложившим и название для этой группы веществ «биогенные стимуляторы».

Биогенные стимуляторы активизируют в организме жизненные процессы, повышают сопротиволяемость и регенеративные свойства, что способствует выздоровлению Биогенные стимуляторы не имеют видовой и гистологической специфичности. Разные животные и растительные ткани в одинаковых условиях могут вырабатывать и накапливать одинаковые вещества. Химия биогенных стимуляторов полностью не выяснена. По-видимому, они представляют сложный комплекс веществ, из которого выделены кислоты ароматического ряда, непредельные дикарбоновые кислоты, ненасыщенные ароматические соединения (кислоты коричная и оксикоричная, кумарин). Биогенные стимуляторы обладают некоторыми общими физико-химическими свойствами: они растворимы в воде, частично перегоняются с водяным паром, термостойки (выдерживают стерилизацию при температуре 120°С).

В качестве примера приводим технологию некоторых препаратов биогенных стимуляторов.

Экстракт алоэ жидкий (Extractum Aloes fttiidum) получают из биостимулированных (консервированных) листьев алоэ древовидного (Aloe arbo-rescens Mill.) Для биостимуляции листья алоэ сохраняют в темноте при температуре 4-8°С в течение 10-12 сут. Затем их моют, обсушивают, удаляют зубчики, пожелтевшие концы и измельчают на вальцах. Полученную кашицу заливают 3-кратным количеством воды дистиллированной и настаивают при комнатной температуре. Через 2 ч содержимое настойника нагревают, кипятят 1-2 мин й фильтруют. Фильтрат охлаждают, измеряют объем и определяют его окис-ляемость - пробу фильтрата титруют 0,01 н, раствором калия пермаиганата в присутствии кислоты серной. В соответствии с данными анализа фильтрат разбавляют таким количеством воды, чтобы его окис-ляемость равнялась 1500 мг кислорода на 1 л фильтрата. Затем добавляют натрия хлорид (7 г на 1л), снова кипятят 2 мин и фильтруют. Водный экстракт алоэ - прозрачная жидкость от светло-желтого до красно-желтого цвета

Препарат для внутреннего применения выпускают во флаконах по 100 мл Хранят в обычных условиях

Для получения препарата для инъекций, прозрач ный экстракт (значение рН 5,0-6,8) разливают в ам пулы по 1 мл и стерилизуют при температуре 120°С в течение 1 ч Хранят в защищенном от света месте

Биосед (Biosedum) водный экстракт из био стимулированной свежей травы очитка большого (Se-dum maximum (L.) Suter], которую измельчают, заливают 10-кратным количеством воды и нагревают до температуры 95-98°С в течение 10 мин. Операцию повторяют дважды Предложен способ, по которому из измельченной травы вначале отжимают сок, а жом экстрагируют водой (1 10) при температуре 95-98°С, повторяя операцию 4 раза Извлечения и сок объединяют, отстаивают, фильтруют Биосед - прозрачная жидкость, светло-желтого цвета со слабым своеобраз ным запахом, значение рН 5,0-6,5. Его разливают в ампулы по I мл, стерилизуют при температуре 120°С 30 мин, хранят в защищенном от света месте.

Пелоидин (Peloidinum) представляет собой водный экстракт лечебной грязи Куяльницкого лимана, расположенного недалеко от Одессы.

Лечебную грязь загружают в керамический бак в количестве 280 кг, туда же помещают 6,68 кг натрия хлорида и 420 л воды. Смесь настаивают при постоянном перемешивании от 3 до 6 сут, пока отстоявшая ся над грязью профильтрованная жидкость будет иметь плотность 1,008 1,010, содержание хлоридов 11,5-13,5 г/л, сухой остаток 12-16 г/л, значение рН 8,2-9,5. Затем жидкость сливают с осадка и фильтруют для удаления механических включений и микроорганизмов: первый раз - через глубинные фильтры, второй - через стерильные пластины или мембранные фильтры с диаметром пор не более 0,3 мкм. Фильтрат нагревают в течение 1,5 ч при температуре 60-70°С и после охлаждения в асептических условиях разливают ва флаконы по 0,5 л. Препарат представляет собой прозрачную бесцветную жидкость. Хранят в прохладном, защищенном от света месте.

П ел о и д од и с т ил л я т для инъекций (Pelo-idodistiltatum pro injecttonibus) получают из лечебной грязи Куяльницкого лимана путем ее перегонки с водяным паром (обычно из I кг грязи около 72 мл отгона). Из отгона удаляют водорода сульфид и серу (см. ФиБС), фильтруют равливают в ампулы по 1 мл и стерилизуют при температуре 120°С в течение 1 ч. Препарат представляет собой бесцветную жидкость, значение рН 7,2-9,5. Хранят в защищенном от света месте.

ФиБС для инъекций (Fibs pro injectionibus) получил название от начальных букв фамилий авторов препарата: академика В. П. Филатова, В. А. Би-вер и В. В. Скородинской. Сырьем для получения препарата служит иловая грязь Куяльницкого лимана, которую перегоняют с водяным паром. Отгон содержит большое количество серы и водорода сульфида. Для осаждения серы к отгону добавляют натрия хлорид (7,5 г на 1 л), отстаивают и фильтруют через тканевой фильтр. Фильтрацию заменяют сепарацией на жидкостном сепараторе тарельчатого типа, которая обеспечивает получение прозрачного раствора при высокой производительности - 55 л/ч. Водорода сульфид удаляют нагреванием и раствор повторно перегоняют для освобождения от натрия хлорида. Для приготовления препарата ФиБС в пелоид добавляют кислоту коричную (0,3-0,4 г на 1 л) и кумарин (0,1 г на 1 л), раствор фильтруют. ФиБС-бесцветная жидкость с запахом кумарина; значение рН 4,6- 5,4. Выпускают в ампулах по 1 мл. Стерилизуют при температуре 120°С в течение 1 ч. Хранят в защищенном от света месте.

Гумизоль (Humisolum) получают из хаапсалу-ской морской лечебной грязи. Представляет собой 0,01% раствор фракций гуминовых кислот морской грязи в изотоническом растворе натрия хлорида. Прозрачная или слегка опалесцирующая жидкость с желтоватым оттенком, без запаха, нейтральной реакции. Выпускают в ампулах по 2 и Ш мл. Стерилизуют при температуре 120°С в течение 1 ч. Хранят в защищенном от света месте.

Тор фот (Torfotum) -отгон торфа из определенных месторождений. Прозрачная бесцветная жидкость, с характерным запахом торфа; значение рН 6,0-8,8. Выпускают в ампулах по 1 мл. Стерилизуют при температуре 120''С в течение 1 ч. Хранят в защищенном от света месте.

Контрольные вопросы

1.  Объясните, в чем заключаются особенности экстрагирования свежего растительного сырья.

2.  Как измельчают свежее растительное сырье м какие машины используют для этой цели?

3.  В чем заключаются особенности получения настоек из свежего растительного сырья и по каким показателям их стандартизуют?

4.  Укажите экстракты и соки, получаемые из свежих лекарственных растений.

5.   Каким методом получают соки растений, как их очищают н стабилизируют?

6.  В чем заключаются особенности технологии сока подорожника?

7.  В чем состоят особенности получения соков алоэ и каланхоэ и чем их можно объяснить? Какие лекарственные формы изготавливают из этих соков?

8.  Объясните принцип биостимуляции растительных тканей.

9.  В чем заключаются особенности получения жидкого экстракта алоэ?

10.      Из какого сырья получают биосед? Укажите особенности получения препарата и его применение.

11.      Укажите препараты, получаемые нз лечебной грязи, перечислите особенности их технологии.

Глава 16
НОВОГАЛЕНОВЫЕ (НЕОГАЛЕНОВЫЕ) ПРЕПАРАТЫ (PRAEPARATA NEOGALENICA)

Новогаленовые (максимально очищенные экстракционные) препараты - это фитопрепараты, содержащие в своем составе действующие вещества исходного лекарственного сырья, в их иативном (природном) состоянии, максимально освобожденные от балластных веществ. Глубокая очистка повышает их стабильность, устраняет побочное действие ряда балластных веществ (смолы, танниды и др.), позволяет использовать для инъекционного применения. Кроме того, в отличии от галеновых, которые в ряде случаев стандартизуют по сухому остатку, новогаленовые препараты выпускают стандартизованными биологическими или химическими 'методами по действующим веществам.

Первый новогаленовый препарат под названием ди-гипурат предложен в конце XIX в, в Германии. Исследования по разработке технологии отечественных новогаленовых препаратов впервые выполнены во

ВНИХФИ. В 1923 г. профессор О. А. Степун предложил адонилен. Затем разработаны способы получения и организовано производство ряда новогаленовых препаратов, которые в настоящее время заменены новыми, более эффективными. Исследования приводились ВИЛР, в ХНИХФИ, в институте фармакохимии им. К- Г. Кутателадзе АН Грузинской ССР.

16.1. ТЕХНОЛОГИЯ НОВОГАЛЕНОВЫХ ПРЕПАРАТОВ

Технология новогаленовых препаратов характеризуется резко выраженным индивидуальным подходом, обусловленным характером исходного лекарственного растительного сырья, свойствами действующих и сопутствующих веществ и типом получаемого препарата. Поэтому общие принципы их производства могут быть описаны лишь в самых общих чертах. Технологический процесс складывается из следующих стадий: экстракция лекарственного растительного сырья, очистка экстракта, стандартизация, получение лекарственных форм.

Большое внимание уделяют выбору экстрагента и метода экстракции. Экстрагент подбирают с учетом избирательности (селективности), т. е. стремятся к тому, чтобы он максимально извлекал комплекс действующих вешеств и как можно меньше сопутствующих. При этом он должен не только хорошо растворять действующие вещества, но и легко десорбировать их с растительного материала. Последним обстоятельством объясняется использование смеси растворителей. При получении новогаленовых препаратов наряду с широко употребляемыми экстрагентами (этанол, вода) используют водные растворы кислот, солей, смеси этанола с хлороформом и др.

При выборе метода экстракции стремятся с наименьшей затратой времени и экстрагента получить концентрированное, т. е. обогащенное' действующими веществами, извлечение. Наиболее широко при получении новогаленовых препаратов используют противо-точную экстракцию, иногда мацерацию с циркуляцией экстрагента или с механическим перемешиванием (при работающей мешалке); при применении легко летучих экстрагентов - циркуляционную у экстракцию.

16.1.1. Способы очистки извлечений, применяемые для выделения суммы действующих веществ

На стадии очистки извлечения подвергают последовательной обработке, целью которой является выделение комплекса действующих веществ в нативном состоянии, свободного от балласта. Приемы и способы очистки первичных извлечений весьма разнообразны и индивидуальны.

Наиболее широко используют избирательное, фракционное осаждение действующих или балластных веществ, экстракцию в системах жидкость - жидкостью, адсорбцию и ионный обмен. .

Фракционное осаждение действующих или балластных веществ может быть достигнуто сменой растворителя. При проведении экстракции неполярным или малополярным (органическим) растворителем очистка извлечения от гидрофобных веществ (хлорофилл, смолы и др ) достигается удалением (отгонкой) экстра гента и добавлением к остатку воды. Растворимость гидрофобных веществ при этом понижается, они выпадают в осадок и удаляются фильтрованием или -центрифугированием. Добавляя к этанольным растворам эфир, осаждают и удаляют сапонины (кардинолиды остаются в растворе) Введением к водным извлечениям этанола в концентрации не менее 50% осаждают белки, пектины, слизи и другие гидрофильные биополимеры. Извлечения, частично очищенные от биополимеров, получают при непосредственном использовании в качестве экстрагента этанола в концентрации не ниже 70%. Этанол, являясь гидрофильным, отнимает в растворе у молекул природных ВМС гидратную оболочку, вызывает их осаждение, а сам при этом гидратируется. Для избирательного «выса ливания» высокомолекулярных соединений (белки, ка меди, слизи, пектины) используют растворы нейтральных солей. Механизм высаливания состоит в том, что добавляемые анионы и катионы солевого раствора гидратируются, отнимая воду у молекул биополимера, способствуя их слипанию и осаждению.

Способность к высаливанию наиболее выражена у анионов солей. По силе высаливающего действия анионы и катионы располагаются в следующие ряды убывающей активности.

Эти ряды называются липотропными. Наибольшим высаливающим эффектом обладает лития сульфат На практике для высаливания чаще применяют натрия сульфат или натрия аммония хлориды.

Экстракция в системах жидкость - жидкостью является процессом диффузионным, при котором одно или несколько растворенных веществ извлекаются из одной жидкости другой, нерастворимой или ограниченно растворимой в ней.

В результате взаимодействия экстрагента с исходной жидкостью получают экстракт - раствор извлеченных веществ и рафинат - остаточный исходный раствор, обедненный извлекаемыми веществами и содержащий некоторое количество экстрагента. Пере ход веществ происходит при наличии разности концентрации между жидкими фазами по закону равновесного распределения до динамического равновесия между ними. Согласно этому закону, отношение равновесных концентраций распределяемого между двумя жидкими фазами веществ есть величина постоянная (для данной температуры), называемая коэффициентом распределения:

где Y и X - равновесные концентрации распределяе мого вещества в экстракте и рафинате, %.

Процесс экстракции в системах жидкость - жидкостью складывается из следующих стадий: смешивание исходного раствора с экстрагентом для создания между ними тесного контакта, разделение двух не-смешивающихся жидких фаз, регенерация экстрагента, т. е. удаление его из экстракта и рафината Для экстракции в системах жидкость - жидкостью используют следующие основные типы экстракторов^-, смесительно-отстойные, колонные, центробежные.

Смесительно-отстойные экстракторьк Простейшим из них является аппарат с мешалкой. Ъ аппарат загружают исходный раствор и экстрагент, их перемешивают до состояния, возможно более близкого к равновесному. Затем разделяют на два слоя: экстракт и рафинат. Экстракцию обычно проводят многократно: один и тот же раствор обрабатывают несколькими порциями экстрагента, каждый раз смешивая, расслаивая и выводя его из аппарата. Процесс обработки ведут до тех пор пока не получат рафинат заданного состава. Недостатками способа является большой расход экстрагента и затруднения при разделении жидких фаз, так как при механическом перемешивании несмешивающихся жидкостей часто возникают устойчивые, плохо разделяющиеся эмульсии.

Колонные экстракторы. Это экстракторы подразделяют на аппараты без подвода дополнительной энергии извне (гравитационные) и с подводом внешней энергии во взаимодействующие жидкости.

Гравитационные экстракторы подразделяют на полые распылительные экстракторы, насадочные экстракторы и экстракторы с ситчатыми тарелками. Они отличаются простотой конструкции, обусловленной отсутствием движущихся частей Однако высокую интенсивность массопередачи в них можно достичь только в том случае, если жидкости обладают достаточной разностью плотностей (более 100 кг/м³) и низким межфазным натяжением.

Рис. 16.1. Устройство колонного полого (распылительного) экстрактора.

Полые распылительные экстракторы представляют собой полую колонну (рис. 16.1), внутри которой имеются лишь устройства для ввода тяжелой и легкой фаз. Колонна полностью заполняется тяжелой жидкостью, которая движется сплошным потоком сверху вниз. Она удаляется из корпуса колонны через гидравлический затвор. Для создания возможно большей поверхности контакта фаз и соответственно для увеличения скорости массопередачи легкая жидкость вводится в аппарат через распылитель и в виде капель поднимается вверх. В верхней части экстрактора капли сливаются и образуют слой легкой фазы, которая отводится сверху колонны. Распылительные колонны обладают низкой интенсивностью массопередачи, что объясняется укрупнением капель дисперсной фазы и обратным перемешиванием, при возникновении которого капли дисперсной фазы увлекаются час тицами сплошной фазы (или наоборот) В результате в колонне создаются местные циркуляционные токи, нарушающие их противоток. Для уменьшения обратного перемешивания в таких колоннах устанавливают перегородки различных конструкций (чередующиеся диски, кольца, тарелки с сегментными вырезами и др.). Капли дисперсной фазы, коалесцируя, обтекают перегородки в виде тонкой пленки, омываемой сплошной фазой.

Насадочные экстракторы представляют собой колонны, заполненные насадочными телами, в качестве которых используют керамические и стальные кольца или цилиндры. Насадка в экстракторах обычно располагается на опорных колосниковых решетках слоями высотой от 2 до 10 диаметров колонны. Одна из фаз диспергируется с помощью распределительного устройства и движется в колонне противотоком к сплошной фазе. Насадка способствует более эффективному взаимодействию фаз в аппарате, так как, проходя через нее, капли многократно коалесци-руют и вновь дробятся. Окончательная коалесценция капель и образование слоя диспергируемой фазы происходит в отстойной зоне колонны по выходе из слоя насадки.

В насадочных и распылительных экстракторах осуществляется постоянная противоточная экстракция- исходный раствор непрерывно отдает распределяемое вещество движущемуся противотоком экстрагенту

Экстракторы с ситчатыми тарелками выполнены в виде колонн, разделенных тарелками на секции (рис. 16.2). Аппарат заполняется сплошной фазой (например, тяжелой жидкостью), которая протекает с тарелки на тарелку через переливные трубки. Диспергируемая фаза (в данном случае легкая жидкость), вводимая противотоком к сплошной, проходя через отверстия ситчатых тарелок, многократно дробится на капли и струйки, которые в свою очередь распадаются на капли в межтарелочном пространстве Капли под действием подъемной силы движутся в сплошной фазе и сливаются вновь образуя слой лег кой фазы под каждой расположенной выше тарелкой В случае если диспергируется тяжелая фаза, слой этой жидкости образуется над тарелками Когда гид ростатическое давление слоя жидкости становится достаточным для преодоления сопротивления отверстий гарелки, жидкость, проходя через них, диспергируется вновь.

К экстракторам с подводом внешней энергии во взаимодействующие жидкости относятся роторно-дисковые экстракторы, колонные экстракторы с мешалками и пульсационные экстракторы.

Роторно-дисковые экстракторы (рис. 16.3) сделаны в виде колонны, которая кольцевыми перегородками, укрепленными на ее стенках, разделена на секции. По оси колонны вращается ротор-вал, на который засажены плоские диски, размещенные симметрично относительно перегородок. Две соседние кольцевые перегородки и диск между ними образуют секцию колонны.

Одна из фаз (например, легкая) диспергируется с помощью распределителя и, двигаясь противотоком с тяжелой фазой, многократно смешивается с ней (редиспергируется) в секциях колонны вращающимися дисками. Расслоение фаз происходит в верхней и нижней отстойных участках колонны, отделенных от смесительной перфорированными перегородками.

Колонные экстракторы с мешалками различаются конструкцией перемешивающих устройств. Вместо плоских дисков на валу устанавливают лопастные или открытые турбинные мешалки. Имеются экстракторы, у которых между смесительными секциями расположены отстойные зоны, заполненные сеткой или насадочными телами (рис. 16.4).

В пульсационных экстракторах введение дополнительной энергии в жидкости осуществляется приданием им возвратно-поступательного движения-пульсации, которая увеличивает турбулентное движение потоков и степень дисперсности фаз, повышая тем самым эффективность массопередачи. Наиболее часто пульсация жидкостей как средство интенсификации массообмена используется в ситчатых и насадочных экстракторах. В качестве пульсатора применяют бесклапанный поршневой, плунжерный и мембранный насосы или же специальное пневматическое устройство.

Центробежные экстракторы. Они выгодно отлича ются от других тем, что позволяют проводить экстрактцию с максимальной скоростью и использовать растворители, плотности которых мало различаются между собой.

Устройство трубчатого центробежного экстрактора представлено на рис. 16.5. Цилиндрический барабан (3) имеет скорость вращения 1500-5000 об/мин. Внутри барабан разделен перфорированными перегородками (7) на ряд экстракционных II, IV, VI и сепарационных I, III, V, VII участков. Жидкости поступают в барабан по обособленным каналам, проходящим внутри неподвижного цилиндра (4). Тяжелая жидкость подается по каналу (2) в нижний экстракционный участок VI, легкая - по каналу (6) в верхний экстракционный участок II. Двигаясь в барабане противотоком, жидкости многократно перемешиваются, проходя между неподвижными перфорированными дисками (5), закрепленными на цилиндре (4). Эмульсия, образовавшаяся при этом, предварительно расслаивается при прохождении через перфорированные отбойные перегородки (7), которые сделаны в виде нескольких дисковых или конусных тарелок, как у тарельчатого сепаратора. Окончательное разделение фаз происходит под действием центробежной силы в сепарационных участках. Жидкие фазы (экстракт и рафинат) удаляются из экстрактора через обособленные каналы; легкая - через верхний кольцевой слив (8), тяжелая - через нижний (1)

Адсорбция - это процесс поглощения одного или нескольких компонентов из газовой смеси или раствора твердым веществом, называемым адсорбентом. В качестве адсорбентов в технологии лекарственных форм применяют пористые твердые вещества с большой удельной поверхностью, наиболее распространенными являются: алюминия оксид, силикагель (гель кислоты кремневой), уголь активированный, кизельгур Адсорбенты бывают зернистыми - в виде частиц неправильной или почти сферической формы размером 2-8 мм и пылевидными, состоящими из частиц размером 50-200 мкм.

Процессы адсорбции избирательны и обратимы. Поэтому возможно удаление из раствора балластных веществ или поглощение твердым адсорбентом действующих. Затем благодаря обратимости процесса происходит выделение поглощенных веществ из адсорбента или их десорбция. Адсорбцию проводят в специальных аппаратах - адсорберах, простейшим из них является вертикальный цилиндрический аппарат периодического действия, заполненный адсорбентом. Вначале через адсорбент пропускают раствор и насыщают его поглощаемым веществом, затем фильтруют десорбент - растворитель или смесь растворителей, вытесняющую поглощенное вещество.

Для проведения непрерывной адсорбции применяют установки из нескольких адсорберов периодического действия, в которых попеременно происходят адсорбция и десорбция.

Ионообменные процессы - взаимодействие растворов электролитов с ионитами, способными обменивать подвижные ионы на эквивалентное их количество, находящееся в растворе. Иониты, содержащие кислые активные группы и обменивающиеся с раствором электролита подвижными анионами, называются аммонитами, а иониты, содержащие основные активные группы и обменивающиеся подвижными катионами - катионитами В качестве ионитов наиболее широко применяют синтетические ионообменные смолы

16.2. ЧАСТНАЯ ТЕХНОЛОГИЯ НОВОГАЛЕНОВЫХ ПРЕПАРАТОВ

Ряд новогаленовых препаратов (адонизид, ланто-зид, дигален-нео, коргликон, эрготал) являются официальными и включены в ГФ XI. Наряду с ними промышленность выпускает новогаленовые препараты, которые нормируются ВФС. Следует отметить, что самую большую группу составляют препараты, получаемые из лекарственного растительного сырья, содержащего сердечные гликозиды. Это и понятно, так как до настоящего времени растительное сырье является единственным источником получения сердечных гликозидов. Отдельные новогаленовые препараты получают из лекарственного растительного сырья, содержащего алкалоиды, флавоноиды, полисахариды и другие действующие вещества.

В качестве примера приведем технологию некоторых новогаленовых препаратов

Адонизид (Adonisidum) получают из травы адониса весеннего (горицвета или черногорки) (Adonis vernalis L.) Технология препарата разработана Ф Д. Зильберг (ВНИХФИ). Измельченную траву горицвета весеннего (активность не менее 50-66 ЛЕД в 1 г) экстрагируют циркуляционным способом в аппарате типа Сокслета. В качестве экстрагента используют смесь, состоящую из 95 частей хлороформа и 5 частей 96% этанола по объему. Указанный экстрагент получил название универсального, так как относительно хорошо извлекает все сердечные гликозиды. В то же время сопутствующие гидрофильные вещества переходят н эту смесь а незначительных количествах. Экстракцию растительного сырья проводят до полного извлечения гликозидов. В полученном извлечении наряду с гликозидами (адонитоксин, цимарин и др.) содержатся хлорофилл, органические кислоты, смолоподобные вещества и др. Отделение суммы гликозидов от основной массы гидрофобных сопутствующих веществ осуществляют путем смены растворителя. Для этого из полученного извлечения отгоняют экстрагент пря температуре не выше 60°С и разрежении не менее 59994,9 Н/м². Когда кубовый остаток в испарителе по массе приблизительно будет равен взятому сырью, к нему добавляют равное количество воды и продолжают упаривание до полного удаления хлороформа и этанола При этом в осадок выпадают все нерастворимые в воде вещества (хлорофилл, смолы и др.). Водный раствор, содержащий сумму гликози-дов, небольшое количество пигментов и других балластных веществ, сливают с осадка и фильтруют на нучт-фильтре через двойной слой фильтровальной бумаги и слой алюминия оксида толщиной 1 - 1,5 см Эта операция служит для удаления оставшихся в растворе балластных веществ, причем алюминия оксид практически не адсорбирует сердечные глико-зиды и они переходят в фильтрат.

В фильтрате определяют биологическую активность. Из 275 кг травы горицвета (50-60 ЛЕД) получают около 100 кг концентрата адонизида (100-200 ЛЕД в 1 мл) После этого к концентрату добавляют этанол, хлорбутанолгидрат и воду в таком количестве, чтобы в 1 мл конечного продукта содержалось' 20% этанола, 0,5% хлорбутанолгидрата и 23-27 ЛЕД. Предназначен препарат для внутреннего применения и выпускается во флаконах темного стекла по 15 мл. Хранят адонизид в прохладном, защищенном от света месте, список Б. Препарат контролируют ежегодно. Применяют в качестве сердечного (кардиотонического) средства

Адонизид-концентрат с активностью 85 - 100 ЛЕД в J мл и содержанием этанола не менее 20% выпускается в бутылях, как полуфабринат, который используется для производства препарата «Кардионален». Список А.

«Сухой адонизид» предложен Н. А Бугрим и Д. Г. Колесниковым (ХНИХФИ). Он получен дополнительной очисткой адонизада-концентрата. Сумму гликозидов экстрагируют из водного раствора хлороформ-этанольной смесью (2:1). Полученное извлечение упаривают, остаток растворяют в 20% этаноле и раствор пропускают через колонку, заполненную алюминия оксидом сорта «для хроматографии». Колонку промывают 20% этанолом до отрицательной реакции подлинности в элюате. Из объединен ных элюатов и фильтрата экстрагируют гликозиды хлороформ-этанольной смесью (2:1). Извлечение обез воживают высушенным натрия сульфатом, упаривают в вакууме досуха, остаток растворяют в 95%■ этаноле Из полученного раствора гликозиды осаждают эфиром. Осадок отделяют и сушат Получают аморфный желтый порошок горького вкуса, негигроскопичный, стойкий при хранении в обычных условиях. Выход из 2 кг адонизида-концентрата (85 ЛЕД в 1 г) составляет 8,1-8,5 г адонизида сухого.

Биологическая активность препарата 14 ООО - 20 000 ЛЕД в 1 г Применяют для приготовления таблеток, содержащих по 0,00075 г адонизида Актив ность одной таблетки - 10-15 ЛЕД.

Лантозид (Lantosidum) получают щ листьев наперстянки шерстистой (Digitalis lanata Ehrh.), активность не менее 60 ЛЕД в 1,0 г. Листья измельчают и экстрагируют 24% этанолом в двух экстракторах. В экстрактор № 1 загружают 50 кг сырья, заливают 8-кратным количеством этанола и настаивают в течение 16-20 ч. Для ускорения диффузии растворитель циркулируют 2-3 раза. Полученный экстракт в количестве 300 л сливают в отстойник для осаждения балластных веществ. В экстрактор № i заливают новую порцию 24% этанола в количестве 400 л и настаивают 16-20 ч. Затем ее сливают и используют в качестве экстрагента свежей порции сырья, загруженного в экстрактор № 2 Через 16-20 ч из влечение из экстрактора № 2 сливают в отстойник для осаждения балластных веществ, а в него снова заливают 400 л 24% этанола и оставляют для настаивания на 16-20 ч, после чего экстракт сливают и используют для следующей порции сырья.

Из отработанного сырья в экстракторе № 1 ре куперируют этанол, в него загружают новую порцию сырья и настаивают с извлечением, полученным из экстрактора № 2, и т.д. Последующую экстракцию проводят так же, как описано выше.

В каждой отдельной порции водно-этанольного экстракта в количестве 300 л осаждают балластные вещества 40% водным раствором свинца уксуснокислого. Раствор прибавляют постепенно по 1,0-1,5 л при перемешивании. Всего на осаждение расходуется 20 л раствора свинца уксуснокислого. По достижении полноты осаждения, которая определяется по отсутствию помутнения пробы при прибавлении к пен нескольких капель раствора свинца уксуснокислого, образовавшийся аморфный осадок отстаивают 18-20ч. Прозрачный раствор сифонируют, а оставшуюся часть вместе с осадком отфильтровывают через бельтинг. Раствор объединяют с фильтратом и обрабатывают для осаждения ионов свинца 25% раствором натрия сульфата, добавляя его порциями по 0,5 л На полное осаждение ионов свинца расходуется 12 л раствора

Из очищенного водно-этанольного экстракта глико-зиды извлекают органическим растворителем. Для этого 200 л экстракта и 20 л смеси метилена хлористого и этанола (3:1) перемешивают в аппарате с мешалкой в течение 30 мин, затем на 30 мин оставляют для pacC-лаивания и отстоявшейся нижний слой раствора гликозидов в метилене хлористом сливают. Операцию повторяют три раза, каждый раз загружая в аппарат по 20 л смеси метилена хлористого с этанолом (3:1), Экстракт обезвоживают высушенным натрия сульфатом, отгоняют растворитель при температуре 37-40°С и разрежении 66661-73327,1 Н/м\ Кубовый остаток в количестве 1,5-2,0 л сливают в кристаллизатор и помещают в вытяжной шкаф. По мере испарения метилена хлористого выделяется сумма гликозидов в количестве 285,8 г. Гликозиды растворяют в 3 л 96% этанола и определяют биологическую активность. На основании полученного анализа в раствор добавляют этанол и воду с таким расчетом, чтобы активность препарата составляла 10-12 ЛЕД в I мл, а содержание этанола - 68-70%. Полученный раствор фильтруют на фильтр-прессе через стерилизующие пластины. Технология препарата разработана в ВИЛР.

Лантознд выпускают во флаконах-капельницах по 15 мл. Хранят по списку Б в прохладном, защищенном от света месте. Применяют главным образом в амбулаторной практике для поддерживающей терапии при хронической недостаточности кровообращения.

Коргликон (Corgliconum) получают из травы ландыша майского (Convallaria majalis L.) и его географических разновидностей-Закавказского (С. trans-caucasica Utr.) и дальневосточного - кейскея (С. keis-kei Mieu,). Технология препарата разработана в ХНИХФИ.

Траву ландыша (биологическая активность не менее 120 ЛЕД) экстрагируют 80% этанолом в батарее из 4 экстракторов методом противотока В первый экстрактор загружают 45 кг травы, 3,0 кг кальция карбоната, 0,3 кг кальция оксида, заливают 250 л 80% этанола. Через 8-10 ч извлечение из первого экстрактора передавливают во второй подачей в непэ свежего^ экстрагента

После заполнения всех экстракторов и по истечении нужного времени настаивания в последнем из него собирают экстракт со скоростью 20 л/ч. Его подают в вакуум-выпарной аппарат и полностью отго* няют этанол при температуре 50-60°С и вакууме 86659,3-93325 Н/м² К кубовому остатку прибавляют раствор 10 г квасцов алюмокалиевых в 50 мл воды дистиллированной и отстаивают в течение 3-5 ч. Отстоявшийся раствор отделяют от смол фильтрованием через марлю. Смолу промывают раствором натрия хлорида (0,3 кг на 20 л-воды) до полного извлечения из нее гликозидов.

Водный раствор гликозидов фильтруют на нутч-фильтре через один слой бязи и два слоя фильтровальной бумаги и передают на адсорбционную колонку из нержавеющей стали, высотой 75 см, диаметром 30 см, заполненную 18 кг алюминия оксида второй группы активности. Через колонку последовательно пропускают раствор гликозидов, промывные воды и 40 л обессоленной воды. При этом водный раствор гликозидов полностью очищают от дубильных веществ. Прошедший через колонку раствор должен иметь значение рН 6,0-7,0; если оно ниже 6,0, раствор нейтрализуют натрия гидрокарбонатом.

Гликозиды из водного раствора переводят в органический растворитель, повторно обрабатывая его хлороформом до обесцвечивания последнего, а затем смесью хлороформ - этанол (3.1), при добавлении аммония сульфата, до полного извлечения гликозидов. Хлороформно-этанольное извлечение обезвоживают высушенным натрия сульфатом и упаривают при температуре 70-80°С.

К кубовому остатку в количестве 6 л прибавляют 0,5 кг высушенного натрия сульфата и 0,1 кг угля активированного, оставляют на 2 ч и фильтруют через фильтровальную бумагу. Очищенный кубоцый остаток упаривают при температуре 80-90°С и вакууме 87992,52-93325,4 Н/м^г. Сухой остаток растворяют в 3 л воды дистиллированной, фильтруют и подают на колонку, заполненную 3 кг алюминия оксида I -II группы активности. Колонку промывают водой дистиллированной. Из очищенного водного раствора глико-зиды извлекают хлороформ -эта нольной смесью (4:1) Извлечение обезвоживают высушенным натрия сульфатом и сгущают при вакууме 79993,2-86659,3 Н/м^г до 1 л кубового остатка. К нему приливают эфир этиловый, быстро перемешивают и эфир сливают. Остаток растворяют в 1,3 кг ацетона, добавляют 0,1 кг угля активированного и фильтруют. Фильтрат упаривают до консистенции экстракта густого. Экстракт растирают с безводным эфиром, эфир сливают и операцию повторяют 5-7 раз до получения тонкого аморфного порошка, который растирают до полного удаления эфира и сушат на воздухе. Выход коргликона 100 г, активность 19 000-27 000 ЛЕД в 1 г

Препарат выпускают в виде 0,06% раствора для инъекций в ампулах по 1 мл (активность И - 16 ЛЕД). Раствор готовят с добавлением консерванта - 0,4% хлорбутанолгидрата, стерилизуют фильтрованием через мембранные фильтры с диаметром пор не более 0,3 мкм. Хранят в прохладном, защищенном от света месте по списку Б. Применяют внутривенно, при острой сердечной недостаточности.

Э р г от а л (Ergotalum) - препарат, содержащий сумму фосфорнокислых солей алкалоидов спорыньи. Сырьем для получения эрготала служит спорынья (Secale cornutum), которая содержит семь пар стерео-изомерных алкалоидов^- каждому левовращающему и биологически активному алкалоиду соответствует его правовращающий, практически неактивный стереоизо-мер. Из них 6 пар алкалоидов: эрготамин-эрготами-нин, эргостин-эргостинин, эргозин-эргозинин, эрго-корнин - эргокорнинин, эргокристин - эргокритинин, эргокриптин - эргокриптинин - представляют собой группу водонерастворимых, а эргометрин - эргометри-нин - растворимые в воде. Алкалоиды спорыньи весьма нестойкие соединения, чувствительные к свету» кислороду воздуха, высокой температуре. Они, легко переходя из одной изомерной формы в другую, разлагаются и образуют прочные комплексы со своими правовращающими изомерами и «растворителями. Поэтому все операции по выделению алкалоидов спорыньи проводят при пониженной температуре в токе углерода диоксида.

Технология эрготала разработана в 1954 г. в ХНИХФИ. Спорынью замачивают в воде при температуре не выше 10°С на 1-2 ч. Водную жидкость, содержащую главным образом красящие вещества, сливают, а растительное сырье промывают в проточной воде, пока стекающая жидкость не станет бесцветной. Разбухшую и промытую спорынью пропускают сквозь валковые мельницы и превращают в тонкие расплющенные пластинки, имеющие большую суммарную поверхность.

Измельченное сырье обрабатывают водным раствором кислоты хлороводородной, имеющей значение рН 1,7 в экстракторе с паровой рубашкой, через которую подается холодная вода. В этих условиях в раствор переходят главным образом красящие и другие сопутствующие вещества, алкалоиды практически не извлекаются. Образовавшуюся вытяжку сливают, а спорынью экстрагируют водным раствором кислоты хлороводородной (значение рН 1,9-2,1) при температуре не выше 10°С.

Кислый водный экстракт, содержащий сумму алкалоидов спорыньи, а также балластные вещества (аминокислоты, амины, органические кислоты и др.), переносят в реактор с мешалкой и обрабатывают натрия хлоридом, взятым в количестве 25% от объема раствора. «Высол» - хлопьевидный коллоидный осадок, содержащий сумму солей алкалоидов спорыньи, белки, слизи и незначительное количество красящих веществ, отделяют от жидкости на суперцентрифуге Влажный осадок смешивают с магния оксидом и раствором аммония гидроксида для превращения солей алкалоидов в основания. Во избежание окисления алкалоидов эта операция проводится в токе углерода диоксида. Для связывания воды пастообразный осадок смешивают с гипсом. Затвердевшую массу пропускают через гранулятор. Гранулы помещают в закрытый шкаф и оставляют в течение 1 ч при комнатной температуре в атмосфере углерода диоксида до полного затвердевания.

Высохшие гранулы помещают в реактор и трижды экстрагируют метиленом хлористым. Полученное извлечение обрабатывают кизельгуром для обесцвечивания и высушенным натрия сульфатом для обезвоживания. Экстракция гранул и последующая обработка раствора ведется в атмосфере углерода диоксида. Из очищенных растворов отгоняют большую часть растворителя при температуре не выше 40°С и разрежении 86659,3-93325 Н/м². Кубовый остаток, представляющий собой концентрированный раствор алкалоидов в метилене хлористом, выливают тонкой струей при непрерывном помешивании в 7-кратный объем бензина. При этом алкалоиды, нерастворимые в бензине, выделяются в виде белого или светлосерого осадка. Осадок отделяют от бензина отсасыванием в токе углерода диоксида и для окончательного удаления растворителя помещают в вакуум-эксикатор. Сухой остаток содержит около 95% алкалоидов. Общий выход по алкалоидам относительно спорыньи составляет около 60%.

Сумму алкалоидов растворяют в безводном ацетоне, насыщенном углерода диоксидом, раствор фильтруют и при температуре 10°С смешивают с раствором кислоты фосфорной в абсолютном этаноле. При отстаивании в холодильнике в осадок выделяется сумма фосфорнокислых солей алкалоидов спорыньи, нерастворимых в ацетоне. Осадок отделяют от маточника, промывают ацетоном и высушивают в токе углерода диоксида при защите от света.

В настоящее время для получения эрготала используют искусственно выращенную спорынью, которая отличается от дикорастущей составом алкалоидов, их растворимостью и другими свойствами. В связи с этим в ХНИХФИ разработан способ получения эрготала по следующей схеме: экстракция алкалоидов из спорыньи кислотой хлороводородной (значение рН 1,7-1,9) при температуре 10°С; адсорбция алкалоидов из кислого водного экстракта на кизельгуре или другом кремнийсодержащем сорбенте в присутствии 10% натрия хлорида; десорбция алкалоидов с кизельгура метиленом хлористым или хлороформом в присутствии щелочного агента и упаривание элюатов до небольшого объема; смешивание упаренных элюатов с алюминия оксидом для хроматографии и высушивание этой смеси; элюирование алкалоидов с алюминия оксида смесью бензола и хлороформа (1:1) и упаривание элюата досуха; растворение остатка в ацетоне и осаждение эрготала этанольным раствором кислоты фосфорной.

Выход суммы фосфорнокислых солей алкалоидов по этому способу составляет не менее 80%.

' Эрготал - порошок белого или серого цвета. Выпускается в таблетках по 0,0005 и 0,001 г и в виде 0,05% раствора для инъекций в ампулах по 1 мл. Раствор готовят в асептических условиях с добавлением консерванта - хлорбутанолгидрата 0,05% и стабилизаторов - натрия метабисульфита, кислоты винной.

Препараты спорыньи хранят по списку Б в прохладном (не выше +5°С), защищенном от света месте. Применяются в основном в гинекологической практике.

Раунатин (Raunatinum) - препарат, содержащий сумму алкалоидов раувольфии. Сырьем для получения препарата служит кора корней раувольфии змеиной (Rauwolfia serpentina Benth.). Кора содержит около 5% суммы алкалоидов (резерпин, серпентин, аймалин и др.).

Оригинальная технология препарата разработана в ХНИХФИ. Кору раувольфии экстрагируют 5% водным раствором кислоты уксусной методом противо-точной мацерации в батарее из 4 экстракторов. При ^ этом в первый экстракт переходит около 50% содержащихся в сырье алкалоидов. Сумма алкалоидов в экстракте составляет около 0,6%, их извлекают экстракционным способом, После подщелачивания экстракта 25% раствором аммиака до значения рН 8,0-8,5, его обрабатывают метиленом хлористым или хлороформом. Раствор алкалоидов в органическом растворителе сгущают до получения концентрированного остатка (кубовый остаток I)

Уксуснокислые экстракты (2, 3 и 4) содержат меньшее количество алкалоидов (около 0,17%). Из этих экстрактов алкалоиды выделяют ионообменным способом на Na-форме катионита КУ-1. Адсорбцию алкалоидов проводят по методу непрерывной динамической адсорбции в батарее, состоящей из четырех адсорберов, соединенных последовательно и работающих по принципу противотока. Десорбцию алкалоидов осуществляют в аппарате для десорбции в статических условиях при температуре 40°С хлороформ-этанольной смесью (1:1), насыщенной газообразным аммиаком до значения рН 7,5-8,0. Катио-нит со свежим растворителем перемешивают 6 раз.

Хлороформно-этанольные элюаты сгущают до получения концентрированного остатка (кубовый остаток 2) Кубовые остатки (1 и 2) объединяют и проводят жидкостную экстракцию алкалоидов 5% раствором кислоты уксусной. Водный раствор солен алкалоидов подщелачивают 25% раствором аммиака до значения рН 10,0 и основания алкалоидов экстрагируют хлороформом. Хлороформное извлечение обезвоживают высушенным натрия сульфатом и упаривают до получения кубового остатка, равного /ю загруженного сырья. Концентрированный хлороформный раствор алкалоидов выливают при непрерывном помешивании в бензин или эфир петролейный, при этом алкалоиды выпадают в осадок. Осадок (раунатин) отфильтровывают, промывают на нутч-фильтре эфиром петролейным и сушат на воздухе до полного удаления органического растворителя, а затем в вакуум-сушильном шкафу при температуре не выше 40°С.

Раунатин - порошок от желтого до коричневого цвета, очень горького вкуса, мало растворим в воде, растворим в этаноле, хлороформе. Выпускают в таблетках по 0,002 г, покрытых оболочкой. Хранят по списку Б. Применяют как гипотензивное средство.

Фламин (Flaminum) - препарат, содержащий сумму флавоноидов (флавонол, флавон и флавокон) бессмертника песчаного (Helichrysum arenarium Мо-ench. L.). Цветки бессмертника экстрагируют 50% этанолом в батарее из 4 экстракторов методом противотока Извлечение упаривают в вакуум-аппарате при температуре 65-70° и вакууме 79993,2 86659,3 Н/м² до '/4 первоначального объема. Обра зующийся при охлаждении осадок отделяют, растворяют в воде. Флавоноиды из водного раствора экстрагируют смесью этилацетата и этанола (9:1). Извлечение обезвоживают высушенным натрия сульфатом и упаривают при температуре около 70°С, а затем под вакуумом до полного удаления растворителя Осадок (фламин) высушивают в вакуум-сушильном шкафу.

Фламин представляет собой желтый аморфный порошок, обладающий горьким вкусом. Он трудно растворим в холодной воде, но легко в воде, нагретой до температуры 55-56°С. Выпускается в форме таблеток по 0,05 г Хранят в сухом, защищенном от света месте. Применяют как желчегонное и противовоспалительное средство.

Плантаглюцид (Plantaglucidum) - препарат, содержащий сумму полисахаридов подорожника большого (Plantago major L.) Измельченные листья подорожника загружают в экстрактор с обогревом, заливают водой, нагретой до 90-95°С в отношении 1:10, кипятят 20-25 мин и настаивают 3-4 ч. Водный экстракт фильтруют и упаривают в пленочном выпарном аппарате при разрежении 80-10⁴-93■ 10* Н/м² (79993,2-93325,4 Н/м*) при температуре 65-75°С до 'До первоначального объема.

Осаждение комплекса водорастворимых веществ из упаренного экстракта проводят 3-кратным количеством этанола, прибавляя его в реактор постепенно при непрерывно работающей мешалке. Выделившийся слизистый осадок отстаивают, надосадочную жидкость отсасывают в сборник с помощью вакуума, а оставшуюся суспензию фильтруют на фильтр-прессе. В качестве фильтрующего материала применяют лавсановую ткань ТЛФ-300. Отжим осадка на фильтре под давлением 0,8-1 мПа позволяет снизить его влажность до 30-35%. Окончательное высушивание плантаглюцида проводят в вакуум-сушильном шкафу при температуре 50-60°С и разрежении 79993,2- 93325,4 Н/м² до содержания влаги не более 10%.

Плантаглюцид - порошок серого цвета, горьковатого вкуса, растворим в воде с образованием слизи. Выпускают в форме гранул во флаконах по 50 г. Хранят в сухом, защищенном от света месте. Применяют для лечения больных гипацидным гастритом, а также язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки при нормальной или пониженной кислотности

Рамнил (Rhamnilum) сухой препарат из коры крушины, содержащий не менее 55% производных антрацена (франгулин, франгула-эмодин, эмодин и хризофанол). Препарат предложен институтом фармакохимии им. К. Г Кутателадзе АН Грузинской ССР, сырьем служит кора крушины ольховидной (крушины ломкой) (Frangula alnus Mill).

Измельченное сырье, высушенное на воздухе, экстрагируют водой при непрерывном перемешивании. Извлечение быстро отделяют от растительного сырья и оставляют на 10-12 ч. При этом в осадок выпадают вторичные антрагликозиды, в частности франгулин.

При экстракции сырья водой в экстракт переходит хорошо растворимый в воде первичный антраглико-зид - франгуларозид и фермент рамнодиастаза. Фермент гидролизует первичные гликозиды, отщепляя от них глюкозу, образуя вторичные антрагликозиды, плохо растворимые в воде. В связи с этим экстракцию сырья и отделение экстракта проводят в возможно короткий срок, чтобы предотвратить осаждение плохо растворимых в воде вторичных гликозидов на растительном сырье.

Выпавший при отстаивании экстракта осадок, содержащий вторичный гликозид-франгулин, а также франгула-эмодин и свободные эмодин и хризофа пол, отделяют, промывают водой, высушивают в вакууме при температуре 50-55°С и измельчают

Рамнил - аморфный порошок оранжево-коричневого цвета, без запаха и вкуса. Хранят в плотно укупоренных флаконах, в защищенном от света месте. Выпускают в таблетках по 0,05 г Применяют как слабительное средство.

Ависан (Avisanum) - препарат, содержащий до 8% суммы хромонов, а также небольшие количества фурокумаринов и флавонов.

Препарат получают из плодов амми зубной (Ammi visnaga L.). Плоды амми, высушенные на воздухе и содержащие не менее 0,8% хромонов и не более 14% влаги (в пересчете на абсолютно сухое сырье\ экстрагируют 50% этанолом. Из экстракта в вакууме отгоняют растворитель, а сиропообразный остаток высушивают в вакуум-сушильном шкафу при температуре 60-70°С до влажности не более 8%. Сухой остаток измельчают в шаровой мельнице, просеивают Из 12 кг амми зубной получают 1 кг ависана.

Ависан - аморфный порошок, желто-бурого цвета, горького вкуса, со слабым своеобразным запахом Гигроскопичен. Препарат выпускают в таблетках по 0,05 г, покрытых оболочкой. Хранят в сухом, защищенном от света месте. Применяют в качестве спазмолитического средства при почечной колике и спазмах мочеточников.

Контрольные вопросы

1.  Назовите признаки, отличающие новогаленовые препараты от галеновых.

2.  Укажите основные стадии технологии максимально очищен пых экстракционных препаратов.

3.  Какие способы экстрагирования наиболее широко используются при получении новогаленовых препаратов?

4.  Какие экстрагенты используют для экстракции растительного сырья при получении новогаленовых препаратов и чем определяется их выбор?

5.  В чем состоит принцип циркуляционной экстракции, разберите на примере адонизида?

6.  Укажите способы очистки извлечений, применяемые в производстве новогаленовых препаратов.

7.  Назовите способы очистки первичных извлечений, обеспечивающие получение новогаленовых препаратов, свободных от содержания хлорофилла

8.  Почему нежелательны дубильные вещества в новогаленовых препаратах, содержащих сердечные гликозиды?

9.  В чем заключается принцип экстракции в системе жид кость - жидкостью и в какой аппаратуре она проводится?

10.      В каких случаях и с какой целью применяют при производстве новогаленовых препаратов обработку полупродукта несмешивающимся растворителем?

11.      Укажите новогаленовые препараты, получаемые из наперстянок, в каких лекарственных формах их выпускают паков стандарт препаратов?

12.      Какой новогаленовый препарат получают из листьев и цветов ландыша, в какой лекарственной форме его выпускают?

13.      Что такое эрготал, в каких лекарственных формах его выпускают?

14.      Из какого лекарственного сырья получают плаитаглюцнд, в какой лекарственной форме его выпускают и как стандартизуют?

15.      Что представляет собой раунатин, в какой лекарственной форме его выпускают?

Глава 17
ПРЕПАРАТЫ ИНДИВИДУАЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ РАСТИТЕЛЬНОГО ЛЕКАРСТВЕННОГО СЫРЬЯ

Среди большого числа препаратов растительного происхождения, применяемых в медицинской практике для профилактики и лечения, значительное место занимают препараты индивидуальных веществ, относящиеся к различным классам химических соединений. Если сравнительно недавно они считались трудно доступными, то сейчас, благодаря большим достижениям в области химии, физики, фармакологии, стало возможным их выделить, всесторонне охарактеризовать, получить путем синтеза и предложить в различных лекарственных формах

Промышленное производство лекарственных препаратов индивидуальных веществ организовано в нашей стране в середине XX в. В первую очередь стали выпускать препараты сердечных гликозидов, как незаменимые средства при острой и хронической сердечно-сосудистой недостаточности. Широкое распространение получили препараты индивидуальных алкалоидов: резерпин, аймалин, атропина сульфат, эргометрина малеат, эрготамина гидротартрат и многие другие.

В ряде случаев препараты индивидуальных веществ имеют значительные преимущества перед синтетическими средствами. Природные биологически активные соединения менее токсичны и реже вызывают нежелательные побочные явления, особенно аллергические реакции по сравнению с их синтетическими аналогами. Применяя препараты индивидуальных веществ, можно точно определить дозу, регулировать всасываемость и, следовательно, оказывать влияние на их терапевтическую эффективность.

В нашей стране изучение природных соединений, работы по созданию и внедрению в медицинскую практику новых лекарственных средств на их основе проводятся во многих НИИ, в том числе в ВИЛР, Институте фармакохимии им. К. Г. Кутателадзе АН Грузинской ССР, ХНИХФИ, на кафедрах фармацевтических институтов и факультетов медицинских институтов. Их ведут ученые различных специальностей: ботаники, химики, фармакогносты, фармакологи, клиницисты, технологи и др

Препараты индивидуальных веществ выпускаются химико-фармацевтическими заводами (Московский и Чимкентский алкалоидные заводы, Каунасское производство медицинских препаратов и др). Разработка технологии новых видов продукции и производство небольших серий осуществляется опытными заводами ВИЛР и ХНИХФИ.

17.1. КЛАССИФИКАЦИЯ

Индивидуальные вещества в зависимости от их химической структуры и характера биологического действия на организм делят на гликозиды циклопента-пергидрофенактрена (сердечные гликозиды), алкалоиды и другие соединения.

Применяют сердечные гликозиды разных видов наперстянок, строфанта и других. В листьях наперстянок пурпуровой и крупноцветковой содержатся натив-ные гликозиды: пурпуреагликозиды А и В; шерстистой - дигиланиды А, В, С. Эти генуинные гликозиды в процессе заготовки сырья частично гидролизуются под влиянием ферментов, теряют молекулу сахара и поэтому в высушенном сырье наряду с нативными содержатся вторичные гликозиды. Установлено, что наибольшей биологической активностью в наперстянке пурпуровой и крупноцветковой обладает вторичный гликозид - дигитоксин, а в наперстянке шерстистой - нативный гликозид - дигиланид С (лантозид С) и вторичный гликозид - дигоксин.

В качестве примера препаратов, представляющих собой алкалоиды, можно привести: эрготамина гидро-тартрат и эргометрина малеат. Сырьем для производства чистых эргоалкалоидов служат склероции спорыньи, получаемые при заражении ржи грибом определенного штамма. Эрготаминовый штамм имеет алкалоидный состав, представленный на 80% эргота-мином и эргозином; эрготоксиновый штамм - эрготоксином, эргокристином, эргокриптином и их изомерами. Использование сырья, содержащего опреде-ч-ленный состав алкалоидов, облегчает процесс получения препаратов.

17.2. ТЕХНОЛОГИЯ ПРЕПАРАТОВ ИНДИВИДУАЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ

Процесс получения препаратов индивидуальных веществ многостадийный и может быть представлен следующей схемой: подготовка сырья и экстрагента, экстрагирование лекарственного сырья, очистка полученного извлечения, выделение суммы индивидуальных веществ (или вещества), стандартизация.

При получении извлечения большое внимание уделяется выбору экстрагента, как и в технологии других экстракционных препаратов. Его подбирают в зависимости от физико-химических свойств выделяемых индивидуальных веществ. Для экстрагирования лабильных сердечных гликозидов используют 90-95% этанол, метанол (при получении пеланида), которые обладают селективной способность^, в отношении этих биологически активных соединений, и в то же время инактивируют ферменты, содержащиеся наряду с сердчными гликоз идами в растительном материале и тем самым исключают гидролитическое расщепление гликозидов; ацетон; смесь метилена хлористого и этанола (в технологии дигитоксина); другие растворители. С целью сохранения нативности биологически активных веществ экстракция комплекса сердечных гликозидов, чувствительных к повышенной температуре, проводится на холоду, при строго регламентированном значении рН среды.

Для экстрагирования алкалоидов применяют различные растворители, строго соблюдая определенный режим экстрагирования, обращая особое внимание на значение рН среды, так как от этого зависит степень экстракции алкалоидов. Положение, согласно которому алкалоиды экстрагируются органическим растворителем только из щелочной среды, справедливо лишь для отдельных представителей этого класса соединений. Большинство алкалоидов экстрагируется из растворов как кислой, так и щелочной среды, но для каждого имеется определенная, довольно узкая область значений рН, при которых он извлекается в максимальных количествах. В качестве органических растворителей используют хлороформ, дихлорэтан, бензол, спирт изоамиловый, спирт нзопропиловый, предпочитая последний, как менее ядовитый и дешевый. Для экстрагирования флавоноидов чаще применяют этанол, для кумаринов - метанол.

Экстрагирование проводят дробной мацерацией по принципу противотока, мацерацией с циркуляцией экстрагента.

Иногда перед экстрагированием сырье специально обрабатывают (ферментация при производстве дигитоксина) .

Из полученного извлечения экстрагент удаляют упариванием (отгонкой) в роторных испарителях, в которых вытяжка подвергается кратковременному контакту с поверхностью теплоносителя при сравнительно большой площади испарения и глубоком вакууме (остаточное давление 1333,22-1999,83 Н/м²). Для уменьшения потерь органического растворителя на всех стадиях упаривания охлаждение паров осуществляют рассолом.

Очистка вытяжек проводится такими же щадящими методами, как при получении максимально очищенных препаратов, но все операции повторяются многократно. На первых стадиях очистки извлечения применяют фракционное избирательное осаждение действующих или сопутствующих веществ (часто путем смены растворителей), жидкостную очистку - экстракцию жидкость - жидкостью (в перфораторах), абсорбционную хроматографию (для очистки и разделения сердечных гликозидов), ионообменную хроматографию на смолах КАУ-1, КАУ-2 (для очистки водных вытяжек, содержащих алкалоиды)

Очищенные вытяжки (элюаты) упаривают под вакуумом при остаточном давлении 6666,1-10665,76 Н/м² и получают, как правило, суммарный препарат, представляющий собой смесь нескольких индивидуальных веществ.

Для разделения суммы индивидуальных веществ проводят многократную перекристаллизацию до выделения из суммы одного вещества.

Стандартизуют готовый продукт'по содержанию действующих веществ или активности в ЕД.

В качестве примера приводим технологию препаратов гликозидов.

Дигитоксин (DigHoxinum) получают* при ферментации листьев, экстрагировании из них действующих веществ, очистке вытяжки, выделении суммы гликозидов, получении дигитоксина, стандартизации.

Предварительная ферментация листьев увеличивает выход дигитоксина в 4 раза. С этой целью измельченные листья наперстянки замачивают водой (37- 40°С) и оставляют при этой температуре на 40-48 ч Листья после ферментации помещают в реактор с мешалкой и трижды экстрагируют смесью метилена хлористого и этанола. Полученную вытяжку упаривают под вакуумом при температуре 50°С. Концентрированный экстракт обрабатывают формамидом и проводят очистку (жидкостную экстракцию), обрабатывая вытяжку бензолом 5 раз, смесью бензола и хлороформа (3:2) до 10 раз. Вытяжку упаривают под вакуумом, остаток растворяют в хлороформе. Хлороформный раствор сердечных гликозидов переносят на колонку с алюминия оксидом для их распределения: в верхнем участке - гитоксин, в нижнем-дигитоксин.

Дигитоксин элюируют с алюминия оксида метанолом под контролем Уф-лампы. Дигитоксин имеет голубое свечение, гитоксин - коричневое. Элюат, содержащий дигитоксин, упаривают под вакуумом досуха. Остаток растворяют в ацетоне, упаривают под вакуумом, добавляют бензол и оставляют для кристаллизации дигитоксина. Перекристаллизацию повторяют несколько раз при комнатной температуре. Кристаллы промывают этанолом и высушивают на воздухе.

Дигитоксин - белый кристаллический порошок, практически нерастворимый в воде, мало растворим в этаноле и хлороформе, очень мало в эфире. 1,0 г должен содержать 8000-10 000 ЛЕД, в.р.д. внутрь -0,0005 г, в.с.д. -0,001 г Формы выпуска, таблетки по 0,0001 г и свечи по 0,00015 г Хранение по списку А, в прохладном, защищенном от света месте

Целанид, дигоксии (Celanidum, Digoxi num) получают из листьев наперстянки шерстистой Дигоксин представляет собой вторичный гликозид. Его получают путем ферментативного и щелочного гидролиза цел анида. В качестве экстрагента используют 90% метанол. Вытяжку подвергают многократ ной очистке путем смены растворителя, экстракции жидкость - жидкостью п хроматографирования на алюминия оксиде. Из очищенного раствора на холоду выпадает кристаллический осадок, представляющий собой сумму гликозидов (дигиланиды А, В, С),- тех ннческий продукт. Его растворяют в этаноле при нагревании с углем активированным и оставляют на холоду для кристаллизации Выпавшие кристаллы представляют собой смесь нативных гликозидов дигиланиды А, В, С Стандартизацию проводят биологическим путем. 1,0 г препарата должен содержать 14 000 ЛЕД. Это белый кристаллический порошок, мало растворим в воде и этаноле, растворим в метаноле. Чувствителен к свету Хранят по списку А.

Целанид выделяют из смеси гликозидов методом жидкостной экстракции. Готовят две фазы тяжелую- с плотностью, равной. 1,3150 (дихлорэтан и хлороформ), и легкую - с плотностью 0,9460 (метанол и вода}. Смешивают обе фазы в соотношении 1:1 и растворяют кристаллы гликозидов - дигиланидов А, В, С В тяжелой фазе остаются дигиланиды А и В, в легкую переходит дигил.чнид С. Эту фазу фильтруют через стеклянный фильтр № 3, промывают холодной водой {5-10°С) и кристаллизуют, затем многократно перекристаллизовывают из этанола и сушат • под вакуумом Целанид в 1,0 г должен содержать 14 000-16 000 ЛЕД. Это белый кристаллический порошок, очень мало растворим в воде и этаноле. При приеме внутрь в.р.д. --0,0005 г, в.с.д. - 0,001 г. внутривенно в.р.д. - 0,0004 г, в.с.д. - 0,0008 г. Формы выпуска: таблетки по 0,00025 г и растворы для инъекций 0,02% и 0,05%. Хранение по списку А в герметически закрытых банках оранжевого стекла.

В настоящее время разработана технология ди токсина Схема процесса близка к таковой для дигитоксина. Получают препарат из предварительно ферментированных листьев экстрагированием смесью метилена хлористого и этанола с последующей очист кой вытяжки и разделением суммы гликозидов хрома-тографированием на алюминия оксиде с последующим щелочным гидролизом продукта.

Дигоксин - белый кристаллический порошок, плохо растворим в воде. Лекарственная форма - таблетки по 0,00025 г для взрослых и по 0,0001 г - для детей. Хранят по списку А.

Все препараты наперстянок оказывают выраженное кардиотоническое действие и широко применяются в современной медицине. Терапевтическое действие гликозидов наперстянки проявляется гораздо медленнее, чем полярных гликозидов типа строфанта. Эффективность сердечных гликозидов зависит от степени абсорбции» фиксации их клетками сердечной мышцы, скорости метаболизма и выведения. Плохая растворимость гликозидов наперстянки обусловливает их недостаточную абсорбцию, особенно в течение первых часов после приема, отсюда -замедленное терапевтическое действие. Кроме того, биологическая доступность плохо растворимых лекарственных веществ зависит от размера частиц, вводимых по типу суспензии

С целью достижения максимального терапевтического эффекта лекарственные вещества должны находиться в молекулярно-дисперсном состоянии. В связи с этим предложено для получения лекарственных форм препаратов наперстянок использовать твердые дисперсные системы, т. е. такие, где лекарственное вещество диспергировано в твердом носителе (матрице) путем сплавления или растворения.

Для улучшения абсорбции дигитоксина и дигокеи-на разработана технология твердых дисперсных систем с поливинилпирролидоном.

Установлено, что использование дигокеинз в виде твердых дисперсных систем позволяет увеличить скорость его растворения и время наступления терапевтического действия.

В качестве примера приводим технологию препаратов алкалоидов.

Эрготамина гидротартрат (Ergotamine hydrotartratis) экстрагируют из рожков спорыньи, вытяжку очищают, получают сумму алкалоидов, выделяют эрготамина сульфат, эрготамина-бензолкристал-лы, эрготамина-ацетон-кристаллы, эрготамина гидротартрат.

Все операции проводятся в затемненном помещении, при красном свете и пониженной температуре.

Измельченные до 0,8-2 мм склероции спорыньи замачивают 5% раствором аммиака, хорошо перемешивают и переносят в экстрактор с мешалкой. Экстракцию проводят дихлорэтаном методом бисма-церации: сначала настаивая 5 ч, затем - 3 ч. перио* дически перемешивая. Полученную вытяжку фильтруют через полотно на друк-фильтре. Дальнейшую очистку проводят сменой растворителя - фильтрат обрабатывают 2% раствором кислоты виннокаменной, затем подщелачивают 25% раствором аммиака до значения рН 8-9 и извлекают алкалоиды хлороформом. Хлороформный раствор алкалоидов обезвоживают, фильтруют и упаривают под вакуумом. Упаренное извлечение вливают в 7-кратный объем эфира петролейного и оставляют на 5 ч в холодильнике. Выпадает кристаллический осадок, содержащий сумму алкалоидов, его сушат в токе азота, углерода диоксида или под вакуумом при температуре не выше 60°С. Осадок растворяют в кислоте уксусной ледяной (на водяной бане при температуре 35-37°С), обрабатывают 1% раствором кислоты серной в метаноле и выдерживают при температуре 20°С 48 ч. Выпадают кристаллы эрготамина сульфата. Их сушат под вакуумом 4 ч (без нагревания). Обрабатывают смесью бензола с метанолом и подщелачивают 10% раствором аммиака в метаноле, добавляя его по каплям до значения рН 7,0. Раствор упаривают в токе азота при температуре 60°С, охлаждают и оставляют на 4 ч, получают эрготампи-бензол-кристаллы, которые промывают водой дистиллированной до отрицательной реакции на сульфаты, затем бензолом, сушат и очищают от сопутствующих веществ. Кристаллы растворяют в смеси метанола и эфира, пропуская через колонку с алюминия оксидом для осаждения балластных веществ, а очищенный раствор эрготамин-бензола упаривают в токе азота. В растворе остаются продукты окисления, сопутствующие алкалоиды, выпадают кристаллы эрготамин-бензола. Кристаллы растворяют в водном растворе ацетона, охлаждают при температуре 5°С в течение 2 ч. Осаждающиеся кристаллы эрготамип-ацетопа промывают 90% ацетоном, сушат в вакуум-эксикаторе в течение 24 ч, растворяют в метаноле и добавляют 5,2% раствор кислоты виннокаменной. Выдерживают смесь в холодильнике в течение 2 ч, выпадают кристаллы эрго-тамина гидротартрата. Операцию проводят быстро, чтобы вновь не образовались эрготамин-ацетон-кри-сталлы. Осадок отфильтровывают, промывают 90% раствором метанола и сушат под вакуумом при температуре 20°С. Мстанольный маточник после отделения эрготамина гидротартрата передают на производство эргометрила.

Эрготамина гидротартрат - кристаллический порошок, без запаха, белого цвета, иногда с сероватым оттенком, мало растворим в воде и этаноле. Формы выпуска: ампулы по 1 мл 0,05% раствора, флаконы по 10 мл 0,1% раствора, таблетки (драже) по 0,001 г. Внутрь в.р.д. - 0,002 г, в.с.д. - 0,004 г, для подкожного введения в.р.д. - 0,0005 г, в.с.д.0,002 г. Хранение по списку А, в защищенном от света месте, при температуре не выше 10°С.

Эрготамип является составной частью таблеток «Кофетамип», «Беллатаминал», «Рпгетамин» и др.

Эргометр и на малеат (Ergometrini ma-leas) получают из метанольных маточников, содержащих алкалоиды, в том числе эргометрин, после осаждения эрготамина тартрата. Так как эргометрин растворим в воде, маточники обрабатывают подой (1:1), упаривают под вакуумом и получают водный раствор эргометрина. Далее проводят очистку жидкостной экстракцией, обрабатывая раствор хлороформом, в который переходят алкалоиды, плохо растворимые в воде. Очищенный водный раствор эргометрипа подщелачивают аммиаком и извлекают эргометрин хлороформом. Хлороформный раствор эргометрин а обезвоживают, упаривают в токе инертного газа и получают эргометрин-хлороформ (двойное соединение), его растворяют в ацетоне (рН 5,0) и добавлением 3% раствора кислоты малеиновой на холоду кристаллизуют эргометрнна малеат. Эргометрина малеат получают и из сырья обработкой рожков спорыньи раствором кислоты виннокаменной при температуре 20° в течение 3 ч в соотношении 1:15. Алкалоиды адсорбируют в колонке на кизельгуре, элюируют хлороформом (рН 9,0) и отгоняют его под вакуумом в токе инертного газа. Остаток, содержащий эргометрин-оенование, выдерживают при температуре 5^й, растворяют при нагревании в безводном ацетоне, очищают добавленном угля активированного и осаждают эргометрнна малеат 3% раствором кислоты малеиновой в ацетоне, внося ее по каплям, с последующей перекристаллизацией из 50% этанола. Кристаллы сушат над фосфора оксидом.

Формы выпуска: таблетки по 0,0002 г эргометрнна малеата и ампулы по 0,5 и 1 мл 0,02% раствора. Хранение по списку Б, в защищенном от света месте, при температуре не выше 10°С.

Контрольные вопросы

1.  Какова общая схема получения препаратов индивидуальных веществ из лекарственного растительного сырья?

2.  Чем руководствуются при выборе экстрагента в производстве этой группы препаратов?

3.  Какими способами осуществляется выделение суммы индивидуальных веществ из полученных вытяжек?

4.  Каковы особенности очистки извлечении из лекарственного растительного сырья?

5.  Каковы частные технологические схемы приготовления препаратов индивидуальных веществ?

Глава 18
ПРЕПАРАТЫ ИЗ ТКАНЕЙ, ЖЕЛЕЗ И ОРГАНОВ ЖИВОТНЫХ

Препараты, получаемые из животного сырья (органов, тканей, крови, мочи и т. д.), известны под названием органотерапевтические или органопрепараты (AAedicamenta organotherapeutica). Производство их сосредоточено на специальных заводах, находящихся в системе Минмясо- и Минмедпрома.

В зависимости от природы фармакологически активных веществ их можно подразделить на препараты: гормонов, ферментов и препараты неспецифического действия. В зависимости от органа, из которого они получены, различают препараты из гипофиза, поджелудочной и щитовидной желез, печени и т. д. По способу получения и степени очистки их разделяют на высушенные, обезжиренные и измельченные железы и ткани; экстракционные - для внутреннего употребления; инъекционные, которые подразделяют на максимально очищенные экстракты и препараты индивидуальных веществ.

18.1. ОБЩИЕ МЕТОДЫ ПРОИЗВОДСТВА ОРГАНОПРЕПАРАТОВ

18.1.1. Подготовка сырья

Сырье для производства органопрепаратов: ткани, железы, органы - получают на бойнях от здоровых, нормально развитых животных (при ветеринарном надзоре). Свежие органы и ткани содержат значительное количество воды (от 50 до 80%), балластных белков, липидов, минеральных веществ, продуктов клеточного обмена. Животное сырье чрезвычайно лабильно и быстро портится в связи с невысокой устойчивостью к действию микроорганизмов, ферментов, стимулирующих гидролитические и окислительные процессы, и другим факторам. Поэтому полученное после забоя животных сырье быстро перерабатывают или немедленно консервируют, в основном замораживанием при температуре - 30-40°С в скороморозильных шкафах. В таком виде легкопортящееся сырье можно транспортировать в специальных рефрижераторах и хранить при температуре - 15-18°С и относительной влажности 90-95% в течение года. Иногда для консервирования сырья применяют органические растворители, неограниченно смешивающиеся с водой и в то же время не оказывающие разрушающего влияния на биологически активные вещества, чаще всего ацетон и этанол. Способ прост и эффективен, но требует 3-5-кратного количества растворителя для обезвоживания; при этом происходит и частичное обезжиривание сырья. Этанол является хорошим консервантом для яичников и семенников, ацетон - для ткани гипофиза. В связи с летучестью, ядовитостью и огнеопасностью органических растворителей их применение возможно только в герметически закрывающейся таре. Перспективным методом консервирования биоматериала, обеспечивающим сохранение биологически активных веществ, является сублимационная сушка - удаление влаги из замороженного сырья в условиях глубокого вакуума.

Сырье, поступающее на переработку обычно в замороженном виде, размораживают, очищают от примесей (загрязнений, крови) споласкиванием в воде, освобождают от остатков посторонних тканей (жир, мясо и т. п.) преимущественно вручную при помощи ножа или ножниц и измельчают на механизированных мясорубках-волчках, превращая в фарш.

Дальнейшая специальная обработка сырья проводится в зависимости от типа получаемого препарата.

18.1.2. Технология препаратов, представляющих собой высушенные, обезжиренные и измельченные органы животных

При получении препаратов этой группы (тиреоидин, адиурекрин) сырье немедленно сушат в вакуум-сушилке при температуре, не превышающей 50°С, тонким слоем намазывая фарш на стекло или эмалированные противни. После бережного высушивания материал обезжиривают, экстрагируя в аппаратах «Сокелета» органическими растворителями с низкой температурой кипения, хорошо извлекающими жиры и не разрушающими биологически активные вещества. Остатки растворителя удаляют из сырья просушиванием в вакуум-сушилках или на воздухе в вытяжном шкафу, Сухой обезжиренный материал превращают в порошок в фарфоровых шаровых мельницах. Выпускают препараты в виде порошка или таблеток.

18.1.3. Технология экстракционных органопрепаратов для внутреннего применения

Получают экстракцией измельченных тканей (органов, желез) животных соответствующими растворителями: водными растворами кислот (хлороводородной, уксусной), этанолом, обычно со строго определенным значением рН и др. Так как исходное измельченное сырье чаще всего представляет собой вязкую массу, экстракцию проводят, как правило, методом одно-, двух- или многократной мацерации в реакторах, снабженных мешалками. Продолжительность экстракции - от нескольких часов до нескольких суток. Экстракт отделяют процеживанием через плотные ткани (бельтинг), центрифугированием или прессованием. Очистку извлечений от жиров и балластных белков проводят длительным отстаиванием (до 7 сут) при охлаждении (температура составляет 0, - 4, - 8°С) с последующим фильтрованием. При получении сухих препаратов извлечения сгущают в вакуум-выпарных аппаратах и высушивают в вакуум-сушильном шкафу. При получении сухих ферментных препаратов концентрирования экстракта во избежание инактивации действующих веществ достигают не выпариванием, а осаждением фермента органическим растворителем (при получении панкреатина) или высаливанием (при получении пепсина). Выпускают препараты в виде порошка (пепсин), таблеток (панкреатин, пантокрин, рантарнн) и жидких спиртовых экстрактов (пантокрин).

18.1.4. Технология органопрепаратов для парентерального введения

Органопрепараты для инъекций представляют собой стерильные, очищенные от балластных веществ экстракты из животного сырья (питуитрин, витогепат) и препараты, изготовленные на основе индивидуальных биологически активных веществ (гормонов, ферментов). Процесс изготовления органопрепаратов для инъекций па первых стадиях протекает так же, как и изготовление препаратов для внутреннего употребления. Экстракцию подготовленного сырья проводят, как правило, методами мацерации, используя растворители; водные растворы кислот, этанол, ацетон со строго определенными значениями рН и др., обеспечивающие максимально возможный выход биологически активных веществ. При разработке схем производства этой группы препаратов особое внимание уделяют подбору оптимальных параметров процесса (значение рН среды, температурный режим, продолжительность цикла, правильный подбор оборудования и др.}.

Особенностью технологии парентеральных органопрепаратов является глубокая, максимальная очистка экстрактов от балластных веществ. Для освобождения от жира водные экстракты обрабатывают органическими растворителями (бензин, эфир и др.). Иногда жиры из водного экстракта удаляются в виде застывшей на поверхности корки после продолжительного отстаивания на холоду. Грубая очистка, позволяющая освободиться от основной массы балластных белков, достигается отстаиванием извлечений при охлаждении, высаливанием, термофракционированием, кислотно-щелочной обработкой (фракционирование). Освобождение извлечений от низкомолекулярных биологических примесей и веществ, используемых при грубой очистке (соли, кислоты, щелочи, органические жидкости), осуществляется диализом или электродиализом и ультрафильтрацией. При выделении индивидуальных биологически активных веществ (гормоны, ферменты) широко используют различные методы хроматографии: ионообменную, адсорбционную, гель-хроматографию (проникающую), афинную (лигандную).

Очищенные активные вещества растворяют в соответствующем растворителе и подвергают биологическому и химическому анализу. В связи с тем что большинство гормонов и ферментов термолабильны и не способны выдерживать тепловую стерилизацию, их стерилизуют фильтрованием через мембранные фильтры. Поскольку водные растворы ряда гормонов и ферментов быстро инактивируются при хранении, их разливают во флаконы или ампулы и подвергают лиофильной сушке. Затем ампулы запаивают, а флаконы герметически закрывают резиновыми пробками с последующей металлической обкаткой, что позволяет проколом пробки иглой шприца ввести во флакон растворитель и отобрать нужное количество раствора, не нарушая стерильности.

18.2. ПРЕПАРАТЫ ГОРМОНОВ

Гормоны - это вещества, образующиеся в железистых клетках эндокринных желез, выделяющиеся в кровь или лимфу и регулирующие обмен веществ и развитие организма. Гормонам присущи общие биологические признаки: высокая активность, строгая специфичность действия и его дистанционность, т. е. способность регулировать обмен и функции клеток на расстоянии. По химическому строению они относятся к следующим группам: вещества белкового и полипептидного строения (гормоны гипофиза, паращитовидной и поджелудочной желез; кальцитонин щитовидной железы), производные аминокислот (тироксин и трийодтнронин щитовидной железы), стероидные соединения (гормоны коры надпочечников и половых желез).

Препараты стероидных гормонов, производных аминокислот и пептидов (окситоцин, вазопрессин) получают путем химического синтеза. В настоящее время синтезированы инсулин и некоторые белковые гормоны гипофиза (кортикотропин, соматотропин) и т. д. Однако химический синтез полипептидных гормонов, состоящих из десятков аминокислотных остатков, многостадиен, дает малый выход и нерентабелен.

Интенсивно развивающиеся физико-химическое и генетическое направления в биологии позволили создать новые технологии веществ белковой природы. Методами генной инженерии получены штаммы - продуценты пептидных гормонов: инсулина, соматотро-пина, кальцитонина и др. В отличие от химического синтеза получение гормонов методом биосинтеза является экономически более эффективным, так как не требует использования катализаторов, высоких температур, давления и т. д. В то же время использование биотехнологии позволяет получать гормональные препараты, абсолютно идентичные гормонам человека и не являющиеся чужеродными, в отличие от аналогичных, выделяемых из организма животных. Некоторые из них, например инсулин и соматотропин человека, разрешены к использованию в медицинской практике.

Однако препараты полипептидных гормонов в основном получают из дорогого и дефицитного сырья.

Препарат гормонов щитовидной железы. Тиреоидин (Thyreoidinum) -высушенная, обезжиренная и измельченная в порошок щитовидная железа крупного рогатого скота и свиней. Получают по общей схеме производства сухих органопрепаратов: измельчение железы, высушивание, обезжиривание, удаление остатков органического растворителя и измельчение полученной массы. Действие тиреоидина обусловлено наличием гормонов: тироксина и трнйодтиронина. Препарат стандартизуют по содержанию органически связанного йода, которого должно быть 0,17-0,23%.

Тиреоидин - мелкий аморфный порошок желто-серого цвета, со слабьш запахом, характерным для высушенных животных тканей. Выпускают в виде порошка и таблеток, покрытых оболочкой, по 0,05 и 0,1 г. Хранят по списку Б, в сухом, прохладном, защищенном от света месте. Препарат назначают внутрь при недостаточной функции щитовидной железы и в более высоких дозах - при избыточнй тирсо-тропной функции гипофиза.

Препараты гормонов задней доли гипофиза. Адиурекрин или сухой питуитрин (Adiurecrinum seu Pituilrinum siccum) - высушенные, обезжиренные и измельченные в порошок задние доли гипофиза рогатого скота и свиней. Препарат получают по общей схеме изготовления сухих органопрепаратов. Гипофиз отделяют и консервируют в ацетоне, Перед производством вынимают из ацетона, отделяют заднюю долю, разрезают ее на 3-4 части и сушат в вакуум-сушильном шкафу при температуре не выше 40°С. Сухой материал обрабатывают эфиром в аппарате «Сокслета» до полного обезжиривания. Остаток экстрагента удаляют высушиванием под вакуумом. Высушенные, обезжиренные задние доли гипофиза превращают в порошок в шаровой мельнице.

Препарат содержит гормоны задней доли гипофиза: аптидиуретический (вазопрессин) и окситоцин. Активность адиурекрпна определяют биологическим методом по способности повышать артериальное давление у крыс; 1 мг содержит 1 ЕД.

Адиурекрин представляет собой аморфный порошок серого цвета с желтоватым оттенком и специфическим запахом. Выпускают в стеклянных флаконах no 1; 5 и 10 г. Хранят по списку Б, в прохладном месте. Применяют в качестве антидиуретического средства при несахарном мочеизнурении и ночном недержании мочи. Порошок вводят в полость носа при легком вдыхании. -Действие наступает через 15-20 мин, продолжается 6-8 ч.

Питуитрин для инъекций (Pituitnnum pro injcctionibus) - экстракт задней доли гипофиза крупного рогатого скота и свиней, очищенный от балластных белков. Препарат получают путем экстракции измельченных задних долей гипофиза водой, подкисленной кислотой хлороводородной до значения рН 2,5, при температуре +40 ° С в течение 1 ч. К экстракту добавляют 20% раствор натрия гидрооксида до значения рН 4,8-5,5 для осаждения балластных белков. Надосадочную жидкость нагревают до кипения для полного удаления белков и фильтруют. В фильтрате устанавливают значение рН 3,0-4,0, в качестве консерванта добавляют 0,25-0.3% фенола, стерилизуют фильтрованием и разливают в ампулы.

Питуитрин - прозрачная бесцветная жидкость кислой реакции. Действующими веществами являются окситоцин и вазопрессин. Стандартизуют биологическим методом: по способности вызывать сокращение изолированного рога матки морской свинки, 1 мл должен содержать 5 ЕД. Выпускают в ампулах по 1 мл. Хранят по списку Б, в защищенном от света месте, при температуре от + 1 до + 10°С. Применяют для возбуждения и усиления сократительной деятельности матки.

Препараты гормонов передней доли гипофиза.

Для медицинских целей из передней доли гипофиза животных выделяют адренокортнкотропный (АКТГ), лактогенный и тиреотропный гормоны.

Один из способов промышленного производства гормонов из гипофиза свиней, разработанный во ВНИИ технологии кровезаменителей и гормональных препаратов (ВНИИТКГП), предусматривает комплексное использование исходного сырья и последовательное выделение отдельных гормонов передней доли гипофиза. В основу способа положена однократная экстракция гормонов из измельченных тканей передних долей гипофиза свиней подкисленным водным S0% ацетоном. Кислый водно-ацетоновый экстракт отделяют центрифугированием. Жмых собирают и используют для получения тиреотропного гормона для медицинской практики, а также соматотропного, фоликулостимулирующего и лютенизирующего гормонов, применяемых в ветеринарии. Экстракт, отделенный центрифугированием, содержит АКТГ и лактогенный гормон, которые осаждают ацетоном, повышая его концентрацию в смеси до 92%, и отстаиванием па холоду при температуре - 2-5°С в течение 10-12 ч. Осадок - кислый ацетонированный порошок (КАП) отделяют, промывают на нутч-фильтре охлажденным 98% ацетоном и высушивают на воздухе до полного его удаления. КАП растворяют в воде, подкисленной кислотой уксусной, и, добавляя раствор аммиака, доводят до значения рН 5,0. В изоэлектри-ческой точке осаждается лактогенный гормон. Осадок отделяют центрифугированием и используют для получения препарата - лактина.

Раствор после отделения лактогенного гормона разбавляют аммонийно-ацетатным буфером (рН 5,0) и пропускают через колонку, заполненную катионитом КМ-сефадекс К-25. По окончании процесса сорбции кортикотропина на ионообменной смоле проводят его десорбцию этанольньш раствором аммонийно-ацетатного буфера. Из элюата АКТ Г осаждают этанолом. Осадок отделяют центрифугированием, промывают этанолом, ацетоном и высушивают на воздухе. Стандартизуют АКТГ биологическим методом, активность выражают в единицах действия (ЕД). Для приготовления лекарственных форм используют субстанцию АКГТ активностью 70-90 ЕД/мг.

Кортикотропин для инъекции (Corti-cotropinum pro injectionibus) - порошок АКТГ с содержанием 70-90 ЕД/мг растворяют в воде, имеющей значение рН 3,0-5,0 и температуру 5°С. Раствор фильтруют через стерилизующие фильтры, разливают во флаконы и подвергают сублимационной сушке. Стерильный лиофилизированный порошок выпускают в герметически укупоренных флаконах, содержащих 10-20-30-40 ЕД кортикотропина. Хранят по списку Б, в защищенном от света месте, при температуре не выше 20°С. Применяют кортикотропин в основном при вторичной гипофункции коркового вещества надпочечников и при ревматизме, бронхиальной астме, разных аллергических и других заболеваниях. Кортикотропин оказывает кратковременное действие. Для получения лечебного эффекта его необходимо вводить несколько раз в сутки.

Суспензия цинк-кортикотропина (Sirs-pensio Zinc-corticotropini) - препарат пролонгированного действия. Суспензия - стерильная, белого цвета, содержит 20 ЕД кортикотропина в 1 мл, цинка хлорид, глицерин,- консервант (0,25% фенола), значение рН 7,0-8,0. Выпускают во флаконах по 5 мл. Вводят внутримышечно по 10, 20 или 40 ЕД (0,5; 1,0 или 2,0 мл) 1 раз в сутки. Лечебный эффект начинается через 8-10 ч и длится более 24 ч. Хранят по списку Б, при температуре от 1 до 10°С. Не допускается замораживание.

Лактин для инъекций (Lactinum pro injectionibus) - стерильный лиофилизированный порошок белого цвета. Для получения препарата лакто-генный гормон растворяют в воде для инъекций, фильтруют через стерилизующие фильтры, разливают во флаконы и подвергают сублимационной сушке. Выпускают в герметически укупоренных флаконах вместимостью 5 мл, содержащих по 100 или 200 ЕД. Хранят в сухом, защищенном от света месте, при температуре от 15 до 20°С. Применяют для стимуляции лактации в послеродовом периоде.

Тиротропин для инъекций (Thyrotropi-num pro injectionibus) -■ стерильный лиофилизированный порошок светло-желтого цвета. Выпускают в герметически укупоренных флаконах вместимостью 5 мл, содержащих по 10 ЕД. Хранят в сухом, прохладном, защищенном от света месте, при температуре не выше 10°С. Применяют для диагностики гипотиреоза и как лечебное средство при недостаточности щитовидной железы.

Препараты гормона поджелудочной железы. Инсулин (Insulinum) -гормон поджелудочной железы, продуцируется в р-клетках, находящихся в ткани островков Лаигерганса. Инсулин является белком с молекулярной массой около 6000, имеющим 51 аминокислоту и две цепи: А, состоящую из 21, и В - из 30 аминокислот, соединенных дисульфидными мостиками.

Сырьем для получения инсулина является поджелудочная железа рогатого скота и свиней. Ввиду наличия в поджелудочной железе фермента трипсина получение инсулина долгое время оставалось безрезультатным. В 1921 г. канадские исследователи Ф. Г. Беитинг и Ч. X. Бест впервые выделили инсулин из поджелудочной железы при обработке ее подкисленным крепким этанолом. При этом ферменты инакги-вируются и теряют способность разрушать инсулин. В настоящее время известно несколько технологий выделения инсулина, которые отличаются друг от друга лишь в деталях. Свежие или замороженные ткани железы измельчают на мясорубке-волчке и экстрагируют способом бисмацерации в эмалированном реакторе с мешалкой. В качестве экстрагента для первой мацерации используют 80-85% этанол, для второй - 57% этанол, подкисленный кислотой ортофосфорной (серной, хлороводородной) до значения рН 2,8-3,0. Экстракцию проводят 1,5-4 ч при перемешивании. Экстракты отделяют фильтрованием или центрифугированием, объединяют и проводят очистку.

Предварительная, грубая очистка экстракта одинакова по всем технологиям, она сводится к удалению анионов кислот. Так, анион кислоты ортофосфорной (РО4»3) удаляют раствором кальция хлорида при значении рН 3,3-3,8. Затем осуществляют депро-теинизацию - последовательное отделение балластных белковых веществ при значении рН 4,5-5,1 и 3,5 при температуре О°С. Выпадающие осадки отделяют центрифугированием. Прозрачный экстракт концентрируют выпариванием на вакуум-дистилляционной установке пленочного типа при температуре не выше 30°С до содержания этанола 10-25% в возможно более короткий срок, при строгом соблюдении температурного режима, так как длительное нагревание приводит к инактивации инсулина. Концентрированный остаток очищают от липидов и балластных белков отстаиванием на холоду (0-4°С) при значении рН 3,0-3,3. От всплывшего слоя липидов и осадка балластных белков экстракт отделяют фильтрованием. Из сгущенного, очищенного экстракта инсулин-сырец выделяют двукратным высаливанием 25% раствором натрия хлорида или 40% раствором аммония сульфата. Этот способ используется на некоторых заводах с 1928 г. по настоящее время.

Наиболее прогрессивным является способ выделения инсулина ионообменной хроматографией, разработанный и внедренный в 1970 г. на Минском заводе медпрепаратов. По этому способу операцию упаривания исключают, а осуществляют сорбцию инсулина из экстракта, частично освобожденного от балластных белков, на отечественном макропористом сульфо-катионите КУ-ЗЗ-30/IOO при значении рН 3,0 -3,3 в режиме псевдоожижения. Для удаления жира катионит промывают 65-67% этанолом, а для отдо леиия балластных белков--0,3 М раствором ацетатного буфера (рН 5,3). Десорбцию инсулина проводят 0.01-0,05 М раствором аммонийного буфера (рН 9,8-10,0). Инсулин неустойчив в щелочной среде, поэтому десорбируют его быстро, элюат немедленно подкисляют кислотой хлороводородной до значения рН 4,1-4,5 и добавляют ацетон. Осадок балластных веществ удаляют. Инсулин осаждают в виде цинк-инсулина раствором цинка ацетата (рН 6,1-6,2), очищают кристаллизацией. Цинк-инсулин растворяют в воде, подкисленной кислотой лимонной до значения рН 2,6-2,8. Раствор отстаивают в течение 1 ч и выпавший осадок балластных белков удаляют фильтрованием через кизельгур. Фильтрат смешивают с ацетоном, добавляют цинк хлористый и фенол, охлаждают до температуры 0°С, создавая условия для медленной кристаллизации инсулина. Раствор подщелачивают до значения рН 8,0-8,5; оставляют на 2-3 мин, затем создают значение рН 6,7-6,8 и перемешивают 1 ч; при значении рН 6,5 перемешивают 2 ч; при значении рН 6,2 и 6,0 перемешивают 2 ч и отстаивают 18-20 ч и при значении рН 5,8 перемешивают 2 ч и отстаивают 48-96 ч при температуре 5°С. Выпавшие кристаллы инсулина отделяют центрифугированием, промывают на воронке Бюхнера ледяной водой дистиллированной, ацетоном и эфиром. Досушивают инсулин на воздухе, в вытяжном шкафу и эксикаторе.

Активность инсулина определяют биологическим путем: по способности понижать содержание сахара в крови у здоровых кроликов. За единицу действия принимают активность 0,04082 мг кристаллического инсулина (стандарта), она должна быть 24-26 ЕД в 1 мг.

Препараты кристаллического инсулина. Инсулин для инъекций (Insulinum pro injectionibus) получают растворением кристаллического инсулина с активностью 24-26 ЕД/мг в воде, подкисленной кислотой хлороводородной до значения рН 3,0-3,5. К раствору добавляют солюбилизатор (1,6-1,8% глицерина) и консервант (0,25-0,3% фенола). Раствор стерилизуют фильтрованием через стерилизующие фильтры.

Суиисулин (Suinsulinum) - раствор кристаллического инсулина, получаемого из поджелудочной железы свиней, в ацетатном буфере. Раствор имеет значение рН 7,0-7,5, содержит консервант - нипагин.

Инсулин для инъекций и суинсулин применяют при лечении диабета, вводят под кожу или внутримышечно. В случаях необходимости неотложной помощи больному, например при диабетической коме, вводят внутривенно. Действие препаратов при введении под кожу или внутримышечно развивается через 15-20 мин и продолжается около 6 ч. Суинсулин реже вызывает аллергические реакции, применяется при осложнениях после инъекций инсулина, полученного из поджелудочной железы крупного рогатого скота, и при резистентности к инсулину.

Недостатком растворов инсулина является непродолжительность действия, поэтому выпускают ряд пролонгированных препаратов.

Суспензия и исулин-протамина для инъекций {Suspensio insulin-protamini pro injection i b u s) - первый препарат инсулина продленного действия, получен смешиванием раствора кристаллического инсулина с протамином сульфата (белок из молоки осетровых рыб). При контакте с тканями инсулин постепенно отделяется от протамина и снижает содержание сахара в крови. Эффект наступает через 2-4 ч, достигает максимума через 8-12 ч и продолжается 16-18 ч.

IIротамин-цинк-инсулин для инъекции (Protamin-zinc-insulinum pro injectionibus) получают при добавлении небольшого количества цинка хлорида к инсулин-протамину, что еще больше пролонгирует действие последнего. Эффект препарата наступает через 3-6 ч после инъекций, достигает максимума через 14-20 ч и продолжается 24-36 ч. Препарат представляет собой стерильную суспеи зпго белого цвета, в фосфатном буфере, значение рИ 6,9-7,3, консервант - фенол (0,25-0,3%).

Определенный успех в нисулннотерошш вызван появлением трех инсулииов пролонгированного действия-суспензий цинк-инсулн^а. Их получают смешиванием стерильных растворов кристаллического инсулина с цинка хлоридом и буферным раствором. Изменяя порядок смешивания и длительность перемешивания, можно осадить две физические фракции цинк-инсулина: аморфную и кристаллическую Суспензию аморфного цинк-инсулина (величина частш; не превышает 2 мкм) получают при кратковременном перемешивании растворов, суспензию кристаллического- при медленном перемешивании (30-40 об/мин) в течение 18-20 ч. При этом формируются кристаллы ромбовидной формы величиной 10-40 мкм. Суспензии цинк-инсулина стабильны при нейтральном значении рН. Состав препаратов на 100 ЕД инсулина, мг: натрия аиетата - 3,4; натрия хлорида - 17,5; цинка хлорида - 0,20; значение рН 7,1-7,5; фенола - 0,25-0,3%. Введенные подкожно суспензии цинк-инсулина постепенно всасываются и вызывают снижение сахара в крови, продолжительность которого зависит от физического состояния цинк-инсулина.

Суспензия цинк-инсулина аморфного для инъекций (Suspensio Zinc-insulini amorphi pro injectionibus) проявляет быстрое действие - через 1 - 1,5 ч, но оно сравнительно короткое - длительностью 10-12 ч.

Суспензия цинк-инсулина кристаллического для инъекций (Suspensio Zinc-insulini crystallisatt pro injectionibus - препарат наиболее длительного действия, снижение сахара в крови наступает через 6-8 ч, достигает максимума через 16- 20 ч и продолжается 30-36 ч.

Суспензия цинк-инсулина для инъекций (Suspensio Zinc-insulini pro injectionibus) - препарат со средней продолжительностью действия. Его получают смешиванием суспензий цинк-инсулина аморфного и кристаллического в отношении 3:7. Снижение сахара в крови при введении под кожу наступает через 2-4 ч, умеренно усиливается к 5-7 ч, достигает максимума через 8-10 ч и продолжается 20-24 ч. Этот препарат позволяет многим больным обходиться одной инъекцией в сутки.

Препараты инсулина выпускают во флаконах вместимостью 5 или 10 мл, укупоренных резиновыми пробками с последующей металлической обкаткой. Активность инсулина 40 и 80 ЕД в 1 мл. Хранят по списку Б, в защищенном от света месте, при температуре от 1 до 10°С. Замораживание не допускается.

Инсулин М и его препараты. В 1983 г. в ВНИИТК.ГП разработана технология инсулина М, не содержащего проинсулина и балластных белков, определяющих способность препаратов повышать иммунные реакции организма. Дополнительная очистка кристаллического инсулина осуществлена ионообменной хроматографией на макропористом анионите отечественного производства АВ-171-40/100 и повторной перекристаллизацией.

Кристаллический инсулин растворяют в 40% этаноле с добавлением динатриевой соли этилендиамин-тетрауксусной кислоты, связывающей ионы цинка и таким образом повышающей его растворимость. Концентрированный раствор инсулина центрифугируют и сорбируют на анионите АВ-171-40/100. Элюируют инсулин раствором аммонийного буфера, содержащим 40% этанола, натрия хлорид, значение рН 7,4-7,6. Собирают фракции элюата, содержащие хроматогра-фически чистый инсулин. Кристаллизуют инсулин из цитратного буфера, содержащего цинка хлорид и 20% этанола, при значении рН 6,9 и 5,8. Получают высо-коочищенный инсулин с активностью не ниже 26 ЕД/мг.

На основе суинсулина М, полученного из поджелудочной железы свиней, созданы высокоочищенные препараты, аналогичные препаратам кристаллического инсулина, но характеризующиеся низкой антигенной активностью. Раствор суинсулина М (Suinsulinum М) в ацетатном буфере в отличие от раствора кристаллического инсулина имеет не кислую, а нейтральную реакцию, значение рН 7,0-7,5. Препараты продленного действия - суспензии: цинк-инсулина М аморфного для инъекций или инсулйн-семилонг (Insulin semilong), цинк-инсулина кристаллического для инъекций или инсулин-ультралонг (Insulin ultralong) и цинк-инсулина М для инъекций или инсулин лонг (Insulin long).

18.3. ПРЕПАРАТЫ ФЕРМЕНТОВ

Ферменты - биологические катализаторы белковой природы, содержащиеся во всех клетках живых организмов. Они катализируют биохимические реакции, которые без них протекали бы с неизмеримо малой скоростью.

Важнейшими свойствами ферментов являются эффективность катализа (позволяют увеличивать скорость реакций в 10¹⁰-10'² раз) и исключительная избирательность действия (каждый фермент катализирует, как правило, одну химическую реакцию). Как и все белки, ферменты являются высокомолекулярными соединениями, с молекулярной массой от 10 000 до 1000 000. Ферментные белки, обладая малостойкой структурой, весьма чувствительны к изменениям значения рН и температуры. Для каждого фермента существует оптимум значения рН, при котором скорость катализируемой реакции максимальна. Так, активность трипсина имеет оптимум при значении рН 7,8; панкреатической амилазы - при 6,4-7,2. Отклонение значения рН в ту пли иную сторону ведет к снижению скорости ферментативной реакции. Фер-менты_ь оптимальное действие которых находится в нейтральной или щелочной средах, полностью ипакти-вируются кислым содержимым желудка.

Оптимальное значение температуры для большинства ферментов - 20-40°С. Повышение температуры до 40-50°С, как правило, приводит к падению ферментативной активности, а иногда и к полной денатурации ферментов.

При производстве упзнмных препаратов наряду с применением высокоэффективных научно обоснованных способов получения особенно необходима высокая культура производства, строгое соблюдение режимов технологии. Большое внимание уделяется стабилизации ферментов как на стадии получения субстанции, так и в лекарственной форме. В настоящее время используют три основных приема стабилизации: защита лабильных центров ферментов, ответственных за их активность, химической модификацией (в том числе иммобилизацией); защита от воздействия инактивирующих факторов нанесением оболочки и введением в субстанцию или лекарственную форму добавок, ипгнбирующих деструкцию ферментов.

Источником получения ферментов являются органы ч ткани животных, решительное сырье и ферменты, продуцируемые микроорганизмами. Основное количество ферментных препаратов медицинского назначения получают из органов и тканей животных. Из ферментов растительного происхождения в нашей стране для медицинских целей предложен к использованию только одни препарат: липаза из семян чернушки дамасской (Nigella Damascena L.J. Все шире используются в медицинской практике ферменты, получаемые из культур микроорганизмов, преимуществом которых являются более высокая доступность и экопо мичноегь их производства.

Препараты ферментов слизистой оболочки желудка. Пепсин (Pepsinum) - препарат, содержащий протеолитический фермент. Сырьем для получения пепсина служит слизистая оболочка желудка свиней, где он образуется в виде профермента - пепсиноге-на. Пепсиноген активируется кислотой хлороводородной и аутокаталитически, г. е. с помощью образовавшихся молекул пепсина. При этом от пепсиногена (м.м. 40000) сначала отщепляется остаточный полипептид, а затем ингибитор пепсина. Образуется активный пепсин (м.м. 34 000). Пепсин относится к карбо-протеиназам, содержащим остатки аминокислот ди-карбоповых в активном центре, с оптимумом значения рН 1,5-2,5.

При выделении протеолитического фермента основной задачей является получение (с высоким выходом) его в активной форме. Поэтому экстракцию сочетают с автолизом. Измельченные ткани заливают водой, подкисленной кислотой хлороводородной до значения рН 1,9-2,3. Соотношение сырья и экстрагента 10:1. Настаивание проводят при температуре около 40°С, перемешивая на протяжении 8 ч и повторно в течение 24 ч. Лизаты сливают, отделяют от верхнего слоя жира, объединяют, процеживают. Ферментную массу выделяют высаливанием, для чего к лизату (значение рН 1,9-2,3) при непрерывном перемешивании добавляют 20-25% раствор натрия хлорида. Пепсин, выделившийся из раствора, всплывает на поверхность. Его отделяют, сушат в вакуум-сушильном шкафу при температуре 35-40°С, измельчают в фарфоровой шаровой мельнице и просеивают.

Стандартизуют препарат по протеолитической активности (переваривание белка куриного яйца): 10 г протертого белка в присутствии 0,1 г препарата в стандартных условиях должны полностью раствориться через 3-4 ч, образуя опалесцирующий раствор. После определения биологической активности препарат смешивают с сахарной пудрой. Он представляет собой слегка желтоватый порошок, сладкого вкуса со слабым своеобразным запахом. Хранят в хорошо укупоренных банках в прохладном (2-15°С), защищенном от света месте. Применяют при расстройствах пищеварения (гипо- и анацидный гастрит, ахилия, диспепсия). Назначают внутрь в виде раствора в комбинации с ацидином (бетаина гидрохлорид).

Ацидин-пепсин (Acidin-pepsinuvn) выпускают в таблетках по 0,5 и 0,25 г, содержащих I часть пепсина и 4 части бетаина гидрохлорида. При введении в желудок бетаина гидрохлорид легко гидролизуется с выделением свободной кислоты хлороводородной.

Абомин (Abominum) - препарат, содержащий сумму протеолитических ферментов, получают из слизистой оболочки желудка телят и ягнят молочного возраста. Он представляет собой аморфный порошок со специфическим запахом, соленого вкуса (содержит примесь натрия хлорида). Выпускают в форме таблеток по 0,2 г, с содержанием в 1 таблетке 50 000 ЕД.

Сок желудочный натуральный (Succus gastricus naturalis) получают по методу, предложенному И. П. Павловым, через фистулу желудка при мнимом кормлении собак или других животных (лошадей). Препарат представляет собой прозрачную бесцветную жидкость кислого вкуса, консервированную кислотой салициловой (0,03-0,04%). Он содержит все ферменты желудочного сока, 0,45-0,51% свободной кислоты хлороводородной, значение рН 0,8-1,2. Выпускают во флаконах по 100 мл. Хранят в защищенном от света месте, при температуре от 2 до 10°С. Применяют при недостаточной функции желез желудка.

Препарат ферментов поджелудочной железы. Панкреатин (Pancreatinum) - препарат содержит ферменты поджелудочной железы, главным образом трипсин и амилазу и в незначительном количестве липазу. Сырьем для получения панкреатина служит поджелудочная железа свиней или рогатого скота.

В поджелудочной железе протеолитические ферменты образуются в виде проферментов: трнпсино-гена, химотрипсиногена. Активирование этих ферментов происходит гидролизом того фрагмента их полипептидной цепи, который маскирует активный центр протеиназ. При получении панкреатина активирование проферментов поджелудочной железы осуществляют в экстракте в щелочной среде, в присутствии ионов кальция и с затравкой (панкреатин).

Ткани поджелудочной железы убойных животных измельчают на волчках и заливают водой, подкисленной кислотой уксусной - ледяной 5 мл на 1 л воды. Настаивание проводят в реакторе с мешалкой в течение 4 ч при температуре 10°С. Экстракт отделяюг центрифугированием или процеживанием с последующим прессованием остатка. Для активирования проферментов в экстракте создают среду со значением рН 8,1; добавляют кальция хлорид, чтобы приготовить 0,05 М раствор, и затравку - панкреатин. Настаивают 24 ч при температуре 5°С. Затем экстракт подкисляют до значения рН 6,0, и в изоэлектри-ческой точке осаждают балластные белки. Осадок отделяют, обезжиривают ацетоном и высушивают в вакуум-сушильном шкафу при температуре не выше 40 ^СС. Измельчают в фарфоровой мельнице.

Стандартизуют панкреатин по протеолитической активности - способности переваривать белок казеин в слабощелочной среде. Панкреатин должен содержать в 1 г 25-33 ЕД. Препарат выпускают в порошке и таблетках, покрытых оболочками, растворимыми в кишечнике. Хранят в хорошо закупоренных банках, в сухом, прохладном месте. Применяют при хронических панкреатитах с недостаточной функцией поджелудочной железы.

Технология ферментных препаратов из поджелудочной железы крупного рогатого скота: дезоксири-бонуклеазы (ДНКаза), рибонуклеазы (РНКаза), трипсина, химотрнпсина, ингибитора протеаз - пан-трипина и инсулина - разработана лабораторией органопрепаратов Всесоюзного научно-исследовательского института мясной промышленности. Принцип производства заключается в том, что измельченную поджелудочную железу подвергают автолизу, для чего смешивают ее с половинным количеством воды и оставляют на 18 ч при температуре 12°С. Затем в реакторе с мешалкой проводят экстракцию методом бнс-мацерации водой, подкисленной кислотой ортофос-форной до значения рН 2,0-*-2,5, при температуре не выше 5°С. Первая мацерация проводится с двойным количеством воды в течение 16 ч, вторая - с однократным 1 ч. Экстракты отделяют от жмыха центрифугированием и объединяют. Жмых используют для получения инсулина, а из экстракта высаливают ферменты различными концентрациями аммония сульфата (ДНКазу и РНКазу], добавляя кристаллический аммония сульфат до определенной степени насыщения при перемешивании и охлаждении. Фильтрат используют для получения химотрипсина, трипсина и пачтрипина.

Высол растворяют в воде (1:4) и в водном растворе осаждают балластные вещества добавлением аммония сульфата. Осадок отбрасывают, а к фильтрату добавляют 5 и. раствор натрия гидроксида до значения рН 4,5 и высаливают ДНКазу, медленно добавляя насыщенный раствор аммония сульфата до степени насыщения 0,4. Осадок ДНКазы отделяют и подвергают дальнейшей очистке. Из фильтрата осаждают РНКазу высаливанием аммония сульфатом до степени насыщения 0,8. Высол, содержащий аморфную РНКазу, отстаивают при 4-5°С в течение 40- 48 ч, жидкость сифонируют, а осадок отделяют на нутч-фильтре или центрифугированием. Полученную РНКазу очищают. Из фильтрата, содержащего комплекс ферментов, аммония сульфатом при степени насыщения 0,7 высаливают химотрипсин, трипсин и пан-трипин.

Из смеси ферментов получают неактивный химо-трипсиноген. Для этого осадок растворяют в воде, подкисленной кислотой серной до значения рН 3,0, при температуре не выше 5°С и медленно добавляют при перемешивании раствор аммония сульфата. Затем раствор подщелачивают 5 и. раствором натрия гидроксида до значения рН 5,0 и выдерживают при комнатной температуре до полного осаждения кристаллического химотрипсиногеиа.

Из фильтрата и промывных вод, полученных после отделения химотрипсиногеиа, выделяют трипсиноген высаливанием аммония сульфатом при лодкислении 5 н. кислотой серной до значения рН 3,0.

Фильтрат, оставшийся после выделения трипсина, подкисляют кислотой хлороводородной до значения рН 2,5 при температуре 5°С. Из подкисленного фильтрата добавлением кристаллического магния сульфата высаливают пантрипин совместно с балластными белками. Последние удаляют коагуляцией при нагревании раствора до температуры 90°С в течение I мин и быстром охлаждении до температуры 20- 25°С. Осадок балластных веществ отделяют фильтрованием. К фильтрату, объединенному с промывными водами, медленно при перемешивании добавляют кристаллический аммония сульфат и отстаивают в течение 12 ч при комнатной температуре. В результате образуется два осадка: аморфный и кристаллический. Темный аморфный осадок пантрипина отделяют от белого кристаллического осадка балластных веществ. Осадок пантрипина растворяют в воде и диализируют. По окончании диализа раствор фильтруют, стандартизуют по сухому остатку и силе ингибирующего действия пантрипина. Проводят стерилизующую фильтрацию, разливают во флаконы и подвергают сублимационной сушке.

Очистка индивидуальных ферментов продолжается несколько дней и состоит из ряда многократно повторяющихся операций.

Проводят 3-кратное высаливание ферментов аммония сульфатом до различной степени насыщения, изменяя значения рН. Каждый раз из фильтрата предварительно удаляют балластные вещества осаждением аммония сульфатом меньшей концентрации, чем применяемая при высаливании ферментов, затем осуществляют 5-кратную перекристаллизацию ферментов. Химотрипсиноген и трипсиноген активируют до образования химогрипсина и трипсина в соответствующих буферных растворах при пониженной температуре при добавлении кристаллика трипсина. Обессоливают ферменты диализом через целлофановую пленку. Сульфат-ионы осаждают бария хлоридом, а избыток иона бария удаляют на катионите КУ-2. В обессоленных растворах ферментов устанавливают необходимое значение рН, определяют концентрацию сухого вещества и разбавляют водой дистиллированной в соответствии с конечным содержанием сухого препарата во флаконах. Разбавленные растворы фильтруют через стерилизующие фильтры, разливают во флаконы и подвергают сублимационной сушке.

Дезоксирибонуклеаза (Desoxyribonucle-asa) представляет собой лиофилизированный белый порошок, легко растворимый в воде; значение рН 0,1% водного раствора составляет 3,0-5,5. В водных растворах фермент нестоек (срок годности 12 ч), термолабилен, инактивируется при температуре 55 ^йС. Активность определяют по образованию кислоторас-творимых продуктов, освобождаемых препаратом из ДНК в определенных условиях, и выражают в единицах активности (ЕА). В ( мг препарата должно содержаться не менее 1700 ЕА. Выпускают в герметически укупоренных флаконах по 5, 10, 25 и 50 мг.

Хранят в сухом, защищенном от света месте, при температуре не выше 20°С. Применяется как средство, вызывающее деполимеризацию и разжижение гноя и задерживающее развитие вирусов, содержащих ДНК (герпеса, аденовирусов и др.). Назначают в виде аэрозолей для ингаляций.

Рибонуклеаза аморфная (Ribonucleasum amorphum) - лиофилизированный порошок белого цвета, растворимый в воде. Активность определяют биологическим методом по количеству кислоторас-творимых веществ, освобождаемых препаратом в результате гидролиза кислоты рибонуклеиновой в определенных условиях. 1 ЕА соответствует 1 мг препарата. Выпускают в герметически укупоренных флаконах по 10, 25, 50 мг. Хранят в сухом, защищенном от света месте, при температуре не выше 15°С. Применяют местно в виде аэрозолей для ингаляций, внут-риплеврально, внутримышечно при заболеваниях, сопровождающихся гнойно-некротическими процессами.

Химотрипсин кристаллический (Chy-motrypsinum crystallisatum) представляет собой блестящие чешуйки или порошок белого цвета, легко растворимый в воде, значение рН 0,2% водного раствора составляет 4,5-6,5. Водные растворы быстро инак-тивируются. Выпускают в герметически укупоренных флаконах, содержащих по 5 и 10 мг кристаллического химотрипсина. Хранят в прохладном (не выше 10°С), защищенном от света месте. Применяют как рибо-нуклеазу.

Трипсин кристаллический (Tr^psinum crystallisatum) представляет собой пористую массу или порошок белого цвета, легко растворимый в воде, значение рН 0,2% водного раствора составляет 3,0- 3,5. В нейтральных и щелочных растворах препарат быстро разрушается. Выпускают в герметически укупоренных флаконах или в ампулах по 5 и 10 мг. Хранят в сухом, защищенном от света месте, при температуре не выше 10°С. Применяют как химотрипсин.

Пантрипин (Pantrypinum) - ингибитор про-теаз (трипсина, химотрипсина и др.), представляет собой лиофилизированный порошок желтоватого цвета, хорошо растворимый в воде. Стандартизуют биологическим путем по способности понижать активность трипсина. В 1 г препарата содержится не мепсе 650 ЕД. Выпускают в герметически укупоренных флаконах по 6, 12, 15, 20 и 30 ЕД. Хранят в сухом, защищенном от света месте, при температуре не выше 20°С. Применяют при панкреатитах, вводят внутривенно.

Препараты ферментов из семенников.

Роиидаза (Ronidasum) - препарат, содержащий фермент гиалуронидазу, получают из семенников половозрелого крупного рогатого скота. Семенники обрабатывают 2% раствором фенола в течение 5-15 мин, тщательно промывают водой, снимают оболочку и измельчают на волчке. Измельченные семенники заливают физиологическим раствором, содержащим 0,25% хлороформа в соотношении 1,0:0,5, и экстрагируют ро-нидазу при перемешивании в течение 35-40 мин. Экстракт отделяют фильтрованием, осадок отжимают под гидравлическим прессом, отжатую жидкость присоединяют к экстракту, разливают по кассетам из нержавеющей стали, сушат методом сублимации. Высушенный препарат измельчают в шаровой мельнице, расфасовывают в стеклянные флаконы по 5 и 10 г, герметически укупоривают. Хранят в защищенном от света месте при комнатной температуре. Применяют наружно при лечении рубцов (ожоговых, послеоперационных), контрактур суставов.

Лидаза (Lydasum) -препарат гиалуронидазо-вого действия. Для получения лидазы измельченные семенники крупного рогатого скота обрабатывают 0,1 н. раствором кислоты уксусной в отношении 1:2 при температуре 10°С и перемешивании в течение 4 ч. Надосадочиую жидкость отделяют if ацетоном осаждают фермент гиалуронидазу. Осадок растворяют в воде и процесс осаждения ацетоном повторяют три раза. Освобожденный от ацетона осадок очищенной гиалуронидазы растворяют в воде, фильтруют через стерилизующие фильтры, разливают во флаконы и высушивают методом сублимации. Выпускают во флаконах, содержащих по 64 УЕ (условные единицы) стерильного сухого вещества. Хранят в сухом, темном месте, при температуре не выше 15°С. Основными показаниями к применению лидазы являются контрактуры суставов, рубцы после ожогов и операций, анкилозирующий слондилоартрит, гематомы и др. Раствор вводят под кожу.

18.4. ПРЕПАРАТЫ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ

Пантокрин (Pantocrinum) - жидкий спиртовой экстракт из неокостенелых рогов (пантов) марала, пятнистого оленя, изюбра. Сухие панты обрабатывают паром, очищают от кожи и шерсти, распиливают на дисковой пиле на пластинки толщиной 3-4 мм, измельчают на дезинтеграторе. Измельченные панты экстрагируют 50% этанолом, подкисленным кислотой уксусной до значения рН 5,6-5,8, методом 4-кратной мацерации при периодическом помешивании. После каждой мацерации, продолжающейся 3 сут, экстракционную смесь фильтруют для отделения твердой фазы от извлечения. Спиртовой экстракт очищают от белков отстаиванием при температуре 4-8°С в течение 5-7 суток с последующим фильтрованием.

Стандартизуют по сухому остатку, которого в препарате должно быть 0,65-0,85%; значение рН экстракта устанавливают (применяя кислоту уксусную, или натрия гидроксид) в пределах 5,4-5,8; содержание этанола должно составлять 48-52%. Пантокрин выпускают во флаконах по 50 мл (капли для внутривенного применения) и ампулах по I и 2 мл (для подкожного или внутримышечного введения). Сохраняют в прохладном, защищенном от света месте. Применяют в качестве тонизирующего средства при переутомлении, гипотонии, неврозах.

Рантарин (Rantarinum) - этанольный экстракт из пантов северного оленя, рекомендован с лечебной и профилактической целью по тем же показаниям, что и пантокрин. Жидкий экстракт (1:1) из пантов самцов северного оленя получают методом реперко-ляции 40% этанолом. Он представляет собой опалес-цирующую жидкость светло-коричневого цвета со специфическим запахом. Используется как субстанция для приготовления таблеток. Состав на одну таблетку: рантарина - 0,5 мл, сахара молочного - 0,2 г, вспомогательных веществ (крахмал, тальк, кальция сте-арат) - до получения таблеток массой 0,25 г.

Витогепат (Vitohepatum) - водный очищенный экстракт из свежей печени крупного рогатого скота. Измельченную печень обрабатывают дважды водным фосфатным буфером (значение рН 7,5-8,0) при нагревании и перемешивании, каждый раз в продолжение 1 ч. В начале экстракции в течение 15 мин температуру поднимают до ПО-120°С. Термическая обработка (коагуляция) освобождает экстракт от белков. Водный экстракт отделяют фильтрованием или центрифугированием с последующим прессованием твердой фазы на гидравлическом прессе. Извлечения объединяют, охлаждают до 18-20°С, добавляют кристаллический аммония сульфат, тщательно перемешивают и оставляют до отстаивания на 24 ч. Образовавшийся после отстоя аморфный осадок отделяют от жидкой фазы фильтрованием и растворяют в 70% этаноле при нагревании до температуры 60°С. Раствор сгущают в вакууме до '/is первоначального объема, обезжиривают эфиром. Действующие вещества адсорбируют на угле активированном. Десорбцию осуществляют 77% этанолом. Элюат упаривают в вакууме при температуре 18-30°С до полного удаления этанола. Водный экстракт фильтруют через стерилизующие фильтры и разливают в ампулы по 2 мл.

Витогепат представляет собой прозрачную жидкость желтого цвета, значение рН 5,0-6,0, консервант- фенол (0,25-0,3%). Стандартизуют по циан-кобаламипу (витамин В]2), которого должно быть в 1 мл 10 мкг. Препарат содержит также кислоту фо-лиевую и другие антианемические факторы. Хранят в защищенном от света месте, при температуре не выше 20°С, замерзание недопустимо. Применяют как противоанемическое средство при злокачественном малокровии и других видах анемии.

Контрольные вопросы

1.  Как классифицируют препараты из животного сырья? Какие признаки положены в основу различных классификаций?

2.  Какие гормональные препараты получают из животного сырья?

3.  Укажите стадии технологического процесса получения препаратов высушенных желез,

4.  Приведите примеры препаратов, представляющих собой высушенные железы. Какие гормоны они содержат? В каких лекарственных формах выпускают эти препараты?

5.  Укажите стадии общей технологии высокоочищенных экстрактов из животного сырья.

6.  Назовите экстрагенты и методы экстракции, используемые для получения препаратов из животного сырья.

7.  Какие способы очистки применяют дли удалении жиров н балластных белков при получении лекарственных препаратов из животного сырья?

8.  Из каких стадий состоит общая технология выделения индивидуальные гормонов?

9.  Укажите способы очистки, применяемые для удаления низкомолекулярных веществ при получении лекарственных препаратов из животного сырья.

10.      Перечислите препараты, получаемые из передней доли гипофиза. В каких лекарственных формах их выпускают?

11.      Назовите препараты, получаемые из задней доли гипофиза. В каких лекарственных формах их выпускают?

12.      Из каких стадий состоит технологический процесс получения инсулина из поджелудочной железы?

13.      В чем заключается особенность получения инсулина М?

14.      Перечислите препараты инсулина. В каких лекарственных формах их выпускают?

15.      Какие ферментные препараты получают из поджелудочной железы крупного рогатого скота и в каких лекарственных формах их выпускают? Как применяют?

16.      Укажите ферментные препараты, получаемые из слизистой оболочки желудка свиней, из слизистой оболочки желудка телят и ягнят молочного возраста. В каких лекарственных формах их выпускают? Как применяют?

17.      Назовите ферментные препараты, получаемые из семенников крупного рогатого скота. В каких лекарственных формах их выпускают? Как применяют?

18.      Перечислите препараты из животного сырья, относящиеся к препаратам неспецифического действия.

19.      Какой препарат получают из печени крупного рогатого скота? В какой лекарственной форме его выпускают?

20.      Назовите препараты, получаемые из пант марала и северного оленя. В каких лекарственных формах их выпускают? Как применяют?

содержание      ..     13      14      15      16     ..